臨床検査への応用を目的としたオートファジー活性測定法の開発

2013 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 23689032
• 研究種目: 若手研究(A)
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 病態検査学
• 研究機関: 新潟大学 (2012-2013); 九州大学 (2011)
• 研究代表者: 神吉 智丈 新潟大学, 医歯学系, 教授 (50398088)
• 研究期間 (年度): 2011-04-01 – 2014-03-31
• キーワード: 臨床検査医学 / オートファジー

研究概要

オートファジーは、細胞内に蓄積した不要物質を分解することで細胞内の恒常性を維持する機構であり、その機能低下は様々な疾患に関連すると考えられている。しかしながら、オートファジー活性を測定できる臨床検査は存在しない。本研究では、オートファジー活性を測定する為に、pH依存的に励起波長が変化する蛍光タンパク質Keimaを発現させた培養細胞（Keima細胞）を作成し、それらの細胞を利用して細胞内で起こったオートファジーを蛍光顕微鏡により観察する実験を行った。Keima細胞を用いることで、高感度かつ半定量的にオートファジーを観察できた。

研究成果

• [雑誌論文] Casein kinase 2 is essential for mitophagy (2013)
  • 著者名/発表者名: Kanki T, Kurihara Y, Jin X, Goda T, Ono Y, Aihara M, Hirota Y, Saigusa T, Aoki Y, Uchiumi T, Kang D
  • 雑誌名: EMBO Rep 巻: 14(9) ページ: 788-94
  • DOI: 10.1038/embor.2013.114
  • 査読あり
• [雑誌論文] Effects of overexpression of mitochondrial transcription factor A on lifespan and oxidative stress response in Drosophila melanogaster (2013)
  • 著者名/発表者名: Matsuda T, Kanki T, Tanimura T, Kang D, Matsuura ET
  • 雑誌名: Biochem Biophys Res Commun 巻: 430(2) ページ: 717-21
  • DOI: 10.1016/j.bbrc.2012.11.084
  • 査読あり
• [雑誌論文] Mutation and functional analysis of ABCC2/multidrug resistance protein 2 in a Japanese patient with Dubin-Johnson syndrome (2013)
  • 著者名/発表者名: Uchiumi T, Tanamachi H, Kuchiwaki K, Kajita M, Matsumoto S, Yagi M, Kanki T, Kang D
  • 雑誌名: Hepatol Res 巻: 43(5) ページ: 569-75
  • DOI: 10.1111/j.1872-034X.2012.01103.x
  • 査読あり
• [雑誌論文] Protein instability and functional defect by mutations of dihydroorotate dehydrogenase with Miller syndrome patients (2012)
  • 著者名/発表者名: Fang J, Uchiumi T, Yagi M, Matsumoto S, Amamoto R, Saito T, Takazaki S, Kanki T, Yamaza H, Nonaka K, Kang D
  • 雑誌名: Biosci Rep 巻: 32(6) ページ: 631-9
  • DOI: 10.1042/BSR20120046
  • 査読あり
• [雑誌論文] Guidelines for the use and interpretation of assays for monitoring autophagy (2012)
  • 著者名/発表者名: Klionsky DJ etal
  • 雑誌名: Autophagy 巻: 8(4) ページ: 445-544
  • DOI: 10.4161/auto.19496
  • 査読あり
• [雑誌論文] p32/gC1qR is indispensable for fetal development and mitochondrial translation : importance of its RNA-binding ability (2012)
  • 著者名/発表者名: Yagi M, Uchiumi T, Takazaki S, Okuno B, Nomura M, Yoshida SI, Kanki T, Kang D
  • 雑誌名: Nucleic Acids Res 巻: 40(19) ページ: 9717-37
  • DOI: 10.1093/nar/gks774.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Localization of mRNAs encoding human mitochondrial oxidative phosphorylation proteins (2012)
  • 著者名/発表者名: Matsumoto S, Uchiumi T, Saito T, Yagi M, Takazaki S, Kanki T, Kang D
  • 雑誌名: Mitochondrion 巻: 12(3) ページ: 391-8
  • DOI: 10.1016/j.mito.2012.02.004.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Ribonucleoprotein Y-box-binding protein-1 regulates mitochondrial oxidative phosphorylation (OXPHOS) protein expression after serum stimulation through binding to OXPHOS mRNA (2012)
  • 著者名/発表者名: Matsumoto S, Uchiumi T, Tanamachi H, Saito T, Yagi M, Takazaki S, Kanki T, Kang D
  • 雑誌名: Biochem J 巻: 443(2) ページ: 573-84
  • DOI: 10.1042/BJ20111728.
  • 査読あり
• [雑誌論文] The physiological role of mitophagy : new insights into phosphorylation events (2012)
  • 著者名/発表者名: Hirota Y, Kang D, Kanki T
  • 雑誌名: Int J Cell Biol 巻: 2012 ページ: 354914
  • DOI: 10.1155/2012/354914
  • 査読あり
• [雑誌論文] Mitophagy plays an essential role in reducing mitochondrial production of reactive oxygen species and mutation of mitochondrial DNA by maintaining mitochondrial quantity and quality in yeast (2012)
  • 著者名/発表者名: Kurihara Y, Kanki T, Aoki Y, Hirota Y, Saigusa T, Uchiumi T, Kang D
  • 雑誌名: J Biol Chem 巻: 287(5) ページ: 3265-72
  • DOI: 10.1074/jbc.M111.280156.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Phosphorylation of Ser114 on Atg32 mediates mitophagy (2011)
  • 著者名/発表者名: Aoki Y, Kanki T, Hirota Y, Kurihara Y, Saigusa T, Uchiumi T, Kang D
  • 雑誌名: Mol Biol Cell 巻: 22(17) ページ: 3206-17
  • DOI: 10.1091/mbc.E11-02-0145.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Mitochondria autophagy in yeast (2011)
  • 著者名/発表者名: Kanki T, Klionsky D, Okamoto K
  • 雑誌名: Antioxid Redox Signal 巻: 14(10) ページ: 1989-2001
  • DOI: 10.1089/ars.2010.3762.
  • 査読あり
• [学会発表] Signaling pathways regulating mitochondria autophagy in yeast (2013)
  • 著者名/発表者名: Kanki T
  • 学会等名: ASMRM2013
  • 発表場所: 韓国ソウル
  • 年月日: 2013-11-04
• [学会発表] ミトコンドリアオートファジーの分子機構と生理的意義 (2012)
  • 著者名/発表者名: 神吉智丈
  • 学会等名: 第363回日本泌尿器科学会新潟地方会
  • 発表場所: 長岡
  • 年月日: 2012-09-08
• [図書] Assays for Autophagy II : Mitochondrial Autophagy Wei Xiao (ed.), Yeast Protocols, Methods in Molecular Biology (2014)
  • 著者名/発表者名: Kanki T and Okamoto K
  • 総ページ数: 1163:165-73.
  • 出版者: (doi:10.1007/978-1-4939-0799-1_11)
• [図書] ATG32 CONFERS SELECTIVE MITOCHONDRIAL SEQUESTRATION AS A CARGO FOR AUTOPHAGY AUTOPHAGY, CANCER, OTHER PATHOLOGIES, INFLAMMATION, IMMUNITY, INFECTION AND AGING, VOLUME 4: MITOPHAGY
  • 著者名/発表者名: Kurihara Y and Kanki T
  • 出版者: (印刷中)
• [備考]
  • URL: http://www.niigata-u.ac.jp/tenure_track/researcher/kanki_tomotake.html