ファージ溶菌酵素を利用するセラチア菌感染症に対する新制御法の開発

2013 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 23659524
• 研究種目: 挑戦的萌芽研究
• 配分区分: 基金
• 研究分野: 小児科学
• 研究機関: 高知大学
• 研究代表者: 松下 憲司 高知大学, 教育研究部医療学系, 講師 (20332835)
• 研究分担者: 松崎 茂展 高知大学, 教育研究部医療学系, 准教授 (00190439) ; 大畑 雅典 高知大学, 教育研究部医療学系, 教授 (50263976)
• 研究期間 (年度): 2011 – 2013
• キーワード: バクテリオファージ / 溶菌酵素 / ファージ療法 / セラチア菌 / グラム陰性菌 / 外膜

研究概要

セラチア菌 (Serratia marscecens) は多剤耐性化の進行により、感染症の治療が困難になりつつある。我々は、本菌感染症に対するバクテリオファージ（ファージ）が保有する溶菌酵素を利用するファージ療法の可能性を検討した。まず、我々が分離した２種のセラチア菌ファージKSP90、KSP100の全ゲノム塩基配列を解読したが、相同性検索では溶菌酵素ドメインをもつ遺伝子は特定できなかった。そこで、データバンクに登録されているセラチアファージETAの推定溶菌酵素をBacillus属ファージ の溶菌酵素の推定外膜透過ドメインと融合させた融合タンパク質の遺伝子を合成し、溶菌活性の検討を進めている。

