| 研究課題/領域番号 |
23592499
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| 研究機関 | 東京慈恵会医科大学 |
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研究代表者 |
谷口 雄一郎 東京慈恵会医科大学, 医学部, 講師 (30307475)
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| 研究分担者 |
岡部 正隆 東京慈恵会医科大学, 医学部, 教授 (10300716)
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| キーワード | 22q11.2欠失症候群 / FGF / Sprouty / Tbx1 |
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| 研究概要 |
22q11.2欠失症候群は染色体欠失を原因とし複数の臓器の発生異常や奇形を特徴とする症候群で、その多くが難聴をきたし約10～30％程度に感音難聴が存在する。これまでの我々の研究成果からFGFシグナルの抑制因子であるSprouty遺伝子が本症の内耳形態異常に関与している可能性が高いと考えている。難聴モデルマウス（Spry1-/-;Spry2-/-;Tbx1+/-）の表現型をさらに追及することにより内耳形態形成に関与するさまざまな遺伝子シグナルのネットワークを知ることができ、さらに新しい治療のアプローチとして分子標的薬を用いた治療の可能性につながることを期待できる。
まずSprouty1;2dko及びSprouty1;2dko;Tbx1+/-マウスの表現型を詳細に解析を行う為にSprouty1;2dkoマウス作製を開始した。まずpaintfill法にてSprouty1;2dkoマウスではコントロールと比較して蝸牛が低形成であり、半規管の欠損も認めた。さらに卵形嚢、球形嚢を含めた前庭系は著明に拡大していた。さらに本年度はSprouty1;2dko;Tbx1+/-マウスの作製に成功し、形態的により重篤な表現型を認めることを発見した。E8.5, 9.5, 10.5においてPax2, Dlx5, NeuroD, Erm,を用いてIn situ hybridizationを施行した。Sprouty1;2dkoマウスではPax2の発現は前方と後方に分離し背側の発現は消失していた。Dlx5はコントロールに比較し耳胞後方で発現が増強、拡大していた。sprouty1;2dko;Tbx1+/-マウスではDlx5は耳胞後方でさらに発現が増強し、Pax2の発現は現弱していた。これらの結果から過剰なFGFシグナル及びTbx１のinteractionが耳胞上皮に影響を与えている可能性があると考えられた。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
まずは最も重要である難聴モデルマウスの作製に成功した。βcre2spry1;2+/-マウスSpry1;2flox/flox(Spry1;2f/f)マウスを交配し、これにより得られるSpry1;2+/-マウスをコントロールとしSpry1;2dkoマウスとの比較検討を行うことができた。さらにSprouty1;2dko;Tbx1+/-マウスの作製に成功し、徐々にではあるが上記に示したように結果が得られてきている。
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| 今後の研究の推進方策 |
これまでのところ順調に進展しており,引き続き当初の計画通進めていく予定である。Sprouty1;2dkoマウスに続いて、Sprou ty1;2dko;Tbx1+/-マウス作製を成功させることができたので、Sprouty1;2dko;Tbx1+/-マウスの解析を進める中でFGFシグナル下流因子の関与に加え、もう一つのポ イントでもあるSHHシグナルとの関連をさらに追求していきたいと考えている。
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| 次年度の研究費の使用計画 |
当初の予定通りまずは実験動物の購入、飼育などの費用。In situ hybridization、組織学的実験を含めた分子生物学実験、組織学実験に関する抗体、試薬、備品などの費用。学会発表に必要な旅費及び論文作製に必要な経費などに用いる予定である。
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