クエンチ原理に基づく汎用蛍光免疫測定素子の構築

2012 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 23656517
• 研究種目: 挑戦的萌芽研究
• 配分区分: 基金
• 研究分野: 生物機能・バイオプロセス
• 研究機関: 東京工業大学 (2012); 東京大学 (2011)
• 研究代表者: 上田 宏 東京工業大学, 資源化学研究所, 教授 (60232758)
• 研究分担者: 大橋 広行 東京大学, 特任研究員 (40589454)
• 連携研究者: 大室 有紀 (松山 有紀) 東京大学, 特任研究員 (30571088)
• 研究期間 (年度): 2011 – 2012
• キーワード: バイオセンサー

研究概要

各種の抗原検出を迅速高感度に行うことができる新規免疫測定原理Quenchbody法の発展を目指し,末端を蛍光ラベルした抗体結合蛋白質プローブを作製した。これをビメンチン認識ヒトFab抗体断片と混合すると,プローブの色素が抗体内部のTrp残基によりクエンチされた。さらにこれに抗原ビメンチンを加えると濃度依存的にクエンチが解除され,抗原を蛍光強度の増加として観察することに成功した。

研究成果

• [雑誌論文] Demonstration of protein-fragment complementation assay using purified firefly luciferase fragments (2013)
  • 著者名/発表者名: Y. Ohmuro-Matsuyama, C.I. Chung, and H. Ueda
  • 雑誌名: BMC Biotechnol 巻: 13 ページ: 31
  • 査読あり
• [雑誌論文] Detection of vimentin serine phosphorylation by multicolor Quenchbodies (2013)
  • 著者名/発表者名: H.-J. Jeong, Y. Ohmuro-Matsuyama, H. Ohashi, F. Ohsawa, Y. Tatsu, M. Inagaki, and H. Ueda
  • 雑誌名: Biosens. Bioelectron 巻: 40 ページ: 17-23
  • 査読あり
• [雑誌論文] Isolation of recombinant phage antibodies targeting the hemagglutinin cleavage site of highly pathogenic avian influenza virus (2013)
  • 著者名/発表者名: J. Dong, A. Sakurai, N. Nomura, E.Y. Park, F. Shibasaki, and H. Ueda
  • 雑誌名: PLOS ONE 巻: 8 ページ: e61158
  • 査読あり
• [雑誌論文] Open-sandwich molecular imprinting: making a recognition matrix with antigen-imprintedantibody fragments (2012)
  • 著者名/発表者名: K. Minami, M. Ihara, S. Kuroda, H. Tsuzuki, and H. Ueda
  • 雑誌名: Bioconj. Chem 巻: 23 ページ: 1463-1469
  • 査読あり
• [雑誌論文] Improved detection sensitivity and selectivity attained by Open-Sandwich selection of ananti-estradiol antibody (2012)
  • 著者名/発表者名: X. Liu, M. Eichenberger, Y. Fujioka, J. Dong, and H. Ueda
  • 雑誌名: Anal. Sci 巻: 28 ページ: 861-867
  • 査読あり
• [雑誌論文] Detection of small molecule diagnostic markers with phage-based Open-Sandwich Immuno-PCR (2012)
  • 著者名/発表者名: J. Dong, S. Hasan, Y. Fujioka, and H. Ueda
  • 雑誌名: J. Immunol.Methods 巻: 377 ページ: 1-7
  • 査読あり
• [雑誌論文] Activation of circularly permutatedβ-lactamase tethered to antibody domainsby specific small molecules (2011)
  • 著者名/発表者名: M. Kojima, H. Iwai, J. Dong, SL. Lim, S. Ito, K. Okumura, M. Ihara, and H. Ueda
  • 雑誌名: Bioconj. Chem 巻: 22 ページ: 633-641
  • 査読あり
• [雑誌論文] Quenchbodies" : quench-based antibody probes that show antigen-dependent fluorescence (2011)
