| 研究概要 |
23年度はコオロギの初期胚発生における位置情報に関係する因子を特定することを目指しRNAi解析による位置情報関連遺伝子のスクリーニング、および異所性発現系の構築のための実験を行った。特に、主要なシグナル経路であるNotch,Wnt,BMPシグナル経路等に関わる因子の働きをRNAiにより解析した。GFP発現トランスジェニックコオロギの系統を用いたライブイメージングにより、細胞移動を伴う胚原基形成過程でWntとBMPシグナルが重要な役割を果たしていることを示す結果を得た。初期のシグナル因子の働きで、OtdやCaudalが特定の位置に発現し、さらに下流のギャップ遺伝子の発現を誘導することで胚の領域特異化が起こると考えられる。一方、ショウジョウバエのギャップ遺伝子giantやknirpsのオーソログをトランスクリプトームのデータより見いだし、これらが胚の後部で発現することを示す結果を得た。さらに詳細な発現と機能の解析を行う予定である。異所性発現系についてはUAS/GAL4のシステムの構築には至らなかったが、人工制限酵素ZFNに加えて新たにTALENを用いた遺伝子ノックアウトの系を確立することに成功した。これによりターゲット配列の幅が格段に広がり、異所性発現実験を含めた様々な応用の可能性が広がった。
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