研究課題
本研究課題では、適切な治療を施さなければ致死的な転帰をもとりうるデング出血熱の発症を事前に予測する方法を確立することを目的とし、病態形成への関与が想定されるいくつかの血漿中生体物質を重症化事前予測バイオマーカーの候補として、ポータブル表面プラズモン共鳴(SPR)測定装置を用いた免疫測定による迅速かつ定量的測定法の検討を計画した。以下交付申請書の研究実施計画に沿って研究実績を報告する。前年度までに「[1]バイオマーカーの選択・[2]SPRによる測定系の確立」として、市販ポータブルSPR測定機の基本性能を比較し、オプトクエスト社製SPR01を選定ののち、機器性能評価を兼ねて重症デング出血熱の早期バイオマーカーの候補として炎症時に誘導されるたんぱく質IP10を選定し、二種類の異なる抗体を用いたサンドウィッチ法による測定系を設計し、リコンビナントヒトIP10を用いて検出感度を決定した。さらに、病原体由来のバイオマーカーとして、デングウイルス非構造タンパクNS1を、また、宿主応答のバイオマーカーとして、CCL3(MIP-1α)の測定系を作製した。「[3]臨床検体の収集」については国外共同研究者、ホーチミン市パスツール研究所、Vu TQ Huong博士、Nguyen TP Lan博士の協力のもとに現地ベトナム社会主義共和国ホーチミン市の医療機関でパイロット的に小児例の検体を収集し、上述の測定系を適用した。今年度は「[3]臨床検体の収集、[4]測定技術の移転、[5] 臨床検体の測定」を進めた。具体的には30例のデング出血熱患者血漿検体を得て、上記の三種IP10、NS1、CCL3(MIP-1α)を測定し、重症度との関連を分析した。
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