クローン病の発症メカニズムにおけるｐ４０ｐｈｏｘの役割の解明と創薬

2012 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 23659137
• 研究機関: 神戸大学
• 研究代表者: 齋藤 尚亮 神戸大学, バイオシグナル研究センター, 教授 (60178499)
• 研究分担者: 上山 健彦 神戸大学, バイオシグナル研究センター, 准教授 (80346254) ; 楠 正人 三重大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (50192026)
• キーワード: クローン病 / p40phox / 遺伝子異常 / 乳幼児 / オートファジー

研究概要

６例の乳・幼児期発症治療抵抗性 （難治性）クローン病患者を、p40phox遺伝子異常によるCGD腸炎患者と疑い、p40phoxを含むすべてのタイプのCGD患者を鑑別できる我々の活性酸素アッセイ法と遺伝子解析を用いて精査を行ったが、１例が特殊なタイプのgp91phox 欠損によるCGD患者であったが、p40phox遺伝子異常によるCGD腸炎患者を発見することは出来なかった。現在も、本邦初のp40phox遺伝子異常CGD腸炎患者の発見を目指して、クローン病患者からの対象患者のスクリーニング及び遺伝子解析を引き続き行っている。
細胞レベルでのクローン病発症原因の解明については、ゲノムワイド関連研究のp40phoxの遺伝子多型がクローン病発症の危険因子であるという報告に立脚し、クローン病とp40phox遺伝子異常CGD腸炎間には、共通発症因子すなわち抗菌オートファジーが関与しているという仮説を立て、p40phoxを安定的にノックダウンしたマクロファージ細胞株を樹立し、オートファジー関連因子であるLC3, Atg5, Atg15とjフィジーとp40phoxの機能発現の両者に関与する脂質（PI3P）の免疫組織学的及びライブイメージング解析を行ったが、有意な差を見出すことが出来なかった。有意な所見として、クローン病患者では正常人に比べて白血球での活性酸素産生量が亢進するとのデータが得えられた。

研究成果

• [雑誌論文] Both C1B domain and pseudosubstrate region are necessary for saturated fatty acid membrane;distinct role of intramolecular domains for different (2013)
  • 著者名/発表者名: Takaaki Nishimoto, T., Kashiwagi, K., Saito, N., and Shirai, Y.
  • 雑誌名: Biochemical and Biophysical Research Communications 巻: 432 ページ: 384-388
  • DOI: 10.1016/j.bbrc.2013.01.048.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Novel PKCalphamediated phosphorylation site(s) on cofilin and their potential role in (2012)
  • 著者名/発表者名: Sakuma, M., Shirai, Y., Yoshino, K^I., Kuramasu,M., Nakamura, T., Yanagita, T., Mizuno, K.,Hide, I., Nakata, Y., Saito, N.
  • 雑誌名: Mol Biol. Cell 巻: 23 ページ: 3707-3721
  • 査読あり
• [雑誌論文] MARCKS dephosphorylation is involved in bradykinin-induced neurite outgrowth in neuroblastoma SH-SY5Y cells. (2012)
  • 著者名/発表者名: Tanabe A, Shiraishi M, Negishi M, Saito N, Tanabe M, and Sasaki Y.
  • 雑誌名: J Cell Physiol. 巻: 227 ページ: 618-629
  • DOI: 10.1002/jcp.22763
  • 査読あり
• [雑誌論文] Establishment of a Novel Fluorescence-Based Method to Evaluate Chaperone-Mediated Autophagy in a Single Neuron. (2012)
  • 著者名/発表者名: Seki, T., Ken-ich Yoshino, K., Tanaka, S., Dohi, E., Onji, T., Yamamoto, K., Hide, I., Paulson, H.L., Saito, N., Sakai, N.
  • 雑誌名: PLoS ONE 巻: 7 ページ: e31232
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0031232
  • 査読あり
• [雑誌論文] c-Abl tyrosine kinase regulates serum-induced nuclear export of diacylglycerol kinase α by phosphorylation at Tyr218. (2012)
  • 著者名/発表者名: Matsubara, T., Ikeda, M., Kiso, Y., Sakuma, M., Yoshino, K-I., Sakane, F., Merida, I., Saito, N. and Shirai, Y.
  • 雑誌名: J. Biol. Chem. 巻: 287 ページ: 5507-5517
  • DOI: 10.1074/jbc.M111.296897
  • 査読あり
• [学会発表] Duoxの活性酸素産生機構 (2013)
  • 著者名/発表者名: 佐久間 恵、上山 健彦、濵田 猛、齋藤 尚亮
  • 学会等名: 第86回日本薬理学会年会
  • 発表場所: 福岡
  • 年月日: 20130321-20130323
• [学会発表] le of PKCalpha-mediated cofilin phosphorylation in the degranulation from RBL-2H3 mast cells. (2012)
  • 著者名/発表者名: Sakuma, M., Shirai, Y., Yoshino, K., Kuramasu, M., Nakamura, T., Mizuno, K.,
  • 学会等名: 22th IUBMB & 37th FEBS
  • 発表場所: スペイン
  • 年月日: 20120904-20120909
• [学会発表] Glial functions of Rho-family small GTPases during cerebellar development and after CNS injury (2012)
  • 著者名/発表者名: Ueyama,T., Kondoh T., Kohta M., Kohmura,E., Hayashibe,M., Nakamura,T.,
  • 学会等名: 14th International congress of histochemistry and cytochemistry
  • 発表場所: 京都
  • 年月日: 20120826-20120829
• [学会発表] Involvment of PKCgamma in neurodegenerative disease (2012)
  • 著者名/発表者名: Saito, N., Takahashi, H., Shirafuji, T., Adachi, N., Danno, S., Ueyama, T.,
  • 学会等名: 14th International congress of histochemistry and cytochemistry
  • 発表場所: 京都
  • 年月日: 20120826-20120829