WT1ナチュラルアンチセンスRNAの発現と破骨細胞分化制御:骨破壊制御の新戦略

2011 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 23659860
• 研究種目: 挑戦的萌芽研究
• 配分区分: 基金
• 研究分野: 形態系基礎歯科学
• 研究機関: 九州大学
• 研究代表者: 久木田 敏夫 九州大学, 歯学研究院, 教授 (70150464)
• 研究分担者: 久木田 明子 (30153266)
• 研究期間 (年度): 2011
• キーワード: 口腔解剖学(含組織学・発生学)

研究概要

WT1は小児腎癌Wilms'腫瘍に於ける癌抑制遺伝子の産物として発見されたZinc finger型転写因子であり、マクロファージ分化能を有することが分かっているが、破骨細胞分化における働きは不明であった。新生仔下顎骨のパラフィン切片を用いたRNA in situ hybridization法により、破骨細胞がWT1アンチセンスRNAを高発現することを見出した。ノーザンブロット法及びアンチセンス特異的rtPCR法を用いることにより新生仔下顎骨でWT1アンチセンスRNAが豊富に発現していることを確認した。RAW-D細胞を用いた破骨細胞分化系におけるWT1蛋白質の発現を経時的に解析したところ、未分化な段階で発現されるWT1の発現が破骨細胞分化に伴って著しく抑制されることが分かった。更にWT1-アンチセンスRNA発現ベクターをRAW-D細胞に導入しWT1の発現をノックダウンすると破骨細胞の形成が顕著に促進されることが分かった。これらの結果よりWT1蛋白質が破骨細胞分化の発現を制御する機能を持つことが示唆され、分化に伴うWT1の発現抑止に特異的アンチセンスRNAの発現が関与する可能性が強く示唆された。

研究成果

• [雑誌論文] The Transcription Factor FBI-1/OCZF/LRF Is Expressed in Osteoclasts and Regulates RANKL-Induced Osteoclast Formation In Vitro and In Vivo (2011)
  • 著者名/発表者名: KukitaA., Kukita T., Nagata K., Teramachi J., Li Y-J., Yoshida H., Miyamoto H., Gay S., Pessler F., Shobuike T.
  • 雑誌名: Arth Rheumatism 巻: 63(9) ページ: 2744-2754
• [雑誌論文] Adenosine abolishes MTX-induced suppression of osteoclastogenesis and inflammatory bone destruction in adjuvant-induced arthritis (2011)
  • 著者名/発表者名: Teramachi J., Kukita A., Li Y-J., Ushijima Y., OhkumaY., Wada N., Watanabe T., Nakamura S., Kukita T.
  • 雑誌名: Lab. Invest 巻: 91 ページ: 719-731
• [雑誌論文] Infection of RANKL-primed RAW-D macrophages with Porphyromonas gingivalis promotes osteoclastogenesis in a TNF-α-independent manner
  • 著者名/発表者名: Kukita A., Ichigi Y., Takigawa I., Watanabe T., Kukita T., Miyamoto H
  • 雑誌名: PLoS ONE 巻: in press
• [学会発表] WT1アンチセンスRNAの成熟破骨細胞に於ける高発現と分化制御機能 (2012)
  • 著者名/発表者名: 李銀姫、久木田明子、久木田敏夫
  • 学会等名: 第117回日本解剖学会
  • 発表場所: 山梨
  • 年月日: 20120300
• [学会発表] 間葉系幹細胞による炎症性骨破壊制御 (2011)
  • 著者名/発表者名: 高野登志夫、李銀姫、久木田明子、山座孝義、高橋明、鮎川保則、古谷野潔、久木田敏夫
  • 学会等名: 第53回歯科基礎医学会
  • 発表場所: 岐阜
  • 年月日: 20110900
• [学会発表] 膜ナノチューブによる前破骨細胞融合制御 (2011)
  • 著者名/発表者名: 高橋良、久木田明子、李銀姫、鮎川保則、古谷野潔、久木田敏夫
  • 学会等名: 第53回歯科基礎医学会
  • 発表場所: 岐阜
  • 年月日: 20110900
• [学会発表] ヒト過剰歯由来幹細胞の免疫細胞療法効果について (2011)
  • 著者名/発表者名: 牧野友祐、山座孝義、山座治義、馬蘭、益田啓太郎、園田総一朗、城戸瑞穂、野中和明、寺田善博、久木田敏夫
  • 学会等名: 第53回歯科基礎医学会
  • 発表場所: 岐阜
  • 年月日: 20110900
• [学会発表] 乳歯凍結保存法がヒト乳歯由来幹細胞の免疫調節能に与える影響について (2011)
  • 著者名/発表者名: 山座孝義、牧野友祐、山座治義、馬蘭、園田総一朗、益田啓太郎、野中和明、寺田善博、久木田敏夫
  • 学会等名: 第53回歯科基礎医学会
  • 発表場所: 岐阜
  • 年月日: 20110900
• [学会発表] Mesenchyme stem cells markedly suppressed inflammatory bone destruction in rats with adjuvant-induced arthritis. (2011)
  • 著者名/発表者名: Toshio Takano, Yin-ji Li, Akiko Kukita, Takayoshi Yamaza, Yasunori Ayukawa, Kiyoshi Koyano, Toshio Kukita
  • 学会等名: American Society for Bone and Mineral Research(ASBMR) Annual Meeting
  • 発表場所: SanDiego, USA
  • 年月日: 20110900
• [学会発表] Involement and regulatory role of membrane nanotubes in fusion of osteoclast precursors : A possible migration and penetration of DC-STAMP protein into osteoclast precursors through intercellular bridges (2011)
  • 著者名/発表者名: Akira Takahashi, Akiko Kukita, Yin-ji Li, Hisayuki Nomiyama, Yasunori Ayukawa, Kiyoshi Koyano, Toshio Kukita
  • 学会等名: American Society for Bone and Mineral Research(ASBMR) Annual Meeting
  • 発表場所: SanDiego, USA
  • 年月日: 20110900
• [学会発表] Nordihydroguaiaretic Acidは破骨細胞分化とラットアジュバント関節炎における骨破壊を抑制する (2011)
  • 著者名/発表者名: 李銀姫、久木田明子、屈鵬飛、高野登志夫,實松敬介、二ノ宮祐三、久木田敏夫
  • 学会等名: 第29回日本骨代謝学会
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 20110700
• [学会発表] 間葉系幹細胞による骨破壊制御:アジュバント関節炎ラットを用いた解析 (2011)
  • 著者名/発表者名: 高野登志夫、李銀姫、久木田明子、山座孝義、鮎川保典小谷野潔、久木田敏夫
  • 学会等名: 第29回日本骨代謝学会
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 20110700