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2011 年度 実施状況報告書

DJ-1の膜輸送への役割に関する研究

研究課題

研究課題/領域番号 23700389
研究機関順天堂大学

研究代表者

波田野 琢  順天堂大学, 医学部, 准教授 (60338390)

研究期間 (年度) 2011-04-28 – 2013-03-31
キーワードDJ-1 / 家族性パーキンソン病 / Synaptophysin / Rab3A / FRET / Immunoisolation
研究概要

培養細胞,初代神経培養を用いた細胞免疫染色法でDJ-1の細胞内局在を検討したところ,Rab3Aおよびsynaptophysin(SYP)と共局在した.また,マウス脳のシナプトソーム画分をショ糖密度勾配法で分画し,各種小胞マーカーの抗体およびDJ-1抗体を用いてウェスタンブロッティング法で検討し,免疫染色と同様にRab3AおよびSYPに局在する事を確認した.リコンビナントDJ-1蛋白は細胞膜やシナプトソームのplasma membraneに結合する事を明らかにした.さらに変異型DJ-1が膜結合能への変化を検討したところ,L166P変異体はplasma membraneへの結合能が低下していた.Immunoisolation法で,DJ-1が局在しているシナプス小胞を分離し検討したところ,SYPと同じ小胞に局在していた.DJ-1がシナプス小胞に局在し,実際にどのような機能に関わるかを検討する目的でFRET法を用いてSYPとDJ-1がliving cellで相互作用するかどうかを検討した.DJ-1の一部は少ないながらも確実にSYPとFRET現象を起こすことが確認され相互作用することがわかった.この現象は細胞内で顆粒状に認められており小胞上で相互作用する可能性が示唆された.SynaptophysinおよびRab3Aはエクソサイトーシスされる小胞に局在する事が知られている.つまり,これらの蛋白と共局在し相互作用することはDJ-1が放出機能に関わると考えられ,L166P変異DJ-1は膜への結合が低下することが病態に関与している事が考えられた.本研究成果はNeurobiology of Disease誌に掲載された.Usami Y, Hatano T, Imai S et al. Neurobiology of Disease 2011;43:651-652

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

1: 当初の計画以上に進展している

理由

当初の計画以上に進展し,DJ-1がシナプス小胞に局在する事を示し,エクソサイトーシスに関わる蛋白,小胞に関連することを明らかにした.この結果はNeurobiology of diseaseに掲載された.

今後の研究の推進方策

家族性パーキンソン病関連蛋白の中で膜輸送と関連する可能性のあるものに関してdrosophila modelを用いて検討し,そこにDJ-1が関わるか検討していく

次年度の研究費の使用計画

Drosophila modelを解析するために試薬,抗体を購入する.

  • 研究成果

    (8件)

すべて 2011

すべて 雑誌論文 (3件) (うち査読あり 3件) 学会発表 (4件) 図書 (1件)

  • [雑誌論文] DJ-1 associates with synaptic membranes.2011

    • 著者名/発表者名
      Usami Y, Hatano T, Imai S, Kubo S, Sato S, Saiki S, Fujioka Y, Ohba Y, Sato F, Funayama M, Eguchi H, Shiba K, Ariga H, Shen J, Hattori N.
    • 雑誌名

      Neurobiology of Disease

      巻: 43 ページ: 651-662

    • DOI

      doi:10.1016/j.nbd.2011.05.014

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Pramipexole reduces the prevalence of fatigue in patients with Parkinson’s disease.2011

    • 著者名/発表者名
      Morita A, Okuma Y, Kamei S, Yoshii F, Yamamoto T, Hashimoto S, Utsumi H, Hatano T, Hattori N, Matsumura M, Takahashi K, Nogawa S, Watanabe Y, Miyamoto T, Miyamoto M, Hirata K.
    • 雑誌名

      Internal Medicine

      巻: 50 ページ: 2163-2168

    • DOI

      DOI: 10.2169/internalmedicine.50.5456

    • 査読あり
  • [雑誌論文] The effect of Ndrg2 expression on astroglial activation.2011

    • 著者名/発表者名
      Takeichi T, Takarada-Iemata M, Hashida K, Sudo H, Okuda T, Kokame K, Hatano T, Takanashi M, Funabe S, Hattori N, Kitamura O, Kitao Y, Hori O.
    • 雑誌名

      Neurochemistry International

      巻: 59 ページ: 21-27

    • 査読あり
  • [学会発表] パーキンソン病患者の服薬状況に関するアンケート調査2011

    • 著者名/発表者名
      波田野 琢 他
    • 学会等名
      第52回日本神経学会総会
    • 発表場所
      名古屋国際会議場
    • 年月日
      2011 – 520
  • [学会発表] シンポジウム パーキンソン病の病態から臨床 up date; 治療2011

    • 著者名/発表者名
      波田野 琢
    • 学会等名
      第52回日本神経学会総会
    • 発表場所
      名古屋国際会議場
    • 年月日
      2011 – 520
  • [学会発表] DJ-1はシナプス小胞に局在する2011

    • 著者名/発表者名
      波田野 琢 他
    • 学会等名
      第30回 日本認知症学会
    • 発表場所
      タワーホール船堀
    • 年月日
      2011 – 1111
  • [学会発表] DJ-1はシナプス小胞に局在する2011

    • 著者名/発表者名
      波田野 琢 他
    • 学会等名
      第5回 日本パーキンソン病・運動障害疾患学会
    • 発表場所
      品川プリンスホテル
    • 年月日
      2011 – 106
  • [図書] Etiology and Pathophysiology of Parkinson’s disease.2011

    • 著者名/発表者名
      Hatano T, Hattori N
    • 総ページ数
      1-14
    • 出版者
      InTech

URL: 

公開日: 2013-07-10  

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