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2011 年度 実施状況報告書

アルツハイマー病の新たなバイオマーカーの探索

研究課題

研究課題/領域番号 23659450
研究機関弘前大学

研究代表者

東海林 幹夫  弘前大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (60171021)

研究期間 (年度) 2011-04-28 – 2013-03-31
キーワード神経分子病態学
研究概要

血液tauの同定と測定系の開発:これまで開発した変異ヒトtauを過剰発現するTgTauP301LモデルマウスのCSFと血液を用いて,抗ヒトtau抗体(ビオチン化HT-7, BT-2)と新たに作成したヒト中枢性tauに対する抗体(tau-A,tau-B)を用いて,免疫沈降を行い血液ヒトtauの存在を同定した.ヒト血液で同様の方法を用いて中枢性,抹消性tauを同定し,質量分析解析による検証を行った.上記抗体セットによるECL法による微量ELISA測定系を開発しつつあり,我々のコホートで従来測定したヒトCSF Abeta40,Abeta42, tau値との相関を検討し,臨床的有用性を検証している.CSF α-synuclein,TDP-43の高感度ELISAの開発:CSF α-synuclein,TDP-43のELISAを作成し,ECL法による高感度測定系による微量測定を開発した.バイオマーカーの臨床的検討をAD,DLB,FTLD-TDPなどの非AD型認知症や神経変性疾患において行った.プロテオミックスによって明らかにされた28候補マーカーの臨床的検証:CSFの質量分析によって,分子量3万以上の蛋白は142種類が同定されたが,このうち28のマーカーで既に報告されているもの以外の分子に関して,弘前大学神経内科もの忘れ外来で検討してきた447例のCSF,血液および脳病理所見を用いて臨床的検証中である.ELISAシステムの入手が困難である分子については,免疫沈降/Western blotによって検討しており,結果を統計処理して,各種マーカーの有意差検定,感度と特異性の評価を行い,臨床的有用性を検討している.

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

血液tauの同定と測定系の開発において,モデルマウスとヒトで血液中枢性,抹消性tauを同定した.上記抗体セットによるECL法による微量ELISA測定系を開発しつつある.我々のコホートで従来測定したヒトCSF Abeta40,Abeta42, tau値,血漿 Abeta40,Abeta42との相関を検討し,臨床的有用性を検証している.CSF α-synucleinにおいてはECL法による高感度測定系による微量測定を開発した.バイオマーカーの臨床的検討をAD,DLB,FTLD-TDPなどの非AD型認知症や神経変性疾患において既に行っている.プロテオミックスによって明らかにされた28候補マーカーの臨床的検証では弘前大学神経内科もの忘れ外来で検討してきた447例のCSF,血液および病理所見を用いてで臨床的検証中である.ELISAシステムの入手が困難である分子については,免疫沈降/Western blotによる検討しており,結果を統計処理して,各種マーカーの有意差検定,感度と特異性の評価を行い,臨床的有用性を検討している.

今後の研究の推進方策

血液tau,CSF α-synucleinにおいてはさらに我々の各種疾患コホートのCSF,血液を用いてバイオマーカーとしての臨床的検討を続ける.疾患診断感度,特異性,発症予測性を明らかにして,臨床的有用性を検証する.これまで測定したCSF Abeta40,Abeta42, tau (AD index: Abeta40/42 x Tau)および血液 Abeta40,Abeta42測定値との相関統計解析をおこない,臨床的有用性をさらに検証する.ECL法による高感度多重測定系の立ち上げを行い,利用可能な測定キットを作成し,特許申請を行う.残りの約半数のプロテオミックスによって明らかにされた認知症疾患関連分子候補マーカーの臨床的検証をさらに進める.

次年度の研究費の使用計画

TgTauP301L マウスの継続的大量飼育と常時健康状態チェックや大量のELISA,Western blotを行うために実験補助者への謝金および研究成果の発表や連携・共同研究者との研究ミーテイング開催のための,旅費と宿泊費を使用する.残りの,多くの研究費は高感度ELISA試薬,質量分析試薬,免疫染色,Western blot などの生化学的研究試薬,マウスの飼育料および論文投稿料などの消耗品に使用される.

