コンフォーカルマイクロエンドスコープを用いた新しい内耳遺伝子導入方法の開発

2014 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 23592480
• 研究機関: 京都大学
• 研究代表者: 田浦 晶子 京都大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (70515345)
• 研究分担者: 中川 隆之 京都大学, 医学(系)研究科(研究院), 講師 (50335270) ; 坂本 達則 京都大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (60425626) ; 北尻 真一郎 京都大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (00532970) ; 戎 富美 京都大学, 医学(系)研究科(研究院), 研究員 (70596197) [辞退]
• 研究期間 (年度): 2011-04-28 – 2015-03-31
• キーワード: 遺伝子導入 / 内耳有毛細胞

研究実績の概要

1) 標的細胞への遺伝子導入効率改善：内耳有毛細胞への遺伝子導入は依然困難とされている。そこで昨年度まではaliveな状態で顕微鏡下に有毛細胞を同定し、微小ガラス管を用いて注入し、微小連流を流す事で遺伝子導入を試みた。一部で有毛細胞への遺伝子導入が可能であったものの、導入効率の改善には至らなかった。そのため、昨年度は有毛細胞ではなく、iPS細胞へ遺伝子導入し、有毛細胞への分化誘導を試みた。iPS細胞への遺伝子導入はレポーター遺伝子GFPはFuGeneにて70-80%の高効率で導入可能であった。しかし、機能遺伝子導入等を試みたが、内耳有毛細胞への分化誘導効率が低く、有毛細胞は確認出来なかった。
2）コンフォーカルマイクロエンドスコープによる観察：内耳有毛細胞をMyo7Aやphalloidinにて染色後コンフォーカルマイクロエンドスコープにて観察した。組織に接着させると何とか同定は可能であったが、接着させずに近傍から観察を行う場合には解像度の面でまだ改良の余地があると思われた。

研究成果

• [雑誌論文] トピックス 内耳再生医療 (2014)
  • 著者名/発表者名: 田浦晶子
  • 雑誌名: Equilibrium Research 巻: 73 ページ: 538-542
  • オープンアクセス
• [雑誌論文] Effects of mouse utricle stromal tissues on hair cell induction from induced pluripotent stem cells (2014)
  • 著者名/発表者名: Taura A, Ohnishi H,Ochi S, Ebisu F, Nakagawa T, Ito J
  • 雑誌名: BMC Neurosci 巻: 15 ページ: 121
  • DOI: 10.1186/s12868-014-0121-7
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] One-third of vertiginous episodes during the follow-up period are caused by benign paroxysmal positional vertigo in patients with Meniere's disease (2014)
  • 著者名/発表者名: Taura, A. Funabiki, K. Ohgita, H. Ogino, E. Torii, H. Matsunaga, M. Ito, J.
  • 雑誌名: Acta Otolaryngol 巻: 134 ページ: 1140-5
  • DOI: 10.3109/00016489.2014.936624
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [学会発表] マウスiPS細胞から蝸牛有毛細胞誘導への試み (2015)
  • 著者名/発表者名: 田浦晶子
  • 学会等名: 第14回 日本再生医療医学会
  • 発表場所: パシフィコ横浜（神奈川県横浜市）
  • 年月日: 2015-03-21
• [学会発表] ヒトiPS細胞を用いた前庭障害治療 (2014)
  • 著者名/発表者名: 田浦晶子
  • 学会等名: 第73回 日本めまい平衡医学会
  • 発表場所: パシフィコ横浜（神奈川県横浜市）
  • 年月日: 2014-11-05 – 2014-11-07
• [学会発表] The Regenerative Therapy for Vestibular Disorders with human induced pluripotent stem (iPS) cells. (2014)
  • 著者名/発表者名: Taura AKiko
  • 学会等名: Inner Ear Biology Workshop 2014
  • 発表場所: Kyoto（JAPAN)
  • 年月日: 2014-11-01 – 2014-11-04
• [学会発表] iPS細胞を用いた内耳再生治療への試み (2014)
  • 著者名/発表者名: 田浦晶子
  • 学会等名: 第115回 日本耳鼻咽喉科学会
  • 発表場所: ヒルトン福岡シーホーク（福岡県福岡市）
  • 年月日: 2014-05-16
• [図書] ガイドライン外来診療2014 (2014)
  • 著者名/発表者名: 田浦晶子
  • 総ページ数: 6
  • 出版者: 日経メディカル開発
• [図書] Regenerative Medicine for the Inner Ear: Gene Therapy (2014)
  • 著者名/発表者名: Taura Akiko
  • 総ページ数: 7
  • 出版者: Springer
• [図書] Regenerative Medicine for the Inner Ear: Self repair (2014)
  • 著者名/発表者名: Taura Akiko
  • 総ページ数: 9
  • 出版者: Springer