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2013 年度 研究成果報告書

細胞内における化学的翻訳後修飾導入技術の開発

研究課題

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研究課題/領域番号 23685038
研究種目

若手研究(A)

配分区分補助金
研究分野 生体関連化学
研究機関長岡技術科学大学

研究代表者

築地 真也  長岡技術科学大学, 産学融合トップランナーセンター, 特任准教授 (40359659)

研究協力者 浜地 格  京都大学, 大学院工学研究科合成生物化学 専攻, 教授 (90202259)
田村 朋則  京都大学, 大学院工学研究科合成生物化学 専攻, 大学院生
石田 学  長岡技術科学大学, 産学融合トップランナー養成センター, 博士研究員
菊地 環  長岡技術科学大学, 生物系, 大学院生
研究期間 (年度) 2011-11-18 – 2014-03-31
キーワード蛋白質ラベリング / アフィニティラベリング / 蛍光イメージング / 部位特異的変異法
研究概要

本研究では、我々が独自に考案・開発した「リガンド指向型トシル(LDT)化学」を発展させ、生細胞内の特定の蛋白質にさまざまな合成プローブや翻訳後修飾を導入するための化学ラベリング技術基盤を構築することを目的とした。具体的にはまず、LDT化学の蛍光イメージングへの応用に挑戦し、LDT化学が細胞内在性蛋白質への蛍光色素修飾とその相互作用の生細胞内蛍光可視化に適用できることを実証した。本研究では更に、LDT化学と遺伝子工学を融合したアプローチを展開し、対象蛋白質へのCys変異導入によって高速・高効率な蛋白質ラベリングが実現できることを実証した。

  • 研究成果

    (8件)

すべて 2013 2012 2011

すべて 雑誌論文 (3件) (うち査読あり 3件) 学会発表 (5件)

  • [雑誌論文] Fluorophore labeling of native FKBP12 by ligand-directed tosyl chemistry allows detection of its molecular interactions in vitro and in living cells2013

    • 著者名/発表者名
      T. Tamura, Y. Kioi, T. Miki, S. Tsukiji, I. Hamachi
    • 雑誌名

      J. Am. Chem. Soc

      巻: 135 ページ: 6782–6785

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Native FKBP12 engineering by ligand-directed tosyl chemistry : labeling properties and application to photo-cross-linking of protein complexes in vitro and in living cells2012

    • 著者名/発表者名
      T. Tamura, S. Tsukiji, I. Hamachi
    • 雑誌名

      J. Am. Chem. Soc

      巻: 134 ページ: 2216–2226

    • 査読あり
  • [雑誌論文] 細胞内在性タンパク質の選択的化学修飾とエンジニアリング2011

    • 著者名/発表者名
      築地真也, 石田学, 浜地格
    • 雑誌名

      生化学

      巻: 83 ページ: 746–751

    • 査読あり
  • [学会発表] リガンド分子細工による新しいケミカルバイオロジー方法論の開拓2013

    • 著者名/発表者名
      築地真也
    • 学会等名
      日本化学会第93春季年会
    • 発表場所
      立命館大学びわこ・くさつキャンパス,滋賀県 (若い世代の特別講演会)
    • 年月日
      20130322-25
  • [学会発表] LDT化学による細胞内FKBP12への光反応基導入と蛋白質間相互作用検出2012

    • 著者名/発表者名
      田村朋則, 築地真也, 浜地格
    • 学会等名
      第24回生体機能関連化学部会若手の会サマースクール
    • 発表場所
      休暇村志賀島,福岡県 (ポスター発表)
    • 年月日
      20120727-28
  • [学会発表] LDT化学による細胞内蛋白質間相互作用の光クロスリンク検出2012

    • 著者名/発表者名
      田村朋則, 築地真也, 浜地格
    • 学会等名
      日本ケミカルバイオロジー学会第7回年会
    • 発表場所
      京都大学百周年時計台記念館百周年記念ホール,京都府 (ポスター発表)
    • 年月日
      20120607-09
  • [学会発表] LDT化学による蛋白質工学(1):細胞内蛋白質間相互作用検出への展開2012

    • 著者名/発表者名
      田村朋則, 築地真也, 浜地格
    • 学会等名
      日本化学会第92春季年会
    • 発表場所
      慶應義塾大学日吉・矢上キャンパス,神奈川県 (口頭発表)
    • 年月日
      20120325-28
  • [学会発表] LDT化学を用いて光反応基を導入したFKBP12による細胞内蛋白質相互作用検出2011

    • 著者名/発表者名
      田村朋則, 築地真也, 浜地格
    • 学会等名
      第5回バイオ関連化学シンポジウム
    • 発表場所
      つくば国際会議場「エポカルつくば」,茨城県 (ポスター発表)
    • 年月日
      20110912-14

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公開日: 2015-07-16  

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