微胞子虫類のEncephalitozoon cuniculi は全ゲノム配列が解読されているが、発現解析としての組換え体作製技術および遺伝子機能阻害技術につながる基本的方法、遺伝子導入法が確立されていない。そこで、本研究は、特徴的な感染様式を持つ微胞子虫類(Microsporidia)の組換え体作製方法を確立し、機能性蛋白質を運ぶ微胞子虫ベクターを作製する目的で本研究は行われ以下の結果を得た。 1.E. cuniculi 培養液の組成および密度勾配遠心精製法に改良を加え、精製虫体を効率良く回収可能となった。 2. Pyrimethamine、Blasticidin およびGeneticinを用いてE. cuniculi の薬剤感受性試験を行ったところ、Geneticinにおいて感受性を示したことから薬剤選択マーカーとしてneoR 遺伝子が候補となった。 3. 精製したE. cuniculi のspore にエレクトロポーレーションによる遺伝子導入条件の検討を行ない、遺伝子導入法の最適条件が決定した。
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