| 研究概要 |
本研究は，組織前駆細胞から未分化組織幹細胞を作製する，全く新しい“リプログラミング”法の開発を目的とし，以下の計画を立てた．①リプログラミング候補因子の一次スクリーニング ②リプログラミング候補因子の二次スクリーニング ③同定した因子のリプログラミング能力の詳細な検討
昨年度,未分化組織幹細胞活性を示すSP細胞をHoechst 33342による核染色後，FACS ariaを用い分離し,no cording RNAの一つであるmicro-RNAが組織の発生や分化を制御しているとの報告から，micro-RNAアレイにて網羅的に解析した.その結果, 未分化維持に関与しているであろうmiRNAが幾つか抽出された.今年度は昨年度絞り込んだmicro-RNAの二次スクリーニングを定量性RT-PCR法にて詳細に検討した.さらに,in sillico analysisにて一次スクリーニングにて抽出されたmicro-RNAに関連した遺伝子を詳細に解析した.その結果,あるmicro-RNAが組織前駆細胞の未分化維持に関わっている可能性が示唆された.現在,そのmicro-RNAに関してノックイン・ノックダウンを行い，未分化維持に関与しているかをフローサイトメーターを用いた細胞膜表面抗原動態,細胞増殖能,細胞遊走能,およびコロニー形成能などを指標に詳細に解析を行なっており,大変期待できる結果を得ている.
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