重合性フラボノイドの1種でアルミニウム(Al)と結合活性を有するプロアントシアニジン(PA)の木本植物根における防御的役割が示唆されているが、この物質の存在部位や放出特性はAlの毒性発現部位とよく対応していない点が疑問として残されている。本年度では、Al応答時における細胞小器官でのPA重合とその動態を理解するため、根からシート状に剥離するボーダー様細胞に着目して組織化学的解析を行った。また細胞内PAとAlとの関連性を細胞学的に調査するため、Al耐性の異なる樹木種根からプロトプラストを調製した。蛍光観察から、Alのシンプラスト流入は死細胞のみで、Al由来蛍光はアポプラストにほぼ限定された。プロトプラスト系でも細胞質内AlとPAの存在部位は一致せず、中央液胞への隔離もなかったことから、マンギウムの高Al耐性はAlとPAの直接結合による細胞内無毒化にほぼ依拠しないことがわかった。Al耐性の異なるPA集積性樹木種の根端からプロトプラストを調製し、トルイジンブルー染色から細胞内PA分布を調べた結果、高Al耐性種では最大の中央液胞以外の複数の小胞に局在すること、Al中耐性種や感受性種では中央液胞や、単一小胞に集中して局在する傾向が認められた。今後、エンドサイトーシスの動態を解析することで、PA胞体が細胞内外のベシクル輸送に含まれるか検討する必要性が明らかになった。
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