肺扁平上皮癌に対するＦＧＦＲ抑制ベクター遺伝子治療

2013 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 23659666
• 研究機関: 京都大学
• 研究代表者: 伊達 洋至 京都大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (60252962)
• 研究分担者: 黄 政龍 公益財団法人田附興風会, その他部局等, その他 (10271511) ; 園部 誠 京都大学, 医学(系)研究科(研究院), 講師 (00432378)
• キーワード: FGFR / shRNA / アデノウィルス / ベクター / 遺伝子治療

研究概要

in vitro及び in vivoの遺伝子治療実験を行った．まずFGFR2高発現癌細胞株に対して，FGFR2抑制ベクターによるin vitro遺伝子治療実験を行い、real-time RT-PCRによるFGFR遺伝子発現定量とWestern BlotによるFGFR蛋白発現定量によりノックダウン効率を評価した．そして，MTTアッセイによる腫瘍細胞障害性定量と，フローサイトメーターによる細胞周期解析により，FGFR2抑制ベクターの抗腫瘍効果を評価する．更に実験動物におけるin vivo遺伝子治療実験も精力的に行った．ヌードマウスに，FGFR2高発現癌細胞株または外科的切除腫瘍組織を移植し，担癌モデルの作製を作製し、ベクター投与法としては，まず腫瘍内への直接注入法を，次に気道内吸入法を検討した．real-time RT-PCRによる標的遺伝子発現の定量と免疫組織化学法とWestern Blotによる標的蛋白発現の定量により，FGFR2抑制ベクターのノックダウン効率の評価をした．そして，腫瘍体積の定時的測定，免疫組織化学法によるKi67増殖指数と血管新生の評価，TUNEL法によるアポトーシス評価などを行い，更に肺・肝臓への遠隔転移や生命予後の検討も行い，FGFR2抑制アデノウィルスベクターによる抗腫瘍効果を総合的に評価できた。．そして，ELISAによるサイトカイン発現定量で生化学的・免疫学的評価も行い，臨床応用可能なFGFR2抑制アデノウィルスベクターの開発を目指してゆく。

研究成果

• [雑誌論文] Snail expression is associated with a poor prognosis in malignant pleural mesotheliomas. (2013)
  • 著者名/発表者名: 309. Kobayashi M, Huang CL, Sonobe M, Kikuchi R, Ishikawa M, Imamura N, Kitamura J, Iwakiri S, Itoi K, Yasumizu R, Date H.
  • 雑誌名: Ann Thorac Surg 巻: 95 ページ: 1181-8
  • 査読あり
• [雑誌論文] The Japan-Multinational Traial Organization. Prognostic factors after complete resection of pN2 non-small cell lung cancer. (2013)
  • 著者名/発表者名: 319. Sonobe M, Date H, Wada H, Okubo K, Hamakawa H, Teramukai S, Matsumura A, Nakagawa T, Sumitomo S, Miyamoto Y, Okumura N, Takeo S, Kawakami K, Aoki M, Kosaka S
  • 雑誌名: J Thorac Cardiovasc Surg 巻: 146 ページ: 788-95
  • 査読あり