高特異性、高感受性、低コストな熱帯感染症診断キットの開発

2012 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 23659297
• 研究機関: 大阪大学
• 研究代表者: 生田 和良 大阪大学, 微生物病研究所, 教授 (60127181)
• 研究分担者: 黒須 剛 大阪大学, 微生物病研究所, 助教 (70432432) ; 作道 章一 琉球大学, 医学部, 准教授 (10397672)
• キーワード: デングウイルス / チクングンヤウイルス / 迅速診断キット / イミュノクロマト法 / ヒト単クローン抗体 / マウス単クローン抗体 / タイ / 熱帯感染症

研究概要

熱帯地域には数々の熱帯感染症があり、これらの多くはこれまで「顧みられない熱帯病（Neglected Tropical Diseases)」とされてきたものに含まれる。特に、蚊媒介性の感染症、たとえばデング熱・デング出血熱やチクングンヤ熱は熱帯、亜熱帯地域に分布しており、未だにこれらの感染症に対する診断技術も確立されていない。私たちは、デング患者の末梢リンパ球を用いて、デングウイルスの4つの血清型（1型～4型）のいずれとも交差反応するヒト単クローン抗体を作製し、この抗体を用いて日本の企業との共同研究としてイムノクロマト法による迅速診断キットを開発した。また、マウスにチクングンヤウイルスを免疫することによりマウス単クローン抗体を作製し、同じく日本の企業との共同研究として迅速診断キットを開発した。現在、タイのマヒドン大学熱帯医学部およびこの熱帯医学部内に設置した大阪大学微生物病研究所の感染症共同研究拠点であるMOCID (Mahidol-Osaka Center for Infectious Diseases)
との共同研究として、これらキットの感度と特異性に関する、患者サンプルを用いた評価を実施しているところである。また、2009年に豚に由来するインフルエンザの原因ウイルスとして出現したウイルスH1N1pdm (2009)を高感度に、しかも特異的に検出できるイムノクロマト迅速診断キットを企業との共同研究として開発し、その評価を日本で実施し、また現在はタイでも実施している。

