研究課題/領域番号 |
23592866
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研究機関 | 明海大学 |
研究代表者 |
岡本 和彦 明海大学, 歯学部, 准教授 (50271234)
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研究分担者 |
竹下 玲 明海大学, 歯学部, 准教授 (70236454)
高野 安紀子 明海大学, 歯学部, 講師 (20337504)
藤澤 政紀 明海大学, 歯学部, 教授 (00209040)
安井 利一 明海大学, 歯学部, 教授 (20146252)
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キーワード | 歯根膜細胞 / MCP-1 / 炎症性サイトカイン |
研究概要 |
ヒトの組織片からout growthした細胞群から得た歯根膜線維芽細胞を継代培養した。本細胞の基本的キャラクターを検討した結果,本細胞は,高いアルカリフォスファターゼ活性を有していることを明らかにし,さらに,アルカリフォスファターゼの発現を遺伝子レベルで確認し,既報に示されているように本細胞が骨芽細胞様キャラクターを有していることを確認した. 本細胞のMCP-1発現について,培養情勢中のMCP-1量をELISAキットを用いて検討した.その結果,本細胞は,通常,MCP-1をほとんど発現していないことが明らかとなった.また,本細胞にIL-1を添加すると,多量のMCP-1を発現することが示された.また,さらに,本細胞にTNF-alphaを添加しMCP-1の発現を検討したところ,本サイトカインは,MCP-1を強く誘導することが明らかとなった.
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現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
ヒト歯根膜線維芽細胞へストレスを与える方法として,培養細胞伸展システム(ストレック:StrexSTB140-10)の使用を計画していた.本システムの購入に関して,業者からの説明と講習会の実施,それを受けての本実験の趣旨に合致した実験計画の組み立て,さらに見積もりなどを慎重に行った.その結果,本システムの納入が遅れている. また,通常の細胞培養の機器などに不具合が起こり,安定した実験を行うことが容易でない状況が発生し,培養細胞の維持管理が厳しい状況も発生した.さらに,研究代表者の取り巻く環境に変化があった.これらのことから.達成度は,「やや遅れている。」とする.
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今後の研究の推進方策 |
自動伸展システム(ストレック:StrexSTB140-10)を使用し,ストレッチチャンバー内での培養条件(培養容量,血清濃度,および持続的伸張条件下における細胞の生死)を確認する.また,その培養条件に則り,歯根膜細胞を本システム上で培養し,その培養上清中のMCP-1の定量を行い,ストレスによって本細胞のMCP-1が誘導されるか否かについて検討する.
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次年度の研究費の使用計画 |
現在,自動伸展システム(ストレック:StrexSTB140-10)が品薄であるため,納入待ちの状態である.そこで,まず,本機器の購入を研究費(直接経費)の物品費(50万円以上のもの)で賄う.また,本システムでは,チャンバーを消耗品として,実験に使用することになる.そこで,直接経費の物品費を充てることによってチャンバーの購入を行う.また,試薬や培養器具などを物品費(消耗品)として購入する予定である.実験系の遅れを取り戻すことと,本年度の実験計画を進めるために研究費を使用する.
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