涙液中アミノ酸発現が眼表面疾患の病態に及ぼす影響

2012 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 23659818
• 研究機関: 京都府立医科大学
• 研究代表者: 外園 千恵 京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 講師 (30216585)
• 研究分担者: 奥村 直毅 同志社大学, 公私立大学の部局等, 助教 (10581499)
• キーワード: アミノ酸 / 角膜 / 上皮細胞 / タイトジャンクション / 涙液

研究概要

SV40不死化ヒト培養角膜上皮細胞を用いて、アミノ酸がタイトジャンクションに及ぼす影響を検討した。具体的には、ヒト培養角膜上皮細胞をコンフルエントになるまで培養し、20種のアミノ酸を含むFULL培地、アミノ酸を全て抜いたZERO培地、FULL培地より特定のアミノ酸のみを欠損させた欠損培地、ZERO培地に特定のアミノ酸（各10mM）を添加した添加培地に交換して、継時的に電気抵抗値 (Ω・cm２)を測定した。完全培地は対照培地に比べて経時的に電気抵抗が高くなり、アミノ酸含有が細胞間接着を高めていると推測された。検討したアミノ酸20種のなかではArg欠損培地において電気抵抗値の低下が著明であり、Glu欠損培地、Asn欠損培地においても電気抵抗値が低下した。添加培地では、Asn添加培地、Glu添加培地、Ala添加培地、Arg添加培地においてほぼ同等の電気抵抗値の促進効果を認めた。
以上の結果は昨年に実施したヒト培養角膜上皮細胞の増殖性の検討、in vitroでの創傷治癒の検討結果と整合性が合い、Arg、Glu、Asn、Alaがヒト角膜上皮の健常性維持あるいは創傷治癒に関与ている可能性が高いと考えられた。
そこでArg/Gln　40mM、Ala/Asn/Gln　40mMを含有する人工涙液を用いて、健常者およびドライアイ患者での自覚症状、他覚所見の変化を検討した。いずれの配合も健常者への頻回点眼で異常所見を生じず、ドライアイ患者では自覚症状が改善もしくは不変、他覚所見は軽度改善もしくは不変であった。このことより、アミノ酸配合が新たな人工涙液となりうる可能性が示唆された。

