研究課題
＜マウスでの発現＞旧来のpCPI/CTDMAおよびpCX/HLA-EをマウスにTGし、それぞれ4匹、2匹のlineを得た。内、2匹,1匹の発現を生後８週令でRT-PCRで解析した（膵臓での発現を1とした）。 *CTDM#1：腦（5.41）、心（0.19）、肺（1.17）、胸腺（0.30）、肝（0.06）、腎（0.13）、腸（0.39）、脾(1.61)、膵（1）*CTDM#2：心（2.45）、肺（7.29）、胸腺（9.25）、肝（0.03）、腎（0.71）、脾(14.25)、膵（1） *HLA-E：腦（2.75）、心（70.71）、肺（15.48）、胸腺（0.17）、肝（0.36）、腎（1.28）、腸（0.30）、脾(2.81)、筋（12.86）、膵（1）であった。 両方のpromoterで膵臓での発現を確かめたが、pCPIの方が相対的に高発現と考えられた 新規に遺伝子構築を作製した。* pCPI(pig insulin promoter + CMV enhancer)/NCTDM ： C1-INH - Thrombomodulin - DAF - MCP ---昨年のCTDMを改良した。さらに、NK細胞制御 pCAGGS/HLA-Ev(147)-2A-hβ2m <N-HLA-E>：IRESをやめ2Aで繋いだ。 ＜ブタでの発現＞NCTDMおよびHLA-Ev遺伝子両者ともに、1.25ng/μlでは2.5ng/μlに比してより高い胚盤胞形成率が得られる傾向であった。一方、胚盤胞の遺伝子導入効率については、両区に差は見られなかった。 胚移植試験には、発生率が高い傾向であった1.25ng/μlのDNA濃度を採用した。NCTDM遺伝子およびHLA-Ev遺伝子を導入した顕微授精胚、それぞれ 69個および79個を2頭のレシピエントブタに移植した。しかし、TG-ブタは得られなかった。
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