組換え体乳酸菌を用いた頭頸部進行・再発癌に対する遺伝子治療の開発と臨床応用

2013 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 23659791
• 研究機関: 東北大学
• 研究代表者: 浅田 行紀 東北大学, 医学(系)研究科(研究院), 非常勤講師 (70436103)
• 研究分担者: 志賀 清人 岩手医科大学, 医学部, 教授 (10187338)
• キーワード: 組換え体乳酸菌 / 遺伝子治療 / 頭頸部癌

研究概要

本研究は乳酸菌そのもの、あるいは乳酸菌をベクターとして用いた新しい進行癌の局所治療、全身療法を開発するのが目的であり、これは特に頭頸部癌の最大の特徴である視・触診可能な範囲にあるという点を最大限に利用して、進行癌に対する安全で強力な治療法の確立をめざすものである。
用いたのはヒト頭頸部扁平上皮癌の細胞株（SAS、HSC2、HSQ89、RPMI2650）で、ヌードマウス側背部皮下に移植した。腫瘍体積が目的の大きさに達したところで、腫瘍体積がほぼ均等になるように3-4匹ずつ3群に分け、乳酸菌組換え体（以下IL-2(+)菌）注入群、乳酸菌非組換え体（以下IL-2(-)菌）注入群、対照群とした。乳酸菌は5日間連続投与実験では1回あたり1.0×108cfuを注入し、対照群にはPBSを注入し、腫瘍の大きさを計時的に測定した。乳酸菌の培養はまずMRS寒天平板培地を用いて画線培養、その後の培養はアネロパウチ・ケンキと専用バウチ袋を用いて、嫌気下37℃で行った。
腫瘍抑制効果を認めたのはHSC2、SASの2株でHSC2ではIL-2(+)菌、IL-2(-)菌の両者で、SASではIL-2(+)菌で有意に腫瘍抑制効果を認めた。この結果は複数の実験で確かめられた。HSC2ではIL-2(+)菌注入群で22日目に腫瘍が消失した個体を認めた。腫瘍抑制効果の得られた乳酸菌および組換え体乳酸菌局所注入ヌードマウスの血清中でTNFα、IL12などのインターロイキンが大幅に増加していることが明らかとなり、Th1型の免疫誘導を行うことが予想された。今後、これらの腫瘍免疫が誘導される物質の同定を検討する。
短期実験についで長期実験を行ったが、IL-2(+)菌で腫瘍抑制効果を認めたものの、生存率では有意差を認めなかった。これは長期になると腫瘍の大きさそのものより、歩行ができるかどうかなどの要因が関与してくるためと思われた。

研究成果

• [雑誌論文] Matched-pair analysis in patients with advanced oropharyngeal cancer: surgery versus concurrent chemoradiotherapy. (2013)
  • 著者名/発表者名: Kano S, Homma A, Hayashi R, Kawabata K, Yoshino K, Iwae S, Hasegawa Y, Nibu K, Kato T, Shiga K, Matsuura K, Monden N, Fujii M.
  • 雑誌名: Oncology 巻: 84 ページ: 290-298
  • DOI: 10.1159/000346908
  • 査読あり
• [雑誌論文] Bach1 is critical for the transformation of mouse embryonic fibroblasts by Ras(V12) and maintains ERK signaling. (2013)
  • 著者名/発表者名: Nakanome A, Brydun A, Matsumoto M, Ota K, Funayama R, Nakayama K, Ono M, Shiga K, Kobayashi T, Igarashi K.
  • 雑誌名: Oncogene 巻: 32 ページ: 3231-3245
  • DOI: 10.1038/onc.2012.336
  • 査読あり