研究課題
本年度は培養上清の応用を検討項目に加えた．骨を区域切除し，形成した骨片に液体窒素凍結処理を施し，それに①細胞なし，②培養骨髄間質細胞，③その培養上清のそれぞれを組み込んだうえで再植し，その後の治癒過程をＸ線学的，組織学的に評価した．組み込む細胞の種類，数，分化度，適用方法を変数にした条件を設定し，組み込み処理についての至適条件を，さらにその条件の組み合わせにより最適条件を求めた．実験概要は以下の通りである．実験動物はラットを用いた．細胞培養は骨髄液を採取し，骨髄間質細胞を分離，培養し増殖させた．培養過程で細胞を蛍光標識した．手術および骨片等処理は術中に以下の（１）から（５）まで進めた．（１）下顎骨部分切除：下顎片側だけ下顎骨角部から骨膜を含めて部分切除をした．（２）骨片の液体窒素凍結処理：ヘパリン加生食水で洗浄し骨膜を除去した骨片に，凍結時の破折防止のため1mm間隔で皮質骨を穿孔した．骨片を液体窒素中に10分間浸漬した後に5分間の室温放置，5分間の生食水中浸漬をした．（３）培養上清調製：培養に用いた無血清培地を遠心分離することにより上清を得た．（４）組み込み処理とその条件設定：骨片の穿孔部から次の一定量を注入した．対照群①細胞なし（リン酸緩衝液），実験群②骨髄間質細胞，③培養上清とした．（５）再植：骨片を復位し固定し顎下部を閉創した．評価は術後２，４，８週でＸ線学的および組織学的に骨片とその周囲を観察した．蛍光顕微鏡像を画像解析し，それぞれから骨微細構造と細胞の動態を把握し，結果を評価した．形成した骨片に液体窒素凍結処理を施し，組み込む細胞の種類，数，分化度，適用方法を変数にした条件を設定し，組み込み処理についての至適条件を，さらにその条件の組み合わせにより最適条件を求めた．
すべて 2014 2013
すべて 雑誌論文 (5件) (うち査読あり 5件) 学会発表 (5件) (うち招待講演 1件) 図書 (1件)
International Journal of Oral & Maxillofacial Implants
巻: 28(6) ページ: e386-e392
10.11607/jomi.te19
巻: 28(5) ページ: 1360-1369
10.11607/jomi.2799
巻: 28(5) ページ: e252-e259
10.11607/jomi.te05
Journal of Oral and Maxillofacial Surgery, Medicine, and Pathology
巻: 25 ページ: 276-287
10.1016/j.ajoms.2012.10.002
巻: 28 ページ: e283-e289
10.11607/jomi.te09
