新しい細胞塊培養による婦人科癌の抗癌剤感受性試験の確立と応用

2011 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 23592448
• 研究機関: 大阪大学
• 研究代表者: 吉野 潔 大阪大学, 医学(系)研究科(研究院), 講師 (90362730)
• 研究分担者: 榎本 隆之 大阪大学, 医学(系)研究科(研究院), 准教授 (90283754) ; 藤田 征巳 大阪大学, 医学(系)研究科(研究院), 講師 (60303963) ; 上田 豊 大阪大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (10346215) ; 木村 敏啓 大阪大学, 医学部附属病院, 助教 (90584524)
• 研究期間 (年度): 2011-04-28 – 2014-03-31
• キーワード: 子宮頸癌 / 子宮体癌 / 卵巣癌 / CTOS / 初代培養 / 抗癌剤感受性

研究概要

現在、癌の治療戦略において抗癌剤治療は重要な役割を果たしている。婦人科癌治療において抗癌剤の選択は過去の臨床データの蓄積によって行われているが個々の患者に対し予め抗癌剤感受性を行うことにより効果の期待できる薬剤の選択が可能であれば患者および医療サイドの双方に大きなメリットがあると考えられる。我々は新たに開発された初代培養法：CTOSを婦人科腫瘍に応用し抗癌剤感受性試験を確立し難治性婦人科悪性腫瘍患者の治療方針決定に役立てることを目的とした。初年度である平成23年度は婦人科悪性腫瘍組織からCTOSを作製することを当面の目標として研究を開始した。手術により摘出された子宮体癌組織・卵巣癌組織に機械的・化学的処理を加えたのち篩にかけ直径が数十から数百マイクロメーターの腫瘍細胞塊（オルガノイド）を回収。幹細胞培地で数時間浮遊培養したのちピペット操作を繰り返し表面が平滑な球状の構造物（CTOS）が得られることを確認した。得られたCTOS をマウスに移植しxenograft から腫瘍の増殖を確認した。PCRおよび免疫染色を用いてマウスに移植し増殖した腫瘍の上皮がヒト由来であり間質はマウス由来であることも確認している。CTOS培養液に抗癌剤（シスプラチン）を添加しATP 法を用いて感受性試験を行った。この方法は細胞のviabilityの判定を細胞内のATPを定量することにより行い抗癌剤非投与のCTOSと比較する。ATP活性は専用のルミノメーターで測定を行った。上記の標本採取から抗癌剤感受性試験までの一連の研究過程の中で子宮体癌の29例中29例全例でCTOS作成に成功している。そのうち15例はCTOSの増大を認め抗癌剤感受性試験を行った。卵巣癌においては12例中10例でCTOS作成しえたがそのうち9例は培養ディッシュに接着したため抗癌剤感受性試験に至っていない。

現在までの達成度 (区分)

3: やや遅れている

理由

子宮体癌組織からのCTOS作成および感受性試験は順調に進んでいる。しかし卵巣癌組織からはCTOS 作成は困難な状況が続いている。これは卵巣癌細胞の性質が子宮体癌細胞と異なり接着性が高く、球状（spheroid）の形態をとる前に培養ディッシュに張り付く状態になってしまうことによる。これを解決するためにマトリゲル内での培養を開始している

今後の研究の推進方策

トラブルシューティングに関しては連携研究者の大阪成人病センター井上らと検討を行い培養条件を変えてみる。抗癌剤感受性試験がうまくいかないときはATP法以外の方法を行ってみる。

