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DNA損傷応答に関与する癌抑制因子53BP1は、DNA二本鎖切断損傷(DSB)部位へと急速にリクルートされ、損傷フォーカスを形成する。53BP1に変異を導入することで細胞内に安定的に発現できるGFP-53BP1 融合タンパク質を見出し、DNA損傷を検出するバイオセンサーを開発した。さらに、共発現させたPCNA-DsRedの核内局在パターンにより細胞周期の移行を同定できるシステムを構築した。これら2つの蛍光タンパク質を発現するU2OS細胞株(U2RDP-LE53-21)を用いることにより、異なる細胞周期で生じるDNA損傷を生きた状態で観察することが可能となった。本研究では、通常培養と3つのDNA損傷誘導薬剤を用いた場合においてライブセルイメージングを行い、細胞周期の違いにより損傷フォーカスがどのように誘導されるかを検証した。U2RDP-LE53-21は細胞周期依存的なDNA損傷の検出が可能であり、今後抗がん剤開発や放射線増感剤開発に役立つ可能性を示した。
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