肺および肝臓内の炎症細胞インビボライブイメージングシステムの構築

2011 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 23659240
• 研究機関: 千葉大学
• 研究代表者: 中山 俊憲 千葉大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (50237468)
• 研究分担者: 長谷川 明洋 山口大学, 医学(系)研究科(研究院), 准教授 (80376376)
• 研究期間 (年度): 2011-04-28 – 2013-03-31
• キーワード: 細胞イメージング / 喘息 / リンパ球

研究概要

本研究では申請者らが開発したマウス肺内in vivo live imagingシステムを用いて、喘息肺での種々のTh細胞分画（Th1/Th2/Th17/iTreg等）の肺内ダイナミクス解析を行う。また、新規分子プローブを用いたマルチカラーモニタリング系の構築を行うとともに、これらの技術を応用して肝臓でのin vivo live imagingシステムを新しく構築すことを目的としている。平成23年度は、下記の研究を行った。1)マウス肺内in vivo live imagingシステムによる喘息肺でのリンパ球の動的挙動解析麻酔下にベンチレーターをつないだカニューレを気管に挿入する。左肺の気管支を結紮し、右肺だけの換気で呼吸管理を行う。左肺の血流は遮断しない。その状態で左肺を2光子顕微鏡で解析する。この系において左右の肺で血流量や細胞流入数に差がないことを再確認した。抗原特異的Th2細胞のほか、Th1、Th17、NKT、iTreg細胞などの違った機能サブセットを用いて移入実験を行い、浸潤様式の差異を解析した。iBALTの形成とリンパ球の浸潤のダイナミクスの解析が始まった。2)抗原提示細胞とTh細胞の細胞間相互作用のダイナミクス解析蛍光標識したOVA抗原を取り込ませた抗原提示細胞（樹状細胞）を樹状細胞の無いマウス(DC特異的ジフテリアトキシンレセプター:DTRトランスジェニックマウスにDTを投与してDCを除去)に移入し、抗原提示細胞とTh細胞との細胞間相互作用を可視化する為の準備を終えた。抗原特異的Th2細胞のほか、Th1、Th17、NKT、iTreg細胞などの違った機能サブセットを用いて実験を行い、浸潤様式の差異を解析しているが、本解析は、分担研究者の長谷川が中心に行っている。

現在までの達成度 (区分)

1: 当初の計画以上に進展している

理由

当初は、初年度はTh1/Th2細胞などのリンパ球のみの挙動の解析を行う予定であったが、組織でのiBALTの細胞集積構造体との関連でリンパ球の挙動の解析まで出来るようになった。この解析を開始したことは当初の計画以上に進んでいると考えている。

今後の研究の推進方策

とくに、組織でのiBALTの細胞集積構造体との関連でリンパ球の挙動の解析に力をいれて研究を行いたい。

次年度の研究費の使用計画

組織でのiBALTの細胞集積構造体との関連でリンパ球の挙動の解析を開始したことにより、本研究にかかる試薬･ブラスティック･マウス等に研究費を使用する。又、海外での発表のための旅費並びに論文発表の英文校正等にも使用する予定である。

