ヒトＥＳ細胞の神経分化を制御するノンコーディングＲＮＡの解析

2012 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 23650194
• 研究機関: 慶應義塾大学
• 研究代表者: 岡田 洋平 慶應義塾大学, 医学部, 特任講師 (30383714)
• キーワード: ノンコーディングRAN / ヒトES細胞 / 神経幹細胞 / 神経分化

研究概要

本研究では、ヒトES細胞の神経分化に伴い発現が上昇するnon-coding RNAを同定し、その神経分化における役割を明らかにする。昨年度までに、ゲノムタイリングアレイを用いて、ヒトES細胞から神経幹細胞へと分化誘導する過程において、発現が上昇するnon-coding RNAを57個同定した。さらに、神経幹細胞のマーカーであるSOX1を発現する神経系前駆細胞を約一週間で誘導することのできる、迅速単層神経分化誘導法を開発した。
今年度は、SOX1のBAC(Bacterial Artificial Chromosome)を用いて、ヒトES細胞の神経分化を、蛍光タンパクと発光タンパクの両方で定量的に可視化できる(ffLuc)、レポーターヒトES細胞を作成した。この細胞は、ニューロスフェア法においても、迅速単層神経分化誘導法においても、神経分化と共にffLucの発現が速やかに上昇し、簡便に神経分化をモニタリングできることを確認した。
さらに、ヒトES細胞、およびレポーターヒトES細胞に、エレクトロポレーション法により、同定したncRNAに対するsiRNAを導入して、神経分化に与える影響を解析するスクリーニングを行っている。

研究成果

• [雑誌論文] Steps toward safe cell therapy using induced pluripotent stem cells (2013)
  • 著者名/発表者名: Okano H, Nakamura M, Yoshida K, Okada Y, Tsuji O, Nori S, Ikeda E, Yamanaka S, Miura K
  • 雑誌名: Circulation Research 巻: 112(3) ページ: 523-33
  • DOI: DOI:10.1161/CIRCRESAHA.111.256149
  • 査読あり
• [雑誌論文] Enhanced aggregation of androgen receptor in induced pluripotent stem cell-derived neurons from spinal and bulbar muscular atrophy (2013)
  • 著者名/発表者名: Nihei Y, Ito D, Okada Y, Akamatsu W, Yagi T, Yoshizaki T, Okano H, Suzuki N
  • 雑誌名: J Biol Chem 巻: 288(12) ページ: 8043-52
  • DOI: DOI:10.1074/jbc.M112.408211
  • 査読あり
• [雑誌論文] Efficient Derivation of Multipotent Neural Stem/Progenitor Cells from Non-human Primate Embryonic Stem Cells (2012)
  • 著者名/発表者名: Shimada H, Okada Y, Ibata K, Ebise H, Ota S, Tomioka I, Nomura T, Maeda T, Kohda K, Yuzaki M, Sasaki E, Nakamura M, Okano H
  • 雑誌名: PLoS One 巻: 7(11) ページ: e49469
  • DOI: DOI:10.1371/journal.pone.0049469
  • 査読あり
• [雑誌論文] NA-Binding Protein Musashi1 Modulates Glioma Cell Growth through the Post-Transcriptional Regulation of Notch and PI(3) Kinase/Akt Signaling Pathways. (2012)
  • 著者名/発表者名: Muto I
  • 雑誌名: PLoS One. 巻: 7 ページ: e33431
  • DOI: DOI:10.1371/journal.pone.0033431
  • 査読あり
• [雑誌論文] Establishment of induced pluripotent stem cells from centenarians for neurodegenerative disease research. (2012)
  • 著者名/発表者名: Yagi T
  • 雑誌名: PLoS One. 巻: 7 ページ: e41572
  • DOI: doi:10.1371/journal.pone.0041572
  • 査読あり
• [雑誌論文] Mitochondrial dysfunction associated with increased oxidativestress and -synuclein accumulation in PARK2 iPSC-derived neurons and postmortem brain tissue (2012)
  • 著者名/発表者名: Imaizumi Y
  • 雑誌名: Mol. Brain. 巻: 1 ページ: 35
  • DOI: doi: 10.1186/1756-6606-5-35
  • 査読あり
• [雑誌論文] Multiple analyses of G-protein coupled receptor (GPCR) expression in the development of gefitinib-resistance in transforming non-small-cell lung cancer. (2012)
  • 著者名/発表者名: Kuzumaki N
  • 雑誌名: PLoS One 巻: 7 ページ: e44368
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0044368
  • 査読あり
• [雑誌論文] Pre-Evaluated Safe Human iPSC-Derived Neural Stem Cells Promote Functional Recovery after Spinal Cord Injury in Common Marmoset without Tumorigenicity (2012)
  • 著者名/発表者名: Kobayashi Y, Okada Y
  • 雑誌名: PLoS One 巻: 7 ページ: e52787
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0052787
  • 査読あり
• [学会発表] iPS細胞を用いた神経再生と病態解析 (2013)
  • 著者名/発表者名: 岡田洋平
  • 学会等名: 第4回岐阜脳神経研究会
  • 発表場所: 岐阜
  • 年月日: 2013-02-02
• [学会発表] 多能性幹細胞・神経幹細胞を用いた神経再生と病態解析 (2012)
  • 著者名/発表者名: 岡田洋平
  • 学会等名: 第13回埼玉パーキンソン病治療研究会
  • 発表場所: 大宮
  • 年月日: 2012-11-01
• [学会発表] Evaluation of human iPS cells by neural differentiation and tumorigenicity
  • 著者名/発表者名: Okada Y
  • 学会等名: ISSCR 10th annual Meeting
  • 発表場所: Yokohama
• [学会発表] ヒトiPS細胞由来神経幹細胞の応用とその問題点
  • 著者名/発表者名: 岡田洋平
  • 学会等名: 第24回日本脳循環代謝学会総会
  • 発表場所: 広島
  • 招待講演
• [学会発表] 不完全にリプログラミングされたヒトiPS細胞由来神経幹細胞は分化誘導に伴うゲノム不安定化によりグリオーマ様腫瘍を形成する
  • 著者名/発表者名: 岡田洋平
  • 学会等名: 第35回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 福岡