卵巣明細胞腺癌幹細胞マーカーの同定および標的分子としての臨床応用

2013 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 23592471
• 研究機関: 東北大学
• 研究代表者: 鈴木 吉也 東北大学, 東北メディカル・メガバンク機構, 准教授 (30422116)
• 研究分担者: 山口 壹範 地方独立行政法人宮城県立病院機構宮城県立がんセンター(研究所), 発がん制御研究部, 主任研究員 (80373215)
• キーワード: 卵巣癌 / がん幹細胞 / 表面マーカー / 免疫不全マウス / フローサイトメトリー

研究概要

卵巣癌がしばしば示す治療抵抗性獲得機構には癌幹細胞が関与している事が最近の研究で明らかとなってきた。本研究ではフローサイトメトリーFACSAriaIIによる細胞分取法と超免疫不全マウス(NOGマウス)による腫瘍in vivo assay法を活用し卵巣癌幹細胞に特異的なマーカーの同定を目指した。我々は卵巣癌の中でも特に予後不良な卵巣明細胞腺癌に注目し、卵巣明細胞腺癌特異的マーカー分子同定を目指した。平成２３年度は研究計画１として、卵巣明細胞腺癌に特異的に発現する癌幹細胞マーカーを同定するために、卵巣明細胞腺癌株（４種）およびコントロール用に他組織型卵巣癌株（5種）を用い、各種癌幹細胞マーカーの発現を①FACS AriaIIを用いて発現解析、比較検討を行い、これらの中から癌幹細胞マーカー候補を検索した。その後幹細胞の性質の有無を、②Sphere colony assay③NOGマウス接種により確認した。特にES2細胞とTOV21GがNOGマウス接種後に非常に強い腫瘍増職能を示した事から、我々はこの二つの細胞株を用いて、いくつかの卵巣がん幹細胞マーカー候補分子を目印にしてさらに分画し、NOGマウスに接種を行った。なかでもEpCAM(+)とEpCAM(-)で分画した場合、EpCAM(-)分画の方が高い腫瘍増殖傾向を示した。平成２４年度は<研究計画３>候補癌幹細胞マーカーに対するEpCAMノックダウンsiRNA導入による機能解析を実行した。卵巣がん細胞株にドキシサイクリン誘導型のEpCAM遺伝子をレンチウイルスベクターにより導入しEpCAM遺伝子がドキシサイクリン投与により発現抑制される事を確認した。平成２５年度はこの遺伝子導入細胞株を用いて成長曲線を調べた所、ドキシサイクリンでEpCAM発現抑制された細胞株が増殖抑制される事が明らかとなった。これらin vivoとin vitroでそれぞれ相反する結果となったがその作用機序については不明である。

研究成果

• [雑誌論文] Suppressive expression of CD274 increases tumorigenesis and cancer stem cell phenotypes in cholangiocarcinoma. (2014)
  • 著者名/発表者名: Tamai K, Nakamura M, Mizuma M, Mochizuki M, Yokoyama M, Endo H, Yamaguchi K, Nakagawa T, Shiina M, Unno M, Muramoto K, Sato I, Satoh K, Sugamura K, Tanaka N.
  • 雑誌名: Cancer Sci 巻: Mar 26 ページ: In press
  • 査読あり
• [雑誌論文] Decreased Expression of 14-3-3σ is Predictive of Poor Prognosis for Patients with Human Uterine Papillary Serous Carcinoma. (2013)
  • 著者名/発表者名: Suzuki F, Nagase S, Suzuki K, Oba E, Hiroki E, Matsuda Y, Akahira J, Nishigori H, Sugiyama T, Otsuki T, Yoshinaga K, Takano T, Niikura H, Ito K, Sasano H, and Yaegashi N.
  • 雑誌名: Tohoku J Exp Med 巻: 231 ページ: 193-199
  • 査読あり
• [雑誌論文] Enhanced expression of long non-coding RNA HOTAIR is associated with the development of gastric cancer. (2013)
  • 著者名/発表者名: Endo H, Shiroki T, Nakagawa T, Yokoyama M, Tamai K, Yamanami H, Fujiya T, Sato I, Yamaguchi K, Tanaka N, Iijima K, Shimosegawa T, Sugamura K, Satoh K.
  • 雑誌名: PLoS One 巻: 8 ページ: e77070
  • 査読あり
• [雑誌論文] CD271 defines a stem cell-like population in hypopharyngeal cancer. (2013)
  • 著者名/発表者名: Imai T, Tamai K, Oizumi S, Oyama K, Yamaguchi K, Sato I, Satoh K, Matsuura K, Saijo S, Sugamura K, Tanaka N.
  • 雑誌名: PLoS One 巻: 8 ページ: e62002
  • 査読あり