次年度の研究費の使用計画

主として培養液、試薬、ディッシュなどの消耗品に研究費を使用する予定である。

研究成果

• [雑誌論文] Second-line Chemotherapy for Advanced or Recurrent Endometrial Carcinoma Previously Treated with Paclitaxel and Carboplatin,with or without Epirubicin. (2011)
  • 著者名/発表者名: Ueda Y,Miyake T,Egawa-Takata T,Miyatake T,Matsuzaki S,Yokoyama T,Yoshino K,Fujita M,Enomoto T,Kimura T.
  • 雑誌名: Cancer Chemoth Pharm 巻: 67(4) ページ: 829-35
  • 査読あり
• [雑誌論文] CRABP1 reduced expression is associated with poorer prognosis in serous and clear cell adenocarcinoma. (2011)
  • 著者名/発表者名: Miyake T,Ueda Y,Matsuzaki S,Miyatake T,Yoshino K,Fujita M,Nomura T,Enomoto T,Kimura T.
  • 雑誌名: J Cancer Res Clin Oncol 巻: 137(4) ページ: 715-22
  • 査読あり
• [雑誌論文] Recurrent endometrial carcinoma:Prognosis for patients with recurrence within six to twelve months is worse relative at 12 months or later. (2011)
  • 著者名/発表者名: Miyake T,Ueda Y,Egawa-Takata T,Matsuzaki S,Yokoyama T,Miyoshi Y,Kimura T,Yoshino K,Fujita M,Yamasaki M,Enomoto T,Kimura T.
  • 雑誌名: Am J Obstet Gynecol 巻: 204(6) ページ: 535e-1-5
  • 査読あり
• [雑誌論文] Usefulness of computed tomography in predicting cytoreductive surgical outcomes for ovarian cancer. (2011)
  • 著者名/発表者名: Fujiwara K,Yoshino K,Enomoto T,Fujita M,Ueda Y,Miyatake T,Kimura T,Muraji M,Fujita H,Kimura T,Hori M.
  • 雑誌名: Arcd Gynecol Obstet 巻: 284(6) ページ: 1501-7
  • 査読あり
• [雑誌論文] Chemotherapy for endometrial carcinoma(GOGO-EM1 study):TEC(paclitaxel,epirubicin and carboplatin) is an effective remission-induction and sdjuvant therapy (2011)
  • 著者名/発表者名: Egawa-Takata T,Ueda Y,Kuragaki C,Miyake T,Miyatake T,etc
  • 雑誌名: Cancer Chemother Pharmacol 巻: 68(6) ページ: 1603-10
  • 査読あり
• [雑誌論文] Intraoperative frozen section assessment of myometrial invasion and histology of endometrial (2011)
  • 著者名/発表者名: Ugaki H,Kimura T., Miyatake T., Ueda Y.,Yoshino K., Matsuzaki S., Fujita M., Kimura T., Morii E., Enomoto T.
  • 雑誌名: Int J Gynecol Cancer 巻: 21 ページ: 1180-4
  • 査読あり
• [雑誌論文] A successful case of abdominal radical trachelectomy for cervical cancer during pregnancy. (2011)
  • 著者名/発表者名: Enomoto T,Yoshino K., Fujita M., Miyoshi Y., Ueda Y., Koyama S, Kimura T., Tomimatsua T., Kimura T.
  • 雑誌名: Eur J Obstet Gynecol Reprod Biol 巻: 158(2) ページ: 365-6
  • 査読あり
• [雑誌論文] Metastatic Mucinous Adenocarcinoma of the Ovary Is Characterized by Advanced Patient Age, Small Tumor Size, and Elevated Serum CA125. (2011)
  • 著者名/発表者名: Maeda-Taniguchi M, Ueda Y, Miyake T, Miyatake T, Kimura T, Yoshino K, Fujita M, Wakasa T, Ohashi H, Morii E, Enomoto T, Kimura T.
  • 雑誌名: Gynecol Obstet Invest 巻: 72(3) ページ: 196-202
  • 査読あり
• [雑誌論文] 【子宮頸癌-予防と妊孕性温存のための治療戦略】 妊孕性温存のための治療戦略 広汎子宮頸部摘出術の術式(解説/特集). (2011)
  • 著者名/発表者名: 榎本隆之,森本晶子, 吉野 潔, 木村 正
  • 雑誌名: 臨床婦人科産科 巻: 5(10) ページ: 1248-53
  • 査読あり
• [雑誌論文] トラケレクトミー手術手技を学ぶ 当科における広汎性子宮頸部摘出術(解説). (2011)
  • 著者名/発表者名: 榎本隆之,吉野 潔, 藤田征巳, 上田 豊, 木村敏啓, 木村 正
  • 雑誌名: 産婦人科の進歩 巻: 63(3) ページ: 374-7
  • 査読あり
• [雑誌論文] 【これだけは知っておきたい子宮頸癌の診断・治療と予防】 妊娠を合併した子宮頸癌の取り扱い(解説/特集). (2011)
  • 著者名/発表者名: 森本晶子,榎本隆之, 吉野 潔, 三好ゆかり, 木村 正
  • 雑誌名: 産婦人科治療 巻: 102(6) ページ: 6961-5
  • 査読あり
• [雑誌論文] Dissection of unsuspicious para-aortic lymph nodes does not improve prognosis of advanced endometrial carcinoma with intra- or extra-abdominal metastasis. (2011)
  • 著者名/発表者名: Ueda, Y.,Okazawa, M., Enomoto, T., Egawa-Takata, T., Kimura, T., Yoshino K., Fujita, M., Ohta, Y., Kamiura, S., Kimura, T.
  • 雑誌名: Anticancer Res. 巻: 31(12) ページ: 4513-7
  • 査読あり
• [雑誌論文] HB-EGF and PDGF Mediate Reciprocal Interactions of Carcinoma Cells with Cancer-Associated Fibroblasts to Support Progression of Uterine Cervical Cancers. (2011)
  • 著者名/発表者名: Murata T, Mizushima H, Chinen I, Moribe H, Yagi S, Hoffman RM, Kimura T, Yoshino K, Ueda Y, Enomoto T, Mekada E.
  • 雑誌名: Cancer Res. 巻: 71(21) ページ: 6636-42
  • 査読あり
• [雑誌論文] 妊娠15週で腹式広汎性子宮頸部摘出術を施行した1例 (2011)
  • 著者名/発表者名: 榎本隆之,三好ゆかり、吉野 潔、藤田征巳、香山晋輔、木村 正
  • 雑誌名: 産婦人科の進歩 巻: 63(3) ページ: 373
  • 査読あり