眼炎症疾患発症におけるｍｉＲＮＡの関与

2013 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 23592609
• 研究機関: 高知大学
• 研究代表者: 西内 貴史 高知大学, 教育研究部医療学系, 助教 (90423475)
• 研究分担者: 福島 敦樹 高知大学, 教育研究部医療学系, 福島敦樹 (40281737)
• キーワード: アレルギー・ぜんそく / 遺伝子 / 免疫学

研究概要

昨年度はこれまでにマイクロアレイで確認されたmiRNAの発現について、定量的RT-PCR法を用いて再度評価を行ったが発現の有意な増加あるいは減少は認められなかった。以前我々の研究室では、ぶどう膜炎発症マウスの眼球組織から採取したサンプルを用いてマイクロアレイを行い、増減したmiRNAを定量的RT-PCR法にて確認をする研究を行っている（Ishida W, et al. Invest Ophthalmol Vis Sci, 1;52:611-617, 2011）。この時のサンプル採取法は、ぶどう膜炎を発症したマウスの眼球組織から角膜および水晶体を取り除き、ぶどう膜炎による影響を最も受けやすい網膜周辺組織（網膜、ぶどう膜および強膜）のみを採取したサンプルを用いて解析を行った。その結果、マイクロアレイと定量的RT-PCR法で確認出来たmiRNAの増減はほぼ一致した。
網膜周辺組織ではマイクロアレイと定量的RT-PCRによる結果がほぼ一致するにもかかわらず、なぜアレルギー性結膜炎を発症したマウスの結膜の解析結果が再現できないのかについては、サンプルの採取する部位によるものと考えられる。眼球のような独立した組織であれば、炎症の見られる網膜周辺組織のみを採取することが可能であるが、アレルギー性結膜炎を発症したマウスの結膜では、組織の境界が不明確なことから結膜固有層のみを採取することは実体顕微鏡下でも困難である。このことが、個体間のmiRNA発現値のばらつきに影響していることが考えられる。
改善策としては、個体間でできるだけ同じ条件で同じ範囲を採取することや、サンプル数を増やすことで安定した結果を得ることができると考えられる。
今後は、サンプル採取の改善を行い、miRNAが調節すると考えられる遺伝子発現の特定やmiRNAの局所での発現をin situ hybridization法を用いて評価する。

研究成果

• [雑誌論文] Oral administration of Ag suppresses Ag-induced allergic conjunctivitis in mice: critical timing and dose of Ag. (2013)
  • 著者名/発表者名: Ishida W, Fukuda K, Harada Y, Sumi T, Taguchi O, Tsuda M, Yagita H, Fukushima A.
  • 雑誌名: Br J Ophthalmol 巻: 97(4) ページ: 492-497
  • DOI: 10.1136/bjophthalmol-2012-302639.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Behavior of bone marrow-derived cells following in vivo transplantation: differentiation into stromal cells with roles in organ maintenance. (2013)
  • 著者名/発表者名: Taguchi O, Tsujimura K, Kontani K, Harada Y, Nomura S, Ikeda H, Morita A, Sugiura H, Hayashi N, Yatabe Y, Seto M, Tatematsu M, Takahashi T, Fukushima A.
  • 雑誌名: Am J Pathol 巻: 182(4) ページ: 1255-1262
  • DOI: 10.1016/j.ajpath.2012.12.034.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Rebamipide increases barrier function and attenuates TNF-α-induced barrier disruption and cytokine expression in human corneal epithelial cells. (2013)
  • 著者名/発表者名: Tanaka H, Fukuda K, Ishida W, Harada Y, Sumi T, Fukushima A.
  • 雑誌名: Br J Ophthalmol 巻: 97(7) ページ: 912-916
  • DOI: 10.1136/bjophthalmol-2012-302868.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Alarmins from corneal epithelial cells up-regulate CCL11 and VCAM-1 in corneal fibroblasts. (2013)
  • 著者名/発表者名: Fukuda K, Ishida W, Tanaka H, Harada Y, Matsuda A, Ebihara N, Fukushima A.
  • 雑誌名: Invest Ophthalmol Vis Sci 巻: 54(8) ページ: 5817-5823
  • DOI: 10.1167/iovs.13-11969.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Identification of keratocyte-like cells differentiated from circulating bone marrow-derived cells in the mouse cornea. (2013)
  • 著者名/発表者名: Harada Y, Ishida W, Fukuda K, Sumi T, Kawakita T, Taguchi O, Fukushima A.
  • 雑誌名: Med Mol Morphol 巻: 46 ページ: 233-238
  • DOI: 10.1007/s00795-013-0031-2.
  • 査読あり