ナノ磁性微粒子と新規FLAG抗体を用いた新規GPCR結合因子の同定

2012 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 23659157
• 研究種目: 挑戦的萌芽研究
• 配分区分: 基金
• 研究分野: 医化学一般
• 研究機関: 順天堂大学 (2012); 九州大学 (2011)
• 研究代表者: 横溝 岳彦 順天堂大学, 医学部, 教授 (60302840)
• 研究期間 (年度): 2010 – 2012
• キーワード: GPCR / 免疫沈降 / 結合タンパク質

研究概要

高感度・低バックグラウンドの高親和性抗 FLAG 抗体 2H8 の樹立を行い、本抗体と磁気ビーズを組み合わせた新規 G タンパク質共役型受容体(GPCR)免疫沈降法を開発した。 本法を用いることで、これまで免疫沈降が困難であった GPCR の免疫沈降が可能になっのみならず、これまで不可能であった GPCR タンパク質の可視化にも成功した。本法を用いることで、新規 GPCR 結合タンパク質候補を複数同定した。

研究成果

• [雑誌論文] A high-affinity monoclonal antibody against the FLAG tag useful for G-protein coupled receptor study (2012)
  • 著者名/発表者名: Sasaki F, Okuno T, Saeki K, Liu Min, Onohara N, Kato H, Shimizu T, Yokomizo T
  • 雑誌名: Anal. Biochem 巻: 425 ページ: 157-165
• [雑誌論文] Helix 8 of leukotriene B4 receptor 1 inhibits ligand-induced internalization (2012)
  • 著者名/発表者名: Aratake Y, Okuno T, Matsunobu T, Saeki K, Takayanagi R, Furuya S, Yokomizo T
  • 雑誌名: FASEB J 巻: 26 ページ: 4068-4078
• [雑誌論文] クローズアップ実験法:新規抗 FLAG 抗体 2H8 の活用法 (2012)
  • 著者名/発表者名: 佐々木文之、横溝岳彦
  • 雑誌名: 実験医学 巻: 30 ページ: 2987-2992
• [備考] 新規 FLAG 抗体 2H8 の紹介
  • URL: http://plaza.umin.ac.jp/j_bio/Biochem1/2H8_Ab.html