|
物質が微生物による分解を受ける際，一般的に数mg/Lつまりppmレベルでは効率よく分解される(Monod式での飽和定数:Ksがppmレベル)ことが知られている．しかしながら，微生物はさらに低濃度域である極微量ppbレベルの分解も効率的に行う(Ksがppbレベル)ことが、多くの研究によって示されている．しかしながら、その様な能力を有する微生物、貧栄養細菌の現状での利用はほとんど無い．そこで，本研究では，貧栄養細菌による分解現象を把握すると共に，その利用技術の開発を目指す。
研究では，貧栄養細菌としてフェノール資化細菌Cupriavidus sp. TW2株を単離した．本菌株は，フェノール誘導されるフェノールヒドロキシラーゼ(PH)によってトリクロロエチレン(TCE)を分解する．本菌株の分解能を常時発現させるため，PH遺伝子群の上流にtacプロモーター(Ptac)を相同的組換えによって導入した．作製された組換え体TW2-P株はTCE分解能を構成的に発現し，フェノール誘導されたTW2株より高い分解能を示した．また，TCEを環境基準である，30ppb以下に分解した．加えて，本組換え体の環境中でのCell レベルでの追跡を可能にするため，PH遺伝子群下流に緑色蛍光タンパク質をコードするGreen Fluorescent Protein (GFP)遺伝子を，同様に相同的組換えによって挿入した．作製されたTW2-PGF株は，蛍光顕微鏡下で緑色蛍光を発する細菌として，Cellレベルでの観察が可能となった．また，この時GFP遺伝子の導入は，ppbレベルのTCE分解能に影響を与えず，高分解能を維持した．
|