研究成果

• [雑誌論文] TSLP enhances the function of helper type2 cells. (2011)
  • 著者名/発表者名: Kitajima, M., Lee, H.-C., Nakayama, T., andZiegler, S. F.
  • 雑誌名: Eur. J. Immunol. 巻: 41 ページ: 1862-1871
  • DOI: DOI:/10.1002/eji.201041195
  • 査読あり
• [雑誌論文] Eomesodermin controls interleukin-5 production in memory T helper 2 cells through inhibition of activity of the transcription factor GATA3. (2011)
  • 著者名/発表者名: Endo, Y., Iwamura, C., Kuwahara, M., Suzuki, A., Sugaya, K., Tumes, D. J., Tokoyoda, K., Hosokawa, H., Yamashita, M., and Nakayama,T.
  • 雑誌名: Immunity 巻: 35 ページ: 733-745
  • DOI: DOI:10.1016/j.immuni.2011.08.017
  • 査読あり
• [雑誌論文] Apolipoprotein A-II suppressed concanavalin A-induced hepatitis via the inhibition of CD4 T cell function (2011)
  • 著者名/発表者名: Yamashita, J., Iwamura, C., Sasaki, T., Mitsumori, K., Ohshima, K., Hada, K., Hara, N., Takahashi, M., Kaneshiro, Y., Tanaka, H., Kaneko, K. and Nakayama, T.
  • 雑誌名: J. Immunol. 巻: 186 ページ: 3410-3420
  • DOI: 10.4049/jimmunol.1002924
  • 査読あり
• [雑誌論文] Fujimura, T., Yonekura, S., Horiguchi, S., Taniguchi, Y., Saito, A., Yasueda, H., Inamine, A., Nakayama, T. Takemori, T., Taniguchi, M., Sakaguchi, M., and Okamoto, Y. (2011)
  • 著者名/発表者名: Fujimura, T., Yonekura, S., Horiguchi, S., Taniguchi, Y., Saito, A., Yasueda, H., Inamine, A., Nakayama, T. Takemori, T., Taniguchi, M., Sakaguchi, M. and Okamoto, Y.
  • 雑誌名: Clin. Immunol. 巻: 139 ページ: 65-74
  • DOI: 10.1016/j.clim.2010.12.022
  • 査読あり
• [雑誌論文] Repressor of GATA negatively regulates murine contact hypersensitivity through the inhibition of type-2 allergic responses. (2011)
  • 著者名/発表者名: Hirasaki, Y., Iwamura, C., Yamashita, M., Ito, T., Kitajima, M., Shinoda, K., Namiki, T., Terasawa, K. and Nakayama, T.
  • 雑誌名: Clin. Immunol. 巻: 139 ページ: 267-276
  • DOI: 10.1016/j.clim.2010.12.022
  • 査読あり
• [雑誌論文] Genome-wide analysis reveals unique regulation of transcription of Th2-specific genes by GATA3. (2011)
  • 著者名/発表者名: Horiuchi, S., Onodera, A., Hosokawa, H., Watanabe, Y., Tanaka, T., Sugano, S., Suzuki, Y.,and Nakayama, T.
  • 雑誌名: J. Immunol. 巻: 186 ページ: 6378-6389
  • DOI: 10.4049/jimmunol.1100179
  • 査読あり
• [雑誌論文] Memory type 2 helper T cells induce long-lasting anti-tumor immunity by activating natural killer cells. (2011)
  • 著者名/発表者名: Kitajima, M., Ito, T., Tumes, J. D., Endo, Y., Onodera, A., Hashimoto, K., Motohashi, S., Yamashita, M., Nishimura, T., Ziegler, F. S., and Nakayama, T.
  • 雑誌名: Cancer Res. 巻: 71 ページ: 4790-478
  • DOI: 10.1158/0008-5472.CAN-10-1572
  • 査読あり
• [雑誌論文] Attenuation of lung inflammation and fibrosis in CD69-deficient mice after intratracheal bleomycin. (2011)
  • 著者名/発表者名: Yamauchi, K., Kasuya, Y., Kuroda, F., Tanaka, K., Tsuyusaki, J., Ishizaki, S., Matsunaga, H., Iwamura, C., Nakayama, T. and Tatsumi, K.
  • 雑誌名: Respir. Res. 巻: 12 ページ: 131
  • DOI: 10.1186/1465-9921-12-131
  • 査読あり
• [雑誌論文] L-22 attenuates IL-25 production by lung epithelial cells and inhibits antigen-induced eosinophilic airway inflammation. . (2011)
  • 著者名/発表者名: Takahashi, K., Hirose, K., Kawashima, S., Niwa, Y., Wakashin, H., Iwata, A., Tokoyoda, K., Renauld, J.-C., Iwamoto, I., Nakayama, T. and Nakajima, H.
  • 雑誌名: J. Allergy Ciln. Immunol. 巻: 128 ページ: 1067-1076
  • DOI: 10.1016/j.jaci.2011.06.018
  • 査読あり
• [雑誌論文] Cigarette smoke-induced pulmonary inflammation is attenuated in CD69-deficient mice. (2011)
  • 著者名/発表者名: Tsuyusaki, J., Kuroda, F., Kasuya, Y., Ishizaki, I., Yamauchi, K., Sugimoto, H., Kono, T., Iwamura, C., Nakayama, T., and Tatsumi, K.
  • 雑誌名: J. Recept. Sig. Transduct. Res. 巻: 31 ページ: 434-439
  • DOI: 10.3109/10799893.2011.631929
  • 査読あり
