研究課題
挑戦的萌芽研究
発光活性を有する標識蛋白質(レポーター蛋白質;GFPなど)を用いたバイオイメージングは、分子生物学の必須なツールとなっている。なかでも、生物発光を触媒する最小酵素であるガウシア由来のルシフェラーゼ(以下、GLuc)への期待は大きい。しかし、システインを多数有するGLucは、非天然型SS結合を形成して凝集しやすいため、その生成は困難である。そのため、GLucの機能解析及び改変がほとんど進められておらず、バイオイメージングへの応用はまだ限られている。本研究では、独自に開発したSEPタグ技術(溶解性向上タグ)を用いることで、天然型SS結合を形成するGLucの汎用的な発現精製系を構築し、その機能と物性を解析、発光極大波長をレッドシフトしたGLuc変異体をランダムスクリーニングによって構築した。
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J Phys Chem B
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http://www.tuat.ac.jp/~ykuroda