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メダカMT2-MMPは、排卵直前に誘導され、卵母細胞を包む濾胞細胞層の分解に関与する排卵実行酵素の一つである。本研究は、この酵素の発現誘導メカニズムの解明を目指して実施された。これまでの解析から、MT2-MMPの誘導には核内プロゲスチン受容体nPRが関与すること、nPRはLHにより誘導されることが明らかとなっており、また、nPR誘導に関わる因子として数種類の候補因子が突き止められていた。今年度は、これらの因子がnPR発現誘導に関与するかどうかについて解析を行った。また、阻害剤を用いた培養実験やChIP解析の結果から、nPRを誘導する転写因子としてCREBが関与することを突き止め、nPR誘導メカニズムの全体像を明らかにすることができた。一方、MT2-MMPはnPRと1つもしくは複数種類の因子が複合体を形成することにより発現誘導されることが判明していたが、今回の解析によりnPRと相互作用する因子の1つが同定され、この因子もまた、nPRにより誘導される可能性が高いことがリコンビナントLHを用いた誘導実験やChIP解析の結果から明らかとなった。しかしながら、Luciferase assayの解析結果から、今回発見した相互作用因子とnPRのみではMT2-MMPを誘導できないことが明らかとなり、他の相互作用因子の存在も示唆された。以上の結果より、nPRによるMT2-MMP誘導メカニズムの詳細についても明らかとなり、LHによるMT2-MMP誘導に関する一連の誘導メカニズムの全体像をほぼ明らにすることができた。
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