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2012 年度 実施状況報告書

子宮頸癌発生に関与する腟内変異原分子の探索と検知機器開発の基礎的検討

研究課題

研究課題/領域番号 23592462
研究機関慶應義塾大学

研究代表者

藤井 多久磨  慶應義塾大学, 医学部, 講師 (10218969)

研究分担者 大熊 廣一  東洋大学, 生命科学部, 教授 (30297733)
キーワード子宮頸部腫瘍 / サイトカイン / パピローマウイルス / 細菌性腟症
研究概要

(背景)腟内に嫌気性菌が異常増殖した場合、プトレシン、カダベリン、トリメチルアミンなどのアミン化合物が嫌気性菌により産生され、ニトロソアミンなどの変異原物質に変換され、子宮頸癌発生機構に関与している可能性がある。本研究では、(1)これら一連のアミン化合物を含め、子宮頸部前癌病変患者の腟内分泌物中に存在する低分子物質を網羅的に解析するとともに、これらの化学成分が腟内分泌物の臭気成分として関与していることから腟内分泌物の臭気を簡易的に計測するニオイセンサの開発を行っている。
(方法)子宮頸部前癌病変患者の腟内分泌物中に存在する低分子物質を網羅的に解析するため、GC/MSによる分析方法を検討している。GC/MSではプトレシン、カダベリン、トリメチルアミンなどのアミン化合物を直接測定する事は難しく、誘導体化等の前処理が必要となる。そこで、誘導体化試薬1,1,1-trifluoroacetylacetone(TFAA)を用いてこれらアミンの誘導体化条件を検討した。一方、子宮頸部前癌病変患者の腟内分泌物中に存在する低分子物質に起因する臭気を簡易的に計測するニオイセンサシステムの開発では、ニオイセンサとして安価で耐久性に優れた酸化物半導体素子を使用し、沸点が低い低分子物質の臭気を解析できるようシステム開発を行っている。
(結果)GC/MSでアミン化合物を測定するため、アミン標準試料としてプトレシンを用いTFAAを用いて誘導体化条件の検討を行った。プトレシンおよびTFAAのモル濃度比率が1 : 4、95 ℃、15分加熱、室温まで冷却した後、プトレシン誘導体を窒素気流下で乾固させた。GC/MS分析には、このプトレシン誘導体乾固物にエタノールを加えて溶解したものを試料とした。この結果、GC/MSのよりプトレシンのMSスペクトルが観測された。

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

本研究では下記に示す4つの計画から構成されている。1.子宮頸部前癌病変患者における腟内細菌叢の分析2.子宮頸部前癌病変患者における局所免疫応答の解析3.腟内分泌物から検出されるアミン化合物および低分子物質の探索4.ニオイセンサの臨床応用をめざした基礎的検討。
1,2については前年度に行い、解析中である。予備的結果から、腟内細菌叢が産生する分子が前癌病変に対しなんらかの影響を与えていると考えられた。その原因追求のためには3.について遂行する意義があると考え、現在、MS解析の予備実験を行っている。これらの解析結果を臨床現場へ応用するために新しい機器を開発することを模索しており、4.について準備を進めている。これまで沸点が低い低分子物質の臭気を解析できるニオイセンサシステムなかったので、その開発を行った。ここでは、システム内に試料を配置する試料ホルダーにサーモモジュールを使用し、試料温度を低温(-10℃)から高温まで制御できるシステムとした。この結果、ニオイ測定開始直後は、試料温度を低温に保ち低沸点成分の揮散を抑制し、その後、試料温度を順次上昇することで低沸点成分の臭気を分離して計測できることが可能となった。今後、子宮頸部前癌病変患者の腟内分泌物の低沸点成分の臭気を解析し、健常者との比較検討を行っていく。

今後の研究の推進方策

MS解析にあたり、セットアップに時間がかかっているが、研究は概ね順調に進んでおり、今後も研究分担者と継続的に連絡を蜜にとりながら研究を遂行していく。

次年度の研究費の使用計画

MSにかかる消耗品費用とニオイセンサの改良に費用をかける。そのほか、局所免疫応答が子宮頸癌培養細胞に及ぼす効果を解析するために培養細胞実験にかかわる試薬に費用を充当する。未使用額の発生は効率的な物品調達を行った結果であり、翌年度の消耗品購入に充てる予定である。

  • 研究成果

    (12件)

すべて 2013 2012

すべて 雑誌論文 (7件) (うち査読あり 7件) 学会発表 (4件) (うち招待講演 3件) 図書 (1件)

  • [雑誌論文] Rapid genotyping of carcinogenic human papillomavirus by loop-mediated isothermal amplification using a new automated DNA test(Clinichip HPV TM)2013

    • 著者名/発表者名
      Satoh T, Matsumoto K, Fujii T, Sato O, Gemma N, Onuki M, Saito H, Aoki D, Hirai Y, Yoshikawa H
    • 雑誌名

      J Virol Methods

      巻: 188 ページ: 83-93

    • DOI

      10.1016/j.jviromet.2012.10.014.