研究成果

• [雑誌論文] Characterization of chikungunya virus infection of a human keratinocyte cell line: Role of mosquito salivary gland protein in suppressing the host immune response. (2013)
  • 著者名/発表者名: Puiprom O, Morales Vargas RE, Potiwat R, Chaichana P, Ikuta K, Ramasoota P, Okabayashi T.
  • 雑誌名: Infect Genet Evol 巻: 17C ページ: 210-215
  • DOI: doi:10.1016/j.meegid.2013.04.005
  • 査読あり
• [雑誌論文] Dengue virus neutralization and antibody-dependent enhancement activities of human monoclonal antibodies derived from dengue patients at acute phase of secondary infection. (2013)
  • 著者名/発表者名: Sasaki, T., Setthapramote, C., Kurosu, T., Nishimura, M., Asai, A., Omokoko, M.D., Pipattanaboon, C., et al.
  • 雑誌名: Antiviral Res. 巻: in press. ページ: in press
  • DOI: 10.1016/j.antiviral.2013.03.018.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Chikungunya virus induces a more moderate cytopathic effect in mosquito cells than in mammalian cells. (2013)
  • 著者名/発表者名: Li, Y.G., Siripanyaphinyo, U., Tumkosit, U., Noranate, N., A-Nuegoonpipat, A., Kurosu, T., Ikuta, K., Takeda, N., and Anantapreecha, S.
  • 雑誌名: Intgervirology 巻: 56 ページ: 6-12
  • DOI: 10.1159/000339985
  • 査読あり
• [雑誌論文] Reliability of a newly-developed immunochromatography diagnostic kit for pandemic influenza A/H1N1pdm virus: Implications for drug administration. (2012)
  • 著者名/発表者名: Sasaki, T., Kubota-Koketsu, R., Takei, M., Hagihara, T., Iwamoto, S., Murao, T., Sawani, K., Fukae, D., et al.
  • 雑誌名: PLoS One 巻: 7 ページ: e50670
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0050670
  • 査読あり
• [雑誌論文] Limited cross-reactivity of mouse monoclonal antibodies against dengue virus capsid protein among four serotypes. (2012)
  • 著者名/発表者名: Noda, M., Masrinoul, P., Pipattanaboon, C., Ramasoota, P., Setthapramote, C., Sasaki, T., Sasayama, M., Yamashita, A., Kurosu, T., Ikuta, K., and Okabayashi, T.
  • 雑誌名: Biologics 巻: 6 ページ: 409-416
  • DOI: 10.2147/BTT.S37792
  • 査読あり
• [雑誌論文] Analysis of Vis-NIR spectra changes to measure the inflammatory response in the nasal mucosal region of influenza A and B virus-infected patients. (2012)
  • 著者名/発表者名: Sakudo, A., Baba, K., and Ikuta, K.
  • 雑誌名: J. Clin. Virol. 巻: 55 ページ: 334-338
  • DOI: 10.1016/j.jcv.2012.08.015
  • 査読あり
• [雑誌論文] Discrimination of influenza virus-infected nasal fluids by Vis-NIR spectroscopy. (2012)
  • 著者名/発表者名: Sakudo, A., Baba, K., and Ikuta, K
  • 雑誌名: Clin. Chim. Acta 巻: 414C ページ: 130-134
  • DOI: 10.1016/j.cca.2012.08.022
  • 査読あり
• [雑誌論文] Human monoclonal antibodies to neutralize all dengue virus serotypes using lymphocytes from patients at acute phase of the secondary infection. (2012)
  • 著者名/発表者名: Settapramote, C., Sasaki, T., Puiprom, O., Limkittikul, K., Pitaksajjakul, P., Pipattanaboon, C., Sasayama, M., et al.
  • 雑誌名: Biochem. Biophy. Res. Commun. 巻: 423 ページ: 867-872
  • DOI: 10.1016/j.bbrc.2012.06.057
  • 査読あり
• [雑誌論文] Poly(I:C), an agonist of toll-like receptor-3, inhibits replication of the Chikungunya virus in BEAS-2B cells. (2012)
  • 著者名/発表者名: Li, Y.G., Siripanyaphinyo, U., Tumkosit, U., Noranate, N., A-Nuegoonpipat, A., Pan, Y., Kameoka, M., Takeshi, K., Ikuta, K., Takeda, N., and Anantapreecha, S.
  • 雑誌名: Virol. J. 巻: 9 ページ: 114
  • DOI: 10.1186/1743-422X-9-114
  • 査読あり
• [雑誌論文] Detection of influenza virus using a lateral flow immunoassay for amplified DNA by a microfluidic RT-PCR chip. (2012)
  • 著者名/発表者名: Nagatani, N., Yamanaka, K., Ushijima, H., Koketsu, R., Sasaki, T., Ikuta, K., Saito, M., Miyahara, T., and Tamiya, E.
  • 雑誌名: Analyst. 巻: 137 ページ: 3422-3426
  • DOI: 10.1039/c2an16294f
  • 査読あり
• [学会発表] 抗体医薬開発を目的としたデングウイルス感染症に対する抗デングヒト型単クローン抗体の作製 (2012)
  • 著者名/発表者名: 佐々木正大、Chayanee Setthapramote、Pasnnamthip Pitsksajjakul、Chonlatip Pipattanaboon、et a.
  • 学会等名: 第60回日本ウイルス学会
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 20121113-20121115
• [学会発表] 抗デングウイルス抗体とエンベロープ蛋白質との相互作用解析 (2012)
  • 著者名/発表者名: 西村光弘、佐々木正大、沖大也、チャヤニーセタプラモーテ、小野健一郎、ほか
  • 学会等名: 第60回日本ウイルス学会
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 20121113-20121115
• [学会発表] Analysis of antibodies against dengue virus NS1 from mouse and dengue virus infected patients. (2012)
  • 著者名/発表者名: Omokoko Magot, aaaaaaamasrinoul Promsin, Setthapramote Chayanee, 佐々木正大、ほか
  • 学会等名: 第60回日本ウイルス学会
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 20121113-20121115
• [備考] 大阪大学微生物病研究所ウイルス免疫分野
  • URL: http://virology.biken.osaka-u.ac.jp/