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2013 年度 実績報告書

センダイウイルスベクターを利用した歯髄細胞からの人工多能性幹細胞誘導方法の検討

研究課題

研究課題/領域番号 23592697
研究機関岐阜大学

研究代表者

手塚 建一  岐阜大学, 医学(系)研究科(研究院), 准教授 (50236973)

キーワード歯髄細胞 / iPS細胞 / センダイウイルスベクター / ヒト白血球抗原
研究概要

現在のところ、ゲノムに遺伝子挿入が無い「安全な」iPS細胞誘導方法として、いくつかの方法が報告されている。国内で実用化されているのは、京都大学iPS細胞研究所のエピゾーマルベクターシステムと、ディナベックと産業総合技術研究所が開発されたセンダイウイルスベクターシステムである。われわれが、岐阜大学で樹立した3種類のヒト白血球抗原(HLA)ハプロタイプホモ歯髄細胞のうち、2種類を京都大学のエピゾーマルベクターシステムで、3種類をセンダイウイルスベクターシステムを用いてiPS細胞化した。
そのすべてについて、未分化マーカー発現とテラトーマ形成能を評価して、多能性を持つiPS細胞であることが確認できた。特に、日本人に最も頻度が高いHLA型をホモに持つDP74を、エピゾーマルベクターシステムによってiPS細胞化した454E2については、理化学研究所バイオリソースセンターに寄託済みであり、他の研究者へ配布も始まっている。この細胞については、われわれの手で自動培養装置を用いた大量培養実験をおこない、CGH解析と、癌関連遺伝子領域のディープシークエンシング解析によって、有害な変異が起きていないことを確認した。
また、一時的な低酸素環境がiPS細胞誘導効率を上げることを論文発表し、現在センダイウイルスベクターを用いた誘導にも使えるかどうかを検証している。さらに、若年者と成人から得られた歯髄細胞間で、iPS細胞誘導効率が異なることを発見し、その原因のひとつと考えられるDLX4遺伝子について、特許申請をおこなった。本件について、MBL社に技術供与をおこない、DLX4遺伝子をセンダイウイルスベクターに組み込んだキット開発が進んでいる。

  • 研究成果

    (9件)

すべて 2013 その他

すべて 雑誌論文 (1件) (うち査読あり 1件) 学会発表 (7件) (うち招待講演 6件) 産業財産権 (1件)

  • [雑誌論文] Hypoxia-enhanced Derivation of iPSCs from Human Dental Pulp Cells.2013

    • 著者名/発表者名
      K. Iida, T. Kawaguchi, M. Hada, M. Yuriguchi, H. Aoki, N. Tamaoki, D. Hatakeyama, T. Kunisada, T. Shibata, and K. Tezuka
    • 雑誌名

      J. Dental Res.

      巻: 92 ページ: 905-910

    • DOI

      10.1177/0022034513502204

    • 査読あり
  • [学会発表] Dental Pulp Cells as Source for iPS Cell Banking.2013

    • 著者名/発表者名
      Ken-ichi Tezuka, Tomoko Kawaguchi, Naritaka Tamaoki, Kazuki Iida, Hitomi Aoki, Toshiyuki Shibata, Takahiro Kunisada
    • 学会等名
      2013 Annual Meeting of the American Society for Bone and Mineral Research
    • 発表場所
      ボルチモア
    • 年月日
      20131004-20131007
  • [学会発表] 岐阜歯髄細胞コレクション~未来の再生医療を支えるためにできること~

    • 著者名/発表者名
      手塚 建一
    • 学会等名
      岐阜歯科学会40周年記念大会
    • 発表場所
      岐阜
    • 招待講演
  • [学会発表] Dental Pulp Cells as Souce for iPS Cell Banking -A low cost human cell resource for regenerative medicine-

    • 著者名/発表者名
      Tezuka K.
    • 学会等名
      5th Hiroshima Conference on Education and Science in Dentistry
    • 発表場所
      広島
    • 招待講演
  • [学会発表] 親知らずからiPS細胞~歯の中にあるたからもの~

    • 著者名/発表者名
      手塚 建一
    • 学会等名
      岐阜市母子寡婦福祉大会 講演会
    • 発表場所
      岐阜
    • 招待講演
  • [学会発表] 再生医療資源としての歯髄細胞利用

    • 著者名/発表者名
      手塚 建一
    • 学会等名
      歯科基礎医学会 サテライトシンポジウム
    • 発表場所
      岡山
    • 招待講演
  • [学会発表] 岐阜県が日本を救う?~親知らずからiPS細胞~

    • 著者名/発表者名
      手塚 建一
    • 学会等名
      岐阜大学フェア
    • 発表場所
      高山
    • 招待講演
  • [学会発表] Dental Pulp Cells as Source for iPS Cell Banking.

    • 著者名/発表者名
      Ken-ichi Tezuka
    • 学会等名
      6th International Symposium on the Biology of Tertrate-Resistant Acid Phosphatase
    • 発表場所
      神戸
    • 招待講演
  • [産業財産権] 人工多能性幹細胞の作製方法2013

    • 発明者名
      手塚建一他7名
    • 権利者名
      手塚建一他7名
    • 産業財産権種類
      特許
    • 産業財産権番号
      特願2013-176647
    • 出願年月日
      2013-08-28

URL: 

公開日: 2015-05-28  

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