| 研究課題/領域番号 |
23592094
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| 研究機関 | 長崎大学 |
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研究代表者 |
林 健太郎 長崎大学, 大学病院, 講師 (40404222)
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| 研究分担者 |
竹下 朝規 長崎大学, 大学病院, その他 (30597365)
豊田 啓介 長崎大学, 大学病院, その他 (40597366)
馬場 史郎 長崎大学, 医歯(薬)学総合研究科, 研究協力員 (30530430)
出雲 剛 長崎大学, 医歯(薬)学総合研究科, 助教 (40343347)
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| キーワード | blood brain barrier / hypertension / glioma / hyperglicemia |
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| 研究概要 |
ラット脳より内皮細胞，ペリサイト，アストロサイトを分離し，共培養して血液脳関門（BBB）in vitro modelを作成した．モデルではtight junction機能の指標である電気抵抗値(TEER)が100オーム以上あり，適切に作成されたものと評価された．advanced glycation endoproducts (AGEs)により増強される低酸素化再酸素化負荷と血管原性脳浮腫の実験を行った．さらに低酸素化再酸素化に対しcilostazolがBBBに与える影響について検討した．AGEsはnormoxiaの条件下ではTEERに影響を与えなかったが，低酸素化再酸素化では有意ににTEERを減少させた．一方，cilostazolはAGEs投与下のH/Rの条件でTEERを回復させた．免疫染色でtight junction蛋白のclaudin-5の形態的評価を行い，western blot analysisでは定量的評価を行った．AGEsは低酸素再酸素化の条件でclaudin-5の発現を減少させたが，cilostazolはclaudin-5の発現を回復させた．さらに，AGEsは細胞外のTGF-β1の産生を上昇させた．cilostazolはその産生を抑制しtight junctionの統合性を回復した．学術誌に発表した(Mol Cell Neurosci. 2014 in press)．
また，同様に作成したBBB in vitro modelを用いて，脳腫瘍(glioblastoma) cell lineのLN-18と肺癌cell lineのNCI-H1299を用いてBBB機能と細胞浸潤について検討した．NCI-H1299は内皮細胞により構築されたバリアを通過し，BBB機能を低下させた．LN-18はバリアを通過せ，fibroblast growth factor 2 (FGF2)を介してoccludinとZO-1の発現を上昇させ，BBB機能を上昇させた．FGF2の中和抗体を投与するとその効果は抑制された．BBBと細胞浸潤および脳転移についての病態解明に発展する可能性がある．学術誌に発表した (Cell Mol Neurobiol. 2013 May;33(4):489-501)．
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