研究成果

• [雑誌論文] Synergistic bacteriolysis by bacteriophage EF24C endolysin ORF9 and lantibiotic nisin and its appl ication to pulsed-field gel electro phoreic analysis of Enterococcus fa ecalis (2013)
  • 著者名/発表者名: Takemura-Uchiyama I, Uchiyama J, Sa toh M, Uhihara T, Daibata M, Matsuzaki S
  • 雑誌名: Annals of Microbiology 巻: 63(3) ページ: 1209-1211
  • 査読あり
• [雑誌論文] Evaluating eff icacy of bacteriophage therapy again st Staphylococcus aureus infections using a silkworm larval infection mo del (2013)
  • 著者名/発表者名: Takemura-Uchiyama I, Uchiyama J, Kato S, Inoue T, Ujihara T, Ohara N, Da ibata M, Matsuzaki S
  • 雑誌名: FEMS Microbiol Lett 巻: 347(1) ページ: 52-60
  • 査読あり
• [雑誌論文] Characteriz ation of Helicobacter pylori bacteri ophage KHP30 (2013)
  • 著者名/発表者名: Uchiyama J, Takeuchi H, Kato S, Gamoh K, Takemura-Uchiyama I, Ujihara T, Daibata M, Matsuzaki S
  • 雑誌名: Appl. Environ. Microbiol 巻: 79(10) ページ: 79(10):3176-84
  • 査読あり
• [雑誌論文] バクテリオファージ尾部吸着分子を利用した細菌検出法 (2013)
  • 著者名/発表者名: 内山淳平、内山(竹村)伊代、渡辺茂、大畑雅典、松崎茂展
  • 雑誌名: バイオインダストリー 巻: 30(2) ページ: 47-53
• [雑誌論文] Pseudomonas aeruginosa keratitis in mice : effects of topical bacteriophage KPP12 administration (2012)
  • 著者名/発表者名: Fukuda K, Ishida W, Uchiyama J, Rashel M, Kato S, Morita T, Muraoka A, Sumi T, Matsuzaki S, Daibata M, Fukus hima A
  • 雑誌名: PLoS One 巻: 7(10) ページ: e47742
  • 査読あり
• [雑誌論文] Analys is of deoxynucleosides in bacteriophages ϕEF24C and K and the frequency of a specific restriction site in the genomes of members of the bacteriophage subfamily Spounavirinae (2012)
  • 著者名/発表者名: Uchiyama J, Maeda Y, Takemura I, Gamoh K, Matsuzaki S, Daibata M
  • 雑誌名: Arch Virol 巻: 157(8) ページ: 1587-92
  • 査読あり
• [雑誌論文] Complete genome sequences of two Helicobacter pylori bacteriophages isolated from Japanese patients (2012)
  • 著者名/発表者名: Uchiyama J, Takeuchi H, Kato S, Takemura-Uchiyama I, Ujihara T, Daibata M, Matsuzaki S
  • 雑誌名: J Virol 巻: 86(20) ページ: 11400-1
  • 査読あり
• [雑誌論文] Genetic characterization of Pseudomonas aeruginosa bacteriophage KPP10 (2012)
  • 著者名/発表者名: Uchiyama J, Rashel M, Takemura I, Kato S, Ujihara T, Muraoka A, Matsuzaki S, Daibata M
  • 雑誌名: Arch Virol 巻: 157(4) ページ: 733-8
  • 査読あり
• [雑誌論文] Improved adsorption of an Enterococcus faecalis bacteriophage ΦEF24C with a spontaneous point mutation (2011)
  • 著者名/発表者名: Uchiyama J, Takemura I, Satoh M, Kato S, Ujihara T, Akechi K, Matsuzaki S, Daibata M
  • 雑誌名: PLoS One 巻: 6(10) ページ: e26648
  • 査読あり
• [雑誌論文] バクテリオファージ療法研究の現状と展望 (2011)
  • 著者名/発表者名: 松崎茂展、内山淳平、竹村伊代、大畑雅典
  • 雑誌名: 日本医事新報 巻: 4551 ページ: 48-49
• [学会発表] Estimation of Helicobacter pylori phage ecology (2014)
  • 著者名/発表者名: Matsuzaki S, Uchiyama J, Takeuchi H, Takemura-Uchiyama I, Sakaguchi Y, Ujihara T, Daibata M
  • 学会等名: 第87回日本細菌学会総会
  • 発表場所: タワーホール船堀(東京)
  • 年月日: 20140326-28
• [学会発表] 緑膿菌ファージKPP22 吸着能変異ファージの解析 (2014)
  • 著者名/発表者名: 宮田怜奈、内山淳平、山口琴絵、重久立、内山伊代、氏原隆子、大畑雅典、松崎茂展
  • 学会等名: 第87回日本細菌学会総会
  • 発表場所: タワーホール船堀(東京)
  • 年月日: 20140326-28
• [学会発表] Phage therapy experiment against staphylococcal lung-derived septic mouse model (2014)
  • 著者名/発表者名: Takemura-Uchiyama I, Uchiyama J, Sakaguchi Y, Ujihara T, Daibata M, Matsuzaki S
  • 学会等名: 第87回日本細菌学会総会
