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2012 年度 実績報告書

細胞形態の画像解析による骨髄間質細胞の新たな品質管理システムの構築

研究課題

研究課題/領域番号 23659912
研究機関松本歯科大学

研究代表者

各務 秀明  松本歯科大学, 歯学部, 教授 (80242866)

研究分担者 加藤 竜司  名古屋大学, 創薬科学研究科, 准教授 (50377884)
キーワード再生歯学 / 凍結保存
研究概要

再生医療の実用化には、治療効果のみでなく目的とする細胞が培養されたかどうか、あるいは治療効果を持つ細胞へと分化させたことの確認など細胞の品質管理が重要となる。しかしながら、品質管理を中心とした実用化支援技術の開発は遅れている.培養細胞の品質管理には、通常サンプリングによる破壊的検査が行われるが、本来は移植される細胞に対する非侵襲的な評価方法の開発が望まれる。これまでの研究から、細胞の形態は種類によって異なり、また分化誘導によって変化することが示唆されている。熟練者は経験的に細胞の形態から状態を判断しているが、明確な数値基準などは示されていない。本研究の目的は、細胞の画像と最新の画像解析技術を応用することにより、細胞の種類や分化度を評価する新たな品質管理システムを開発することである。初めに、最新の細胞画像解析技術を用いて分化誘導中の細胞画像から増殖曲線、細胞面積、外部刺激に対する細胞面積変化、回転運動等の細胞特徴量とその経時的変化を記録した。これらの評価を生化学的、分子生物学的機能的評価の結果と対比させることで、培養細胞の分化度や機能異常を検知する細胞診断の基準を決定し、細胞診断ソフトウエアを開発した。次に、この非侵襲的細胞診断技術を用いて、実際の臨床研究における品質管理に用いて、その有用性を検証した。骨分化は複雑な現象であり、当初限られたパラメーターのみで正確な予測は困難であった。しかしながら、ridge regression modelを用いることにより、未知サンプルのALP活性を、画像情報のみから20%未満の誤差で予測できることが示された。本研究により、実際の臨床においても細胞画像のみから骨分化度を推測することは可能と考えられた。

  • 研究成果

    (7件)

すべて 2013 2012 その他

すべて 雑誌論文 (4件) (うち査読あり 4件) 学会発表 (3件) (うち招待講演 2件)

  • [雑誌論文] Morphology-based prediction of osteogenic differentiation potential of human mesenchymal stem cells.2013

    • 著者名/発表者名
      Matsuoka F
    • 雑誌名

      Plos One

      巻: 8 ページ: e55082

    • DOI

      10.1371/journal.pone.0055082.

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Ischemic culture of dental pulp-derived cells is a useful model in which to investigate mechanisms of post-ischemic tissue recovery.2013

    • 著者名/発表者名
      Agata H.
    • 雑誌名

      Histol Histopathol

      巻: 6 ページ: 未定

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Effect of GDF-5 and BMP-2 on the expression of tendo/ligamentogenesis-related markers in human PDL-derived cells.2012

    • 著者名/発表者名
      Inoue M, Ebisawa K, Itaya T, Sugito T, Yamawaki-Ogata A, Sumita Y, Wadagaki R, Narita Y, Agata H, Kagami H, Ueda M.
    • 雑誌名

      Oral Dis

      巻: 18 ページ: 206-212

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Characteristic differences among osteogenic cell populations of rat bone marrow stromal cells isolated from untreated, hemolyzed or Ficoll-treated marrow.2012

    • 著者名/発表者名
      Agata H et al.
    • 雑誌名

      Cytotherapy

      巻: 14 ページ: 791-801

    • DOI

      10.3109/14653249.2012.674639.

    • 査読あり
  • [学会発表] Bone marrow stromal cells (bone marrow-derived multipotent mesenchymal stromal cells) for alveolar

    • 著者名/発表者名
      Kagami H.
    • 学会等名
      The 16th US-Japan Cellular and Gene Therapy Conference
    • 発表場所
      NIH, Bethesda, MD, USA
    • 招待講演
  • [学会発表] 歯槽骨・唾液腺の再生研究今後の展開

    • 著者名/発表者名
      各務秀明他
    • 学会等名
      第12回日本再生医療学会総会
    • 発表場所
      パシフィコ横浜、横浜市
    • 招待講演
  • [学会発表] 骨再生医療の現状と展望について

    • 著者名/発表者名
      各務秀明
    • 学会等名
      第57回日本口腔外科学会総会・学術大会
    • 発表場所
      パシフィコ横浜、横浜市

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公開日: 2014-07-24  

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