研究課題
本年度は定量的な評価をした．下顎骨の片側を区域切除し，形成した骨片に液体窒素凍結処理を施し，それに①細胞なし，②骨髄単核細胞，③培養骨髄間質細胞のそれぞれを組み込んだうえで再植し，その後の治癒過程をＸ線学的，組織学的に評価した．組み込む細胞の種類，数，分化度，適用方法を変数にした条件を設定し，組み込み処理についての至適条件を，さらにその条件の組み合わせにより最適条件を求めた．具体的な実験概要は以下の通りである．１．実験動物：ラットを用いた．２．細胞培養：骨髄液を採取し，骨髄間質細胞を分離，培養し増殖させた．培養過程で細胞を蛍光標識した．３．手術および骨片等処理：術中に以下の（１）から（５）まで進めた．（１）下顎骨部分切除：下顎片側だけ下顎骨角部から骨膜を含めて部分切除をした．（２）骨片の液体窒素凍結処理：ヘパリン加生食水で洗浄し骨膜を除去した骨片に，凍結時の破折防止のため1mm間隔で皮質骨を穿孔した．骨片を液体窒素中に10分間浸漬した後に5分間の室温放置，5分間の生食水中浸漬をした．（３）骨髄単核細胞分離：骨髄液をから，percoll密度勾配遠心法により単核細胞分画を調製した．細胞は蛍光標識をした．（４）組み込み処理とその条件設定：骨片の穿孔部から次の一定量を注入した．対照群①細胞なし（リン酸緩衝液），実験群②骨髄単核細胞，③骨髄間質細胞とした．（５）再植：骨片を復位し固定し顎下部を閉創した．４．評価：術後２，４，８週でＸ線学的および組織学的に骨片とその周囲を観察した．蛍光顕微鏡像を画像解析し，それぞれから骨微細構造と細胞の動態を把握し，結果を評価した．形成した骨片に液体窒素凍結処理を施し，組み込む細胞の種類，数，分化度，適用方法を変数にした条件を設定し，組み込み処理についての至適条件を，さらにその条件の組み合わせにより最適条件を求めた．
2: おおむね順調に進展している
研究計画に無理がなく，その内容が妥当であったためであると考える．
平成２３，２４年度に得られた結果を基にして，臨床への応用および展開を視野に入れて検討する．骨片に骨膜付きの条件も設定し，生着に及ぼす影響を調べる．さらに骨以外に筋や神経，血管についても同様の試みを検討する．それらは単体のみならず，骨を中心に複合した状態も想定する．
該当なし．
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