• [学会発表] Real-time cellular imaging of T lymphocyte accumulation in a mouse asthma model. 喘息肺での浸潤リンパ球のリアルタイムイメージング 第85回日本細菌学会総会 (2012)
  • 著者名/発表者名: Hasegawa, A., Shirai, M. and Nakayama, T.
  • 学会等名: 第85回日本細菌学会総会
  • 発表場所: 長崎
  • 年月日: 2012.3.28
• [学会発表] Nakayama, T. and Iwamura, C.NKT cell-mediated regulation of antigen-specific memory Th2 cell function. (2011)
  • 著者名/発表者名: Nakayama, T. and Iwamura, C.
  • 学会等名: 6th International Symposium on CD1 and NKT Cells,
  • 発表場所: Chicago,USA
  • 年月日: 2011.9.25
• [学会発表] Epigenetic regulation of GATA3 expression and its target genes in Th2 cells. (2011)
  • 著者名/発表者名: Nakayama, T.
  • 学会等名: 45th Joint Working Conference on Immunology and Viral Diseases
  • 発表場所: CA, USA
  • 年月日: 2011.6.20
• [学会発表] Regulation of memory Th2 cell function and allergic airway inflammation via polycomb and trithorax molecules (2011)
  • 著者名/発表者名: Nakayama, T. and Onodera, A.
  • 学会等名: 30th Congress of the European Academy of Allergy and Clinical Immunology
  • 発表場所: Istanbul, Turkey
  • 年月日: 2011.6.15
• [学会発表] Eomesodermin controls IL-5 production in memory Th2 cells through the inhibition of GATA3 activity (2011)
  • 著者名/発表者名: 遠藤裕介、小野寺淳、細川裕之、中山俊憲
  • 学会等名: 第21回Kyoto T Cell Conference
  • 発表場所: 京都
  • 年月日: 2011.6.11
• [学会発表] Selective expansion and functional modulation of memory Th2 cells by activated NKT cells in vivo (2011)
  • 著者名/発表者名: 岩村千秋、篠田健太、花澤麻美、中山俊憲
  • 学会等名: 第21回Kyoto T Cell Conference
  • 発表場所: 京都
  • 年月日: 2011.6.11
• [学会発表] Epigenetic control of memory Th2 cell function via Polycomb and Trithorax molecules. (2011)
  • 著者名/発表者名: Nakayama, T., and Onodera, A
  • 学会等名: EUThyme-Rolduc Meeting
  • 発表場所: Leeuwenhorst, NL
  • 年月日: 2011.5.24
• [学会発表] 好酸球性慢性鼻副鼻腔炎に伴う鼻茸の病理学的形成機序の解明/ Pathological mechanism of eosinophilic chronic rhinosinusitis with nasal polyps. (2011)
  • 著者名/発表者名: Iinuma, T., Inamine, A., Sakurai, T., Sakurai, D., Yamamoto, H., Nakayama, T. and Okamoto, Y
  • 学会等名: 第40回日本免疫学会学術集会
  • 発表場所: 幕張
  • 年月日: 2011.11.29
• [学会発表] メモリ－Th2細胞はNK細胞を活性化し抗腫瘍効果を持続させる/ Memory type 2 helper T cells induce long-lasting anti-tumor immunity by activating natural killer cells. (2011)
  • 著者名/発表者名: Ito, T., Kitajima, M., Tumes, J. D., Endo, Y., Onodera, A., Hashimoto, K., Motohashi, S., Yamashita, M., Nishimura, T. and Nakayama, T.
  • 学会等名: 第40回日本免疫学会学術集会
  • 発表場所: 幕張
  • 年月日: 2011.11.28
• [学会発表] 活性化NKT細胞によるメモリ－Th2細胞の増加と機能変化/ Selective expansion and functional modulation of memory Th2 cells by activated NKT cells in vivo. (2011)
  • 著者名/発表者名: 岩村千秋、篠田健太、高橋克己、中山俊憲
  • 学会等名: 第40回日本免疫学会学術集会
  • 発表場所: 幕張
  • 年月日: 2011.11.28
• [学会発表] 腸炎の発症におけるCD69分子の役割/ Crucial role for CD69 in the pathogenesis of DSS-induced colitis. (2011)
  • 著者名/発表者名: Hasegawa, A. and Nakayama, T.
  • 学会等名: 第40回日本免疫学会学術集会
  • 発表場所: 幕張
  • 年月日: 2011.11.28
• [学会発表] STAT6によって誘導されるポリコ－ムとトライソラックスの置換反応/ STAT6-mediated displacement of Polycomb by Trithorax complex establishes long-term maintenance of GATA3 expression in Th2 cells. (2011)
  • 著者名/発表者名: Onodera, A., Yamashita, M., Endo, Y., Kuwahara, M., Tofukuji, S., Hosokawa, H., Horiuchi, S., Watanabe, Y. and Nakayama, T.
  • 学会等名: 第40回日本免疫学会学術集会
  • 発表場所: 幕張
  • 年月日: 2011.11.27
• [学会発表] α-GalCer-Ag DCの口腔粘膜下投与におけるアレルギ－性鼻炎炎症の抑制機序の解明 (2011)
  • 著者名/発表者名: 櫻井利興、稲嶺絢子、櫻井大樹、飯沼智久、米倉修二、石井保之、中山俊憲、岡本美孝
  • 学会等名: 第61回日本アレルギ－学会秋季学術大会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2011.11.12
• [学会発表] IL-22は気道上皮細胞によるIL-25産生を抑制し、アレルギ－性気道炎症を制御する (2011)
  • 著者名/発表者名: 高橋健太郎、廣瀬晃一、川島沙紀、丹羽祐輔、若新英史、岩田有史、小林芳久、常世田好司、中山俊憲、谷口正実、秋山一男
  • 学会等名: 第61回日本アレルギ－学会秋季学術大会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2011.11.11
• [産業財産権] 関節リウマチに対する抗ＩＬ－６受容体抗体療法の有効性の予測方法 (2011)
  • 発明者名: 中島裕史、池田啓、加々美新一郎、鈴木快枝、中山俊憲他6名
  • 権利者名: 千葉大学
  • 産業財産権番号: 特許: 特願:2011-156921
  • 出願年月日: 2011年07月15日