研究実績の概要 |
平成25年度までの研究で、ショウジョウバエ嗅覚系投射神経PNの樹状突起ターゲティングにおけるEphrin/Ephシグナルの役割解明を試みた。その結果、Ephrin/Ephシグナルが「特定の」PN樹状突起ターゲティングを制御する事を見出した。特に、雌雄行動を司る性フェロモンの感知に重要な糸球体DA1への樹状突起ターゲティングにEphrin/Ephシグナルが必須であることを見出した。次に内在性Eph/Ephrinが「いつ」「どこで」発現しているかを調べる目的で抗体等を作成したが、内在性Ephrin/Ephを検知できる抗体は作出できなかった。よって本年度は、ゲノム編集技術CRISPR/Cas9システムを活用し、内在のEph、Ephrinタンパク質へのMycタグ融合を試みた。報告されている様々なCRISPR/Cas9法を駆使し、Eph-Myc, Ephrin-Myc系統を作出することに成功した。その後、それぞれの系統を用いて発現解析を行った結果、予想通りEph-MycはDA1糸球体に特異的に発現していた。一方、Ephrinは脳全体に弱く均一に発現していた。EphとEphrinはそれぞれ相互作用するが、Ephのみ特異的な発現を有することでEphrin/Ephシグナルの時空間特異的な活性を生み出すことができる。今後はこれら結果をまとめ、論文として報告する予定である。
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