  • 著者名/発表者名: R. Abe, H. Ohashi, I. Iijima, M.Ihara, H. Takagi, T. Hohsaka, and H. Ueda
  • 雑誌名: J. Am. Chem. Soc 巻: 133 ページ: 17386-17394
  • 査読あり
• [学会発表] 高親和性抗体結合タンパク質を利用した蛍光免疫センサー構築法の開発 (2013)
  • 著者名/発表者名: 児島智樹, 大橋広行, 上田宏
  • 学会等名: 化学工学会第78年会
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 2013-03-19
• [学会発表] 抗原結合により光る蛍光標識抗体Quenchbody(Q-body)の開発 (2012)
  • 著者名/発表者名: 上田宏
  • 学会等名: 第3回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 福岡
  • 年月日: 2012-12-14
• [学会発表] 抗体結合タンパク質を利用した蛍光免疫センサー構築法の検討 (2012)
  • 著者名/発表者名: 児島智樹, 大橋広行, 上田宏
  • 学会等名: 化学工学会第44回秋季大会
  • 発表場所: 仙台
  • 年月日: 2012-09-19
• [学会発表] 新規蛍光免疫素子Quenchbodyによる各種バイオマーカーの迅速高感度検出 (2012)
  • 著者名/発表者名: 上田宏
  • 学会等名: 日本プロテオーム学会2012年大会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2012-07-27
• [学会発表] "Quenchbodies" :quench-based antibody probes that fluoresce upon antigen binding (2012)
  • 著者名/発表者名: Ueda, Hiroshi
  • 学会等名: Biosensors 2012
  • 発表場所: Cancun, Mexico
  • 年月日: 2012-05-16
• [学会発表] Detection of vimentin serine phosphorylation by Quenchbodies (2011)
  • 著者名/発表者名: Hee-Jin Jeong, Hiroyuki Ohashi, Yuki Ohmuro- Matsuyama Masaki Inagaki and Hiroshi Ueda
  • 学会等名: AsiaSense 2011
  • URL: http://www.asiasense2011.org/
  • 発表場所: 済州,韓国
  • 年月日: 2011-10-26
• [学会発表] 蛍光標識抗体Quenchbodyを利用した麻薬・覚醒剤類の迅速高感度検出,蛍光標識抗体Quenchbodyを利用した麻薬・覚醒剤類の迅速高感度検 (2011)
  • 著者名/発表者名: 大橋広行・阿部亮二・高木広明・上田宏
  • 発表場所: 名古屋
  • 年月日: 2011-09-15
• [学会発表] オープンサンドイッチ原理と新規相互作用検出系による蛋白質リン酸化修飾の検出 (2011)
  • 著者名/発表者名: 大室(松山)有紀,北岡優一,ジョンヒジン,達吉郎,稲垣昌樹,上田宏
  • 学会等名: 第11回蛋白質科学会年会
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 2011-06-08
• [学会発表] 非天然アミノ酸導入法による蛍光免疫センサー蛋白質Quenchbodyの創製 (2011)
  • 著者名/発表者名: 上田宏
  • 学会等名: 第11回蛋白質科学会年会1WC-2
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 2011-06-07
• [学会発表] Quenchbodies : Antibody Probes That Fluoresce Upon Antigen Binding (Selected as oral presentation) (2011)
  • 著者名/発表者名: Hiroshi Ueda, Ryoji Abe, HiroakiTakagi, and Takahiro Hohsaka
  • 学会等名: Quenchbodies : Antibody Probes That Fluoresce Upon Antigen Binding (Selected as oral presentation)
  • 発表場所: 上海,中国
  • 年月日: 2011-05-12
• [図書] -人と医学のステージへ拡大する細胞周期 (2013)
  • 著者名/発表者名: 上田宏, ジョンヒジン
  • 総ページ数: 194-200
  • 出版者: 羊土社
• [備考]
  • URL: http://www.ueda.res.titech.ac.jp/index.html
• [産業財産権] 抗体結合タンパク質 (2013)
  • 発明者名: 上田宏, 大橋広行, 阿部亮二
  • 権利者名: 東京大学,ウシオ電機
  • 産業財産権番号: 特許 2013028284
  • 出願年月日: 2013-02-15