  • 研究成果

    (9件)

すべて 2012 2011 その他

すべて 雑誌論文 (6件) (うち査読あり 6件) 学会発表 (3件)

  • [雑誌論文] Altered γ-secretase activity in mild cognitive impairment and Alzheimer's disease2012

    • 著者名/発表者名
      Kakuda N
    • 雑誌名

      EMBO Mol Med

      巻: 4(4) ページ: 344-52

    • DOI

      10.1002/emmm.201200214

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Molecular Approaches to the Treatment, Prophylaxis, and Diagnosis of . Alzheimer's Disease:Clinical Molecular and Genetic Studies on Alzheimer's Disease2012

    • 著者名/発表者名
      Shoji M
    • 雑誌名

      J Pharmacol Sci

      巻: 118(3) ページ: :345-9

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Biomarkers of the dementia2011

    • 著者名/発表者名
      Shoji M
    • 雑誌名

      Int J Alzheimers Dis

      ページ: 564321

    • DOI

      doi:10.4061/2011/564321.

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Dissociation of β-amyloid from lipoprotein in cerebrospinal fluid from Alzheimer's disease accelerates β-amyloid-42 assembly2011

    • 著者名/発表者名
      Takamura A, Kawarabayashi T, Yokoseki T, Shibata M, Morishima-Kawashima M, Saito Y, Murayama S, Ihara Y, Abe K, Shoji M, Michikawa M, Matsubara E
    • 雑誌名

      J Neurosci Res

      巻: 89(6) ページ: 815-21

    • DOI

      doi:10.1002/jnr.22615

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Extracellular and intraneuronal HMW-AbetaOs represent a molecular basis of memory loss in Alzheimer's disease model mouse2011

    • 著者名/発表者名
      Takamura A, Okamoto Y, Kawarabayashi T, Yokoseki T, Shibata M, Mouri A, Nabeshima T, Sun H, Abe K, Urisu T, Yamamoto N, Shoji M, Yanagisawa K, Michikawa M, Matsubara E
    • 雑誌名

      Mol Neurodegener

      巻: 6:20 ページ: 1-16

    • DOI

      doi: 10.1186/1750-1326-6-20

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Factors responsible for neurofibrillary tangles and neuronal cell losses in tauopathy2011

    • 著者名/発表者名
      Wakasaya Y, Kawarabayashi T, Watanabe M, Yamamoto-Watanabe Y, Takamura A, Kurata T, Murakami T, Abe K, Yamada K, Wakabayashi K, Sasaki A, Westaway D, Hyslop PS, Matsubara E, Shoji M
    • 雑誌名

      J Neurosci Res

      巻: 89(4) ページ: 576-84

    • DOI

      doi: 10.1002/jnr.22572

    • 査読あり
  • [学会発表] アルツハイマー病と軽度認知障害の発症予測スクリーニングマーカーの検証

    • 著者名/発表者名
      松原悦朗,高村歩美,若佐谷保仁,瓦林毅,東海林幹夫
    • 学会等名
      第52回日本神経学会学術大会
    • 発表場所
      名古屋
    • 年月日
      平成23年5月20日
  • [学会発表] Abeta oligomerはlipid raftsでtau蓄積を促進する

    • 著者名/発表者名
      瓦林毅,若佐谷保仁,松原悦朗,東海林幹夫
    • 学会等名
      第52回日本神経学会学術大会
    • 発表場所
      名古屋
    • 年月日
      平成23年5月20日
  • [学会発表] DNA microarray解析による神経原線維変化の形成および神経細胞死に関する因子の解析

    • 著者名/発表者名
      若佐谷保仁,瓦林毅,松原悦朗,東海林幹夫
    • 学会等名
      第52回日本神経学会学術大会
    • 発表場所
      名古屋
    • 年月日
      平成23年5月19日

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公開日: 2013-07-10  

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