独自に作成したミエリン肥厚化マウスを用い、脱ミエリン病の治療標的分子を解明する

2013 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 23650200
• 研究機関: 独立行政法人国立成育医療研究センター
• 研究代表者: 山内 淳司 独立行政法人国立成育医療研究センター, 薬剤治療研究部, 室長 (20335483)
• キーワード: ミエリン化 / 脱ミエリン化 / 低分子量GTP結合蛋白質 / 交換因子 / チロシンキナーゼ / セリン・スレオニンキナーゼ / 治療標的分子 / ノックダウンマウス

研究概要

既存の治療薬は、標的分子の分子機能を阻害することで、その効果を示している例が多い。そのため、まず、インビボで、標的候補分子の機能阻害が病態改善に有効かどうかを判断する必要が多いと考えられる。線状型ノックダウン配列（shRNA）をもつ遺伝子断片をマイクロRNA（miRNA）骨格のなかにいれ、それを対象組織特異的に転写させるというものである。標的に対するshRNA 配列を、miRNA 配列のなかのノックダウン配列領域と置換することで、全体としてのRNAの配列を長くし、それらを一般的な組織特異的プロモーターで制御できるようにしたものである。これを通常のトランスジェニックマウス作製と同様に、マウス受精卵にインジェクションして、目的とするマウスを作成する。そして作製された遺伝子改変マウスをCMT病態モデルマウスと交配し、CMT病態が改善されれば、その標的分子の評価ができるはずである。そこで、治療標的候補分子と考えられた交換因子であるDock7および3型ニューレグリン受容体のノックダウンマウスを作成した。ニューレグリン受容体は増殖因子ニューレグリンの受容体であるが、それは3型に結合し2型には結合しないため、3型をノックダウンすることでニューレグリン受容体活性のほとんどを抑制できる。2型は3型からのシグナルを受け活性化される受容体である。これらノックダウンマウスとCMT病態モデルマウスと交配した結果、CMT病態モデルマウスの病態改善が組織学的に明らかになった。今後、さらに運動機能等の実際の神経機能も調べ、インビボレベルでこれらの治療標的候補分子が有効か否かを評価する予定である。

研究成果

• [雑誌論文] Akt and PP2A reciprocally regulate the guanine nucleotide exchange factor Dock6 to control axon growth of sensory neurons. (2013)
  • 著者名/発表者名: Yuki Miyamoto, Tomohiro Torii, Natsuki Yamamori, Toru Ogata, and Akito Tanoue, and Junji Yamauchi
  • 雑誌名: Science Signaling (Science sister journal) 巻: 6 ページ: ra15
  • DOI: 10.1126/scisignal.2003661
  • 査読あり
• [雑誌論文] ignaling through Arf6 guanine-nucleotide exchange factor cytohesin-1 regulates migration in Schwann cells (2013)
  • 著者名/発表者名: Yuki Miyamoto, Tomohiro Torii, Kazuaki Nakamura, Shou Takashima, Atsushi Sanbe, Akito Tanoue, and Junji Yamauchi
  • 雑誌名: Cellular Signaling 巻: 25 ページ: 1379-1387
  • DOI: 10.1016/j.cellsig.2013.03.008
  • 査読あり
• [雑誌論文] n vivo expression of the Arf6 guanine-nucleotide exchange factor cytohesin-1 in mice exhibits enhanced myelin thickness in nerves. (2013)
  • 著者名/発表者名: Tomohiro Torii, Yuki Miyamoto, Naoko Onami, Hideki Tsumura, Noriko Nemoto, Katsumasa Kawahara, Minoru Kato, Jun Kotera, Kazuaki Nakamura, Akito Tanoue, and Junji Yamauchi
  • 雑誌名: Journal of Molecular Neuroscience 巻: 51 ページ: 522-531
  • DOI: 10.1007/s12031-013-0018-4
  • 査読あり
• [学会発表] Dock6交換因子のAktのリン酸化状態によって制御される軸索伸長の新規メカニズム (2013)
  • 著者名/発表者名: 宮本 幸、山内淳司
  • 学会等名: 日本生化学会（シンポジウム）
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 20130921-20130923
• [備考] 国立成育医療研究センター>研究所>研究部紹介>薬剤治療研究部 HP
  • URL: http://www.ncchd.go.jp/research/nch/pharmac/index.html
• [備考] 薬剤治療研究部 HP
  • URL: http://nrichd.ncchd.go.jp/pharmac/