| 研究課題/領域番号 |
23591998
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| 研究機関 | 聖マリアンナ医科大学 |
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研究代表者 |
榎本 武治 聖マリアンナ医科大学, 医学部, 助教 (70350626)
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| 研究期間 (年度) |
2011-04-28 – 2014-03-31
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| キーワード | 国際情報交流 |
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| 研究概要 |
1．癌細胞由来の培養細胞株においてNPMを強制的に発現抑制下に，HBxの局在について観察する．2．変異型NPMをコントロールすることに肝癌標的治療の可能性があると考え，HBxペプタイドを作成しNPMにおける機能抑制を検討する． 3．in vivoにて肝癌発癌マウスを用いたNPMの強制発現抑制下においてHBｘの機能解析を行う．特に平成23年度においては，１．癌細胞由来の培養細胞株においてNPMを強制的に発現抑制下に，HBxの局在について観察する．（滅菌キャビネット，ヒト細胞用CO2インキュベーター，ローテーター，Custom Select siRNA Synthesis (Ambion)，各種抗体，共焦点レーザースキャン顕微鏡(LCM510)）２．Crm1複合体に対して特異的に陰性の作用を示すleptomicin Bの投与下に，NPMとHBxの関連を見るため，in vitroで共発現させたこの二つの蛋白質を検討する．（サーマルサイクラー，大腸菌用回転式振盪培養装置，アガロース用電気泳動槽，DNAオートシークエンサー，滅菌キャビネット，ヒト細胞用CO2インキュベーター，ローテーター，PAGE用電気泳動槽，In vitro translation kit（アマシャム）サーマルサイクラー，大腸菌用回転式振盪培養装置，アガロース用電気泳動槽，DNAオートシークエンサー，滅菌キャビネット，ヒト細胞用CO2インキュベーター，ローテーター，PAGE用電気泳動槽Western用セミドライトランスファー，各種抗体）NPMの発現抑制を行うにあたり，条件設定を調整している段階である．次の実験にはこの実験結果が必要であり，現在も調整を続けている．
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
4: 遅れている
理由
NPMの発現抑制を行うにあたり，条件設定を調整している段階である．次の研究にはこの実験結果の解析が必要であり，現在も早急に調整を続けている．
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| 今後の研究の推進方策 |
平成24年度として変異型NPMをコントロールすることに肝癌標的治療の可能性があると考え，HBxペプタイドを作成しNPMにおける機能抑制を検討する．NPM及び上記した点変異型NPMを用いてHBxペプタイドとミックスした上で，In vitro translation kitにて解析を行う．（サーマルサイクラー，大腸菌用回転式振盪培養装置，アガロース用電気泳動槽，DNAオートシークエンサー，滅菌キャビネット，ヒト細胞用CO2インキュベーター，ローテーター，PAGE用電気泳動槽，In vitro translation kit（アマシャム））の研究を行う予定である．
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| 次年度の研究費の使用計画 |
平成23年度の研究を早期に終了させて，平成24年度に予定している研究を開始したいと考えております．変異型NPMをコントロールすることに肝癌標的治療の可能性があると考え，HBxペプタイドを作成しNPMにおける機能抑制を検討する．NPM及び上記した点変異型NPMを用いてHBxペプタイドとミックスした上で，In vitro translation kitにて解析を行う．（サーマルサイクラー，大腸菌用回転式振盪培養装置，アガロース用電気泳動槽，DNAオートシークエンサー，滅菌キャビネット，ヒト細胞用CO2インキュベーター，ローテーター，PAGE用電気泳動槽，In vitro translation kit（アマシャム））を行うために研究費を使用する予定である．
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