研究成果

• [雑誌論文] Visual Improvement after Cultivated Oral Mucosal Epithelial Transplantation (2013)
  • 著者名/発表者名: Sotozono C, Inatomi T, Nakamura T, Koizumi N, Yokoi N, Ueta,M, Matsuyama K, Miyakoda K, Kaneda H, Fukushima M, Kinoshita S
  • 雑誌名: Ophthalmol 巻: 120(1) ページ: 193-200
  • DOI: DOI:10.1016/j.ophtha.2012.07.053
  • 査読あり
• [雑誌論文] The ROCK Inhibitor Eye Drop Accelerates Corneal Endothelium Wound Healing. (2013)
  • 著者名/発表者名: Okumura N, Koizumi N, Kay EP, Ueno M, Sakamoto Y, Nakamura S, Hamuro J, Kinoshita S
  • 雑誌名: Invest Ophthalmol Vis Sci 巻: 54(4) ページ: 2493-2502
  • DOI: DOI:10.1167/iovs.12-11320
  • 査読あり
• [雑誌論文] Inhibition of TGF-β signaling enables human corneal endothelial cell expansion in vitro for use in regenerative medicine. (2013)
  • 著者名/発表者名: Okumura N, Kay EP, Nakahara M, Hamuro J, Kinoshita S, Koizumi N
  • 雑誌名: PLoS ONE 巻: 8(2) ページ: e58000
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0058000
  • 査読あり
• [雑誌論文] Epistatic interaction between Toll-like receptor 3 (TLR3) and prostaglandin E receptor 3 (PTGER3) genes. (2012)
  • 著者名/発表者名: Ueta M, Tamiya G, Tokunaga K, Sotozono C, Ueki M, Sawai H, Inatomi T, Matsuoka T, Akira S, Narumiya S, Tashiro K, Kinoshita S
  • 雑誌名: Epistatic interaction between Toll-like receptor 3 (TLR3) and prostaglandin E receptor 3 (PTGER3) genes. 巻: 129(5) ページ: 1413-1416.e11
  • DOI: DOI:10.1016/j.jaci.2012.01.069
  • 査読あり
• [雑誌論文] Development of new therapeutic modalities for corneal endothelial disease focused on the proliferation of corneal endothelial cells using animal models (2012)
  • 著者名/発表者名: Koizumi N, Okumura N, Kinoshita S
  • 雑誌名: Exp Eye Res 巻: 95(1) ページ: 60-67
  • DOI: DOI:10.1016/j.exer.2011.10.014
  • 査読あり
• [雑誌論文] Expression of prostaglandin E receptor subtype EP4 in conjunctival epithelium of patients with ocular surface disorders: case-control study. (2012)
  • 著者名/発表者名: Ueta M, Sotozono C, Yamada K, Yokoi N, Inatomi T, Kinoshita S
  • 雑誌名: BMJ Open 巻: 2(5) ページ: e001330
  • DOI: 10.1136/bmjopen-2012-001330
  • 査読あり
• [雑誌論文] Prostaglandin E2 Suppresses Poly I: C-Stimulated Cytokine Production Via EP2 and EP3 in Immortalized Human Corneal Epithelial Cells. (2012)
  • 著者名/発表者名: Ueta M, Matsuoka T, Sotozono C, Kinoshita S
  • 雑誌名: Cornea 巻: 31(11) ページ: 1294-1298
  • DOI: 10.1097/ICO.0b013e318242fd7c
  • 査読あり
• [雑誌論文] Downregulation of monocyte chemoattractant protein 1 expression by prostaglandin e2 in human ocular surface epithelium. (2012)
  • 著者名/発表者名: Ueta M, Sotozono C, Yokoi N, Kinoshita S
  • 雑誌名: Arch Ophthalmol 巻: 130(2) ページ: 249-251
  • DOI: 10.1001/archopthalmol.2011.1472
  • 査読あり
• [雑誌論文] The relation between visual performance and clinical ocular manifestations in stevens-johnson syndrome. (2012)
  • 著者名/発表者名: Kaido M, Yamada M, Sotozono C, Kinoshita S, 他5名
  • 雑誌名: Am J Ophthalmol 巻: 154(3) ページ: 499-511
  • DOI: 10.1016/j.ajo.2012.03.044
  • 査読あり
• [雑誌論文] A selective inhibitor of the Rho kinase pathway, Y-27632, and its influence on wound healing in the corneal stroma. (2012)
  • 著者名/発表者名: Yamamoto M, Quantock AJ, Young RD, Okumura N, Ueno M, Sakamoto Y,Kinoshita S,Koizumi N
  • 雑誌名: Mol Vis 巻: 18 ページ: 1727-1739
  • 査読あり
• [雑誌論文] A ROCK inhibitor converts corneal endothelial cells into a phenotype capable of regenerating in vivo endothelial tissue. (2012)
  • 著者名/発表者名: Okumura N, Koizumi N, Ueno M, et al
  • 雑誌名: Am J Pathol 巻: 181(7) ページ: 268-277
  • DOI: 10.1016/j.ajpath.2012.03.033
  • 査読あり
• [学会発表] Etiologic Features of Stevens-Johnson syndrome (SJS) and Toxic Epidermal Necrolysis (TEN) with Ocular Involvement. (2012)
  • 著者名/発表者名: Sotozono C, Ueta M, Kinoshita S, Kitami A, Iijima M, Aihara M, Ikezawa Z, Kano Y, Shiohara T, Shirakata Y, Sakabayashi S, Matsubara Y, Hashimoto K
  • 学会等名: Annual Meeting of the American Academy of Ophthalmology
  • 発表場所: Chicago, USA
  • 年月日: 20121111-20121111