| 研究課題/領域番号 |
23650233
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| 研究機関 | 東京大学 |
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研究代表者 |
前多 敬一郎 東京大学, 農学生命科学研究科, 教授 (30181580)
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| 研究分担者 |
平林 真澄 生理学研究所, 行動・代謝分子解析センター, 准教授 (20353435)
井上 直子 名古屋大学, 生命農学研究科, 助教 (90377789)
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| キーワード | スンクス / 遺伝子改変動物 / 食虫目 / GnRH2 |
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| 研究概要 |
本研究は、食虫目であるスンクスを用いて詳細な生理学的解析を可能にすることを目標に、1.全身性に蛍光物質Venusを発現した遺伝子改変動物の作出、2.GnRH2 遺伝子特異的にVenusを発現する遺伝子改変スンクスを作出することを目的とした。
1.全身性Venus遺伝子を発現するスンクスの作出
サイトメガロウィルス由来のCMVエンハンサーに、chicken beta actinプロモーター、Venus遺伝子をつなげたコンストラクトをスンクス前核期胚に注入し、偽妊娠雌に移植を行ったところ産子を得ることに成功した。しかしながら、Venus遺伝子を発現する個体は現在まで得られておらず、今後例数を重ねることにより、全身性にVenus遺伝子を発現するスンクスの作出が期待できる。また、前核期胚注入よりも効率よく遺伝子改変動物を作出できる技術を確立するため、スンクスiPS細胞による遺伝子改変動物の作出を試みたが、キメラ個体形成能を有するiPS細胞は樹立できなかった。
2.GnRH2 遺伝子特異的にVenusを発現する遺伝子改変スンクスの作出
GnRH2遺伝子の転写開始点からGnRH2遺伝子の隣に位置するスンクスPTPRA遺伝子までのスンクスGnRH2遺伝子上流領域ゲノムDNA配列4767 bpを同定し、これらの領域に、TATAボックスならびにCAATボックスが存在することを確認した。現在、得られたスンクスGnRH2プロモーターにVenus遺伝子をつなげたコンストラクトを作製しており、今後スンクス前核期胚に注入することにより、GnRH2 遺伝子特異的にVenusを発現する遺伝子改変スンクスの作出が期待できる。
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