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2012 年度 実績報告書

哺乳類海馬における新生顆粒細胞の選択的刺激方法の開発

研究課題

研究課題/領域番号 23657058
研究機関広島大学

研究代表者

古川 康雄  広島大学, 総合科学研究科, 教授 (40209169)

研究分担者 椋田 崇生  広島大学, 総合科学研究科, 助教 (60346335)
キーワードペプチド作動性チャネル / FMRFamide / 海馬 / 神経新生
研究概要

海馬歯状回における神経新生は、海馬が学習・記憶に重要な脳部位であることから注目されており、新生ニューロンの機能を研究するために、新生ニューロンを特異的に刺激する手法が望まれる。本研究課題では、軟体動物神経系に存在するFMRFamide作動性Na+チャネル(FaNaC)を分子ツールとし、ラットにおいて新生ニューロンを特異的に刺激する方法を開発することを目的とした。
FMRFamideは哺乳類脳には存在しないので、内因性ペプチドがFaNaCを活性化する可能性はほぼないが、FMRFamide感受性ができるだけ高い方が望ましい。そこで、当研究室で行っているFaNaCの構造機能相関に関する研究とリンクさせながら変異体チャネル作成を進め、より低濃度のFMRFamideで活性化される変異体チャネルの開発を試みた。その結果、野性型チャネルより10倍以上感受性の高いFMRFamide作動性Na+チャネルを作出することが出来た。また、FaNaCの発現部位を組織化学的に検出するために、チャネル遺伝子末端にタグ(FLAG)をつけた改変チャネルを作製した。
当初の計画では、新生ニューロンに特異的にFaNaCを発現させるためにレトロウィルスを使う方法を計画し、そのために必要なP2レベルの遺伝子組換え実験ができる施設を部局内に新設する予定であったが、研究期間内に実験室を整備することが不可能であることが分かり、この手法は断念せざるをえなくなった。そこで、今後の研究展開も見据えて、脳への遺伝子導入法としてエレクトロポレーション法を採用することにした。現在は、まだ試行段階の域をでていないが、ラット胎児および新生ラットの脳に外来遺伝子を導入するための手技の確立を目指しているところである。

  • 研究成果

    (3件)

すべて 2012 その他

すべて 雑誌論文 (1件) (うち査読あり 1件) 学会発表 (2件)

  • [雑誌論文] Molecular cloning of two distinct precursor genes of NdWFamide, a d-tryptophan-containing neuropeptide of the sea hare, Aplysia kurodai2012

    • 著者名/発表者名
      F. Morishita
    • 雑誌名

      Peptides

      巻: 38 ページ: 291-301

    • DOI

      10.1016/j.peptides.2012.08.025.

    • 査読あり
  • [学会発表] FMRFamide作動性Na+チャネルのポア外縁部に存在する陰性リングの機能

    • 著者名/発表者名
      Y. Furukawa
    • 学会等名
      第83回日本動物学会大会
    • 発表場所
      大阪
  • [学会発表] レニン・アンギオテンシン・アルドステロン系による成熟海馬神経新生の調節

    • 著者名/発表者名
      T. Mukuda
    • 学会等名
      第83回日本動物学会大会
    • 発表場所
      大阪

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公開日: 2014-07-24  

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