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Subsequent risks for cervical precancer and cancer in women with low-grade squamous intraepithelial lesions unconfirmed by colposcopy-directed biopsy:results from a multicenter, prospective, cohort study2012

    • 著者名/発表者名
      Matsumoto K, Hirai Y, Furuta R, Takatsuka N, Oki A, Yasugi T, Maeda H, Mitsuhashi A, Fujii T, Kawana K, Iwasaka T, Yaegashi N, Watanabe Y, Nagai Y, Kitagawa T, Yoshikawa H
    • 雑誌名

      Int J Clin Oncol

      巻: 17 ページ: 233-239

    • DOI

      10.1007/s10147-011-0280-9.

    • 査読あり
  • [雑誌論文] HLA Class II DRB1*1302 Allele Protects Against Progression to Cervical Intraepithelial neoplasia grade 32012

    • 著者名/発表者名
      Matsumoto K, Hirai Y, Furuta R, Takatsuka N, Oki A, Yasugi T, Maeda H, Mitsuhashi A, Fujii T, Kawana K, Iwasaka T, Yaegashi N, Watanabe Y, Nagai Y,Kitagawa T, Yoshikawa H
    • 雑誌名

      Int J Gynecol Cancer

      巻: 22 ページ: 471-478

    • DOI

      10.1097/IGC.0b013e3182439500.

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Reduction of NOTCH1 expression pertains to maturation abnormalities of keratinocytes in squamous neoplasia2012

    • 著者名/発表者名
      Sakamoto K, Fujii T, Kawachi H, Miki Y, Omura K, Morita K, Kayamori K, Katsube , Yamaguchi A
    • 雑誌名

      Lab Invest

      巻: 92 ページ: 688-702

    • DOI

      10.1038/labinvest.2012.9.

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Tumor volume and lymphovascular space invasion as a prognostic factor in early invasive adenocarcinoma of the cervix2012

    • 著者名/発表者名
      Murakami I, Fujii T, Kameyama K, Iwata T, Saito M, Kubushiro K, Aoki D
    • 雑誌名

      J Gynecol Oncol

      巻: 23 ページ: 153-158

    • DOI

      10.3802/jgo.2012.23.3.153.

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Lobular endocervical glandular hyperplasia and peritoneal pigmentation associated with Peutz-Jeghers syndrome due to a germline mutation of STK112012

    • 著者名/発表者名
      Hirasawa A, Akahane T, Kobayashi Y, Masuda K, Banno K, Fujii T, Susumu N, Tsubo T, Kameyama K, Sugano K, Aoki D
    • 雑誌名

      Annals of Oncology

      巻: 23 ページ: 2990-2992

    • DOI

      10.1093/annonc/mds492.

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Association between carotenoids and outcome of cervical intraepithelial neoplasia: a prospective cohort study2012

    • 著者名/発表者名
      Fujii T, Takatsuka N, Nagata C, Matsumoto K, Oki A, Furuta R, Maeda H, Yasugi T, Kawana K, Mitsuhashi A, Hirai Y, Iwasaka T, Yaegashi N, Watanabe y, Nagai Y, Kitagawa T, Yoshikawa H
    • 雑誌名

      Int J Clin Oncol

      巻: in press ページ: in press

    • 査読あり
  • [学会発表] 子宮頸がん検診における患者管理指針の確立をめざしてーCINtec PLUS kitの有用性ー2012

    • 著者名/発表者名
      藤井多久磨
    • 学会等名
      51回日本臨床細胞学会秋期大会
    • 発表場所
      新潟
    • 年月日
      20121109-20121110
    • 招待講演
  • [学会発表] HPV検査とHPV感染予防ワクチンの現状と展望2012

    • 著者名/発表者名
      藤井多久磨
    • 学会等名
      64回日本気管食道科学会総会
    • 発表場所
      東京
    • 年月日
      20121108-20121109
    • 招待講演
  • [学会発表] Retrospective analysis of abdominal radical trachelectomy in our 140 cases.2012

    • 著者名/発表者名
      Fujii T
    • 学会等名
      14th Biennial Meeting of the International Gynecologic Cancer Society
    • 発表場所
      カナダ、バンクーバ
    • 年月日
      20121013-20121016
  • [学会発表] 子宮頸部上皮内病変のマネージメントーHPV時代のアップデートー・HPVジェのタイピングの適応とその意義2012

    • 著者名/発表者名
      藤井多久磨
    • 学会等名
      64回日本産科婦人科学会学術講演会
    • 発表場所
      神戸
    • 年月日
      20120413-20120415
    • 招待講演
  • [図書] 婦人科がん 低侵襲手術2012

    • 著者名/発表者名
      進伸幸、片岡史夫、西尾浩、山上亘、野村弘行、藤井多久磨
    • 総ページ数
      65 (14-17)
    • 出版者
      メジカルビュー社

URL: 

公開日: 2014-07-24  

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