| 研究課題/領域番号 |
23592119
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| 研究機関 | 浜松医科大学 |
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研究代表者 |
徳山 勤 浜松医科大学, 医学部附属病院, 講師 (90313957)
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| 研究分担者 |
難波 宏樹 浜松医科大学, 医学部, 教授 (60198405)
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| 研究期間 (年度) |
2011-04-28 – 2014-03-31
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| キーワード | 人工多能性幹細胞 / 悪性グリオーマ / 移動能 |
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| 研究概要 |
mouseiPS細胞の腫瘍への移動能をMatrigel invasion assayを用い検討した。(1)chamber上層にiPS細胞、chamber下層に各種脳腫瘍cell lineのcondition medium(CM)を入れ下層へと移動したiPS細胞を数えたところ、下層にDMEMを入れたcontrolに比し、CM群は移動したiPS細胞が優位に増加していた。(2)同様に、下層にcondition mediumでなく、悪性グリオーマが分泌する成長因子であるVEGF、PDGF-BB、SDF-1α、SCFを濃度を変更（0.1-100 ng/ml）しDMEMに入れたものを使用し、iPS細胞の移動能を検証したところ、濃度依存的に移動した細胞数は増加していた。(3)さらに上記で検証した各種growth factors（VEGF、PDGF-BB、SDF-1α、SCF）に対する一次抗体を濃度変更(1-10μg/ml）しながらcondition medium内に投与し、chamber下層に入れ、上層にiPS細胞を入れ、iPS細胞の移動能の評価を行ったところ、抗体によって移動する細胞数は減少した。(4)続いてiPS細胞のVEGF、PDGF-BB、SDF-1α、SCFに対するreceptorである、VEGFR、ICAM1、CXCR4、 c-Kitの発現をRT-PCR法において検証したところ、fibloblastと比較してiPS細胞での発現が上昇していた。 これにより、iPS細胞の腫瘍への移動能に各々のgrowth factor/receptor interactionsが関与していると考えられた。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
平成23年度のvitroの実験はおおむね順調である。
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| 今後の研究の推進方策 |
今後、mouse iPS細胞の脳内での移動能の実験にむけて研究をすすめる。そのために(1)マウス脳腫瘍モデルの作成(2)iPS-SPIO細胞の作成マウス脳内に注入したiPS細胞の移動能をMRIで観察できるように、SPIO(Resovist)をiPS細胞にtransfectionし、iPS-SPIO細胞を作成する。これらを用いて、マウス脳腫瘍モデルを用い、iPS-SPIO細胞の腫瘍への移動能の評価を行う予定である。
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| 次年度の研究費の使用計画 |
培養液等の試薬、実験器具、実験動物、飼育費、MRI使用量、解析用のコンピューター、学会旅費等に研究費を使用する予定である。
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