| 研究課題/領域番号 |
23592016
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| 研究機関 | 熊本大学 |
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研究代表者 |
杉田 裕樹 熊本大学, 医学部附属病院, 非常勤診療医師 (30398218)
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| 研究分担者 |
高森 啓史 熊本大学, 大学院生命科学研究部, 准教授 (90363514)
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| 研究期間 (年度) |
2011-04-28 – 2014-03-31
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| キーワード | RTK / 一酸化窒素(NO) / IGF-iR / EGFR / MEK / PI3-K / IRS-1 / MAPK |
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| 研究概要 |
癌細胞においてIGF-I, EGF等の増殖シグナルは重要である。IGF-IR, EGFRの下流のシグナルにPI3-K pathwayおよびMAPK pathwayの２つのpathwayが存在している。これまで我々研究クループは一酸化窒素（NO）がIGF-IR, IRS-1、Ak/PKBのリン酸化を抑制する反面ERKのリン酸化を増強させること、さらにIGF-IRのアダプター蛋白であるIRS-1はNOによりubiquitin化し分解が促進することを発見し発表してきた。本研究の目的はIGF-IR, EGFR等のtyrosine receptor kinase (RTK)におけるリン酸化の制御のメカニズムを明らかにすることである。MEK inhibitorによる癌細胞MIAPaCa-2および大腸癌細胞HCT116においてMEK inhibitor (MEK-I,U0126）は下流のERK1/2のリン酸化を抑制すると同時にIGF-IR, EGFRのリン酸化を逆に増強させることを明らかにした。これらの癌細胞株においてMEK inhibitor (U0126)およびＮＯドナー（GSNO）の同時添加はPI3K pathwayおよびMAPK pathwayの両方を抑制し、さらに多くの癌細胞株にて２剤の同時添加はより強力な細胞増殖抑制効果を示した。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
本研究では次の仮説を検証する予定である。仮説1：NO はtyrosine receptor kinase (RTK)のS-nitrosylationによってligandによるリン酸化を抑制する。仮説2：NOまたはMEK inhibitorによるRTKリン酸化の制御には第３の物質（蛋白質）が必要である。仮説3：NO donor + MEK-Iはマウス膵癌移植モデルにおいて癌の増殖・転移を抑制する。MEK inhibitor (U0126)およびＮＯドナー（GSNO）の同時添加はPI3K pathwayおよびMAPK pathwayの両方を抑制し、さらに多くの癌細胞株にて２剤の同時添加はより強力な細胞増殖抑制効果を示したが、これをマウス膵癌移植モデルにて検討する必要がある。また、仮説１，２は実験のDNA construct 合成等の準備段階である。
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| 今後の研究の推進方策 |
仮説1：NO はtyrosine receptor kinase (RTK)のS-nitrosylationによってligandによるリン酸化を抑制する。はDNA constructが完成次第開始する予定である。仮説2：NOまたはMEK inhibitorによるRTKリン酸化の制御には第３の物質（蛋白質）が必要である。はDNA constructが完成次第Yeast two Hybridを開始する予定である。仮説3：NO donor + MEK-Iはマウス膵癌移植モデルにおいて癌の増殖・転移を抑制する。はまずＮＯドナーのdose決定から開始する予定である。
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| 次年度の研究費の使用計画 |
試薬(抗体を含む)、培地・胎児牛血清、X線フィルム、実験器具（消耗品）、実験動物（ヌードマウス）、動物飼育代等の実験に必要物品の購入費が必要である。
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