  • 発表場所: タワーホール船堀 (東京)
  • 年月日: 20140326-28
• [学会発表] Helicobacter pylori バクテリオファージKHP30 およびその遊離宿主菌株の解析 (2013)
  • 著者名/発表者名: 松崎茂展,内山淳平,竹内啓晃,内山(竹村)伊代,氏原隆子,大畑雅典
  • 学会等名: 第66回日本細菌学会中国・四国支部総会
  • 発表場所: 広島国際大学(広島県呉市)
  • 年月日: 20131012-13
• [学会発表] 黄色ブドウ球菌バクテリオファージ尾部吸着タンパク質と細菌側レセプターの同定 (2012)
  • 著者名/発表者名: 内山淳平、内山伊代、宮田怜奈、山口琴絵、重久立、氏原隆子、大畑雅典、松崎茂展
  • 学会等名: 第65回日本細菌学会中国・四国支部総会
  • 発表場所: 徳島大学(徳島)
  • 年月日: 20121020-21
• [学会発表] 胆汁うっ滞が遷延し肝生検で肝内胆管減少症と診断された超低出生体重児の1例 (2012)
  • 著者名/発表者名: 荒木まり子, 高杉尚志, 三浦紀子, 松下憲司, 藤枝幹也, 脇口 宏, 中尾紀恵, 河本浩二, 惠谷ゆり, 位田 忍
  • 学会等名: 第39回日本小児栄養消化器肝臓学会
  • 発表場所: 梅田スカイビルタワーウエスト(大阪)
  • 年月日: 20120714-15
• [学会発表] 高度な高ビリルビン血症を呈さなかったが後に核黄疸と診断された極低出生体重児の1例(ワークショップ「古くて新しい問題、核黄疸 -UB(アンバウンドビリルビン)を中心に」) (2012)
  • 著者名/発表者名: 松下憲司,三浦紀子,細川卓利,脇口宏,深谷孝夫
  • 学会等名: 第48回日本周産期・新生児医学会学術集会
  • 発表場所: 大宮ソニックシティ(埼玉)
  • 年月日: 20120708-10
• [学会発表] 難治性黄色ブドウ球菌感染症に対するバクテリオファージ療法の開発 : 治療用ファージバンクの構築 (2012)
  • 著者名/発表者名: 内山淳平,竹村伊代,氏原隆子,松崎茂展,大畑雅典
  • 学会等名: 第86回日本感染症学会総会
  • 発表場所: 長崎ブリックホール他(長崎)
  • 年月日: 20120425-26
• [学会発表] ファージリガンド分子を利用した細菌検査法の開発 (2012)
  • 著者名/発表者名: 内山淳平,竹村伊代,氏原隆子,松崎茂展,大畑雅典
  • 学会等名: 第86回日本感染症学会総会
  • 発表場所: 長崎ブリックホール他(長崎)
  • 年月日: 20120425-26
• [学会発表] X-linked Myotubular myopathy の一例 (2012)
  • 著者名/発表者名: 大石 拓, 高杉尚志, 三浦紀子, 荒木まり子, 満田直美, 佐藤哲也, 松下憲司, 久川浩章, 藤枝幹也, 脇口 宏
  • 学会等名: 第115回日本小児科学会
  • 発表場所: 福岡国際会議場等(福岡)
  • 年月日: 20120420-22
• [学会発表] Improved adsorption of an Enterococcus faecalis bacteriophage phiEF24C with a point mutation (2012)
  • 著者名/発表者名: Uchiyama J, Takemura I, Ujihara T, Matsuzaki S, Daibata M
  • 学会等名: 第85回日本細菌学会総会
  • 発表場所: 長崎ブリックホール他(長崎)
  • 年月日: 20120327-29
• [学会発表] 緑膿菌臨床分離株に対するバクテリオファージKPP12 の溶菌効果の検討 (2012)
  • 著者名/発表者名: 福田 憲,内山淳平,森田珠恵,石田わか,角環,松崎茂展,大畑雅典,福島敦樹
  • 学会等名: 角膜カンファランス
  • 発表場所: ホテルニューオータニ(東京)
  • 年月日: 20120223-25
• [学会発表] 黄色ブドウ球菌ファージの尾部リガンドタンパク質を利用した細菌検出法の開発 (2012)
  • 著者名/発表者名: 内山伊代,内山淳平,松崎茂展,杉浦哲朗,大畑雅典
  • 学会等名: 第8回合同地方会(第57回日本臨床検査医学会中国・四国支部総会,第152回日本臨床化学会中国支部例会・総会,第22回日本臨床化学会四国支部例会・総会)
  • 発表場所: 岡山大学(岡山)
  • 年月日: 20120204-05
• [学会発表] 多血症、DIC、消化管出血後に消化管アレルギー(下部消化器症状型)を合併した双胎第1子例 (2011)
  • 著者名/発表者名: 松下憲司,荒木まり子,高杉尚志,山本雅樹,大石 拓,藤枝幹也 ,脇口 宏
  • 学会等名: 第23回四国小児アレルギー研究会
  • 発表場所: 高知城ホール(高知)
  • 年月日: 20110618-19
• [学会発表] Young-Simpson 症候群が疑われる1例 (2011)
  • 著者名/発表者名: 満田直美, 細川卓利, 荒木まり子, 松下憲司, 高杉尚志, 藤枝幹也, 脇口宏
  • 学会等名: 第53回日本小児神経学会
  • 発表場所: パシフィコ横浜(横浜)
  • 年月日: 20110526-28
• [学会発表] バクテリオファージによるマウス緑膿菌角膜炎の抑制効果 (2011)
  • 著者名/発表者名: 福田憲,石田わか,角環,森田珠恵,内山淳平,松崎茂展,大畑雅典,福島敦樹
  • 学会等名: 第48回日本眼感染症学会
  • 発表場所: 国立京都国際会館(京都市)
  • 年月日: 20110000
• [図書] Chapter10. Phage therapy : experiments using animal infection models. Phage The rapy. Current Research and Applications. Editors: Jan Borysowski, Rysz ard Międzybrodzki, Andrzej Górski (2014)
  • 著者名/発表者名: Matsuzaki S, Uchiyama J, Takemura-Uchiyama I, and Daibata M
  • 総ページ数: 378
  • 出版者: Caister Academic Press
• [産業財産権] 黄色ブドウ球菌を検出する方法、黄色ブドウ球菌測定用メンブレン及び黄色ブドウ球菌測定用キット (2014)
  • 発明者名: 内山淳平、内山伊代、花木秀明、松井秀仁、大畑雅典、松崎茂展
  • 権利者名: 国立大学法人高知大学学校法人北里研究所
  • 産業財産権種類: 特許
  • 産業財産権番号: 特願2014-046922
  • 出願年月日: 2014-03-10
• [産業財産権] 黄色ブドウ球細菌に結合するタンパク質及びそのタンパク質を利用した黄色ブドウ球菌の測定方法 (2012)
  • 発明者名: 大畑雅典、松崎茂展 内山淳平、竹村伊代
  • 権利者名: 国立大学法人高知大学
  • 産業財産権種類: 特許
  • 産業財産権番号: 特願2012-160613
  • 出願年月日: 2012-07-19