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2012 年度 研究成果報告書

高等真核生物の転写および複製に対する DNA-タンパク質クロスリンク損傷の影響

研究課題

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研究課題/領域番号 23710070
研究種目

若手研究(B)

配分区分基金
研究分野 放射線・化学物質影響科学
研究機関広島大学

研究代表者

中野 敏彰  広島大学, 大学院・理学研究科, 助教 (10526122)

研究期間 (年度) 2011 – 2012
キーワードDNA損傷 / 転写 / 複製
研究概要

DNA-タンパク質クロスリンク(DPC)損傷が、高等真核生物の転写や複製に対しどのような影響を及ぼすかを調べるためのアッセイ系を確立した。まず、バルキーな損傷のモデルとして、fluoresceinを含む鋳型を用いRNA polymerase IIの転写反応を行った。その結果、非転写鎖のfluoresceinは転写を阻害しなかったが、転写鎖のfluoresceinは転写を阻害し、損傷部位で転写が止まった生成物が見られた。また、Click反応を用いたDNAへの新規なDPC導入法を確立した。これにより、本研究で確立した試験管内RNA polymerase II転写反応系とDNA鋳型を用いて、DPCの転写阻害および転写エラー誘発を調べることが可能となった。

  • 研究成果

    (8件)

すべて 2013 2012 2011 その他

すべて 雑誌論文 (3件) (うち査読あり 3件) 学会発表 (4件) 備考 (1件)

  • [雑誌論文] Translocation and stability of replicative DNA helicase upon encountering DNA-protein cross-links.2013

    • 著者名/発表者名
      Nakano, T., Miyamoto-Matsubara M., Shoulkamy M.I. Amir M.H., Pack S.P., Ishimi Y., and Ide, H.
    • 雑誌名

      J. Biol. Chem.

      巻: 288 ページ: 4649-4658

    • 査読あり
  • [雑誌論文] T7 RNA polymerases backed up by covalently trapped proteins catalyze highly error prone transcription.2012

    • 著者名/発表者名
      Nakano, T., Ouchi R., Kawazoe, J., Pack S.P., Makino K., and Ide, H.
    • 雑誌名

      J. Biol. Chem.

      巻: 287 ページ: 6562-6572

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Detection of DNA-protein crosslinks (DPCs) by novel direct fluorescence labeling methods: distinct stabilities of aldehyde and radiation-induced DPCs2012

    • 著者名/発表者名
      Shoulkamy M.I., Nakano T., Ohshima M., Hirayama R., Uzawa A., Furusawa Y., and Ide H.
    • 雑誌名

      Nucleic Acids Res

      巻: 40 ページ: e123

    • 査読あり
  • [学会発表] DNA-タンパク質クロスリンク損傷が誘発する非標的転写エラー2012

    • 著者名/発表者名
      中野敏彰, (他3名)
    • 学会等名
      第33回日本環境変異原学会
    • 発表場所
      静岡市
    • 年月日
      20121129-30
  • [学会発表] DNA-protein crosslinks stall T7 RNA polymerase and induce untargeted transcriptional mutations2012

    • 著者名/発表者名
      Toshiaki Nakano, (他5名)
    • 学会等名
      12th International Workshop on Radiation Damage to DNA
    • 発表場所
      Prague, Czech
    • 年月日
      20120506-06
  • [学会発表] 蛍光標識を用いたDNA-タンパク質クロスリンク損傷が複製ヘリカーゼの進行に及ぼす影響2011

    • 著者名/発表者名
      中野敏彰, (他5名)
    • 学会等名
      第34回日本分子生物学会
    • 発表場所
      横浜市
    • 年月日
      2011-12-15
  • [学会発表] 蛍光標識を用いたDNA-タンパク質クロスリンク損傷の新規検出法2011

    • 著者名/発表者名
      中野敏彰, (他4名)
    • 学会等名
      第32回日本環境変異原学会
    • 発表場所
      東京
    • 年月日
      2011-11-21
  • [備考] 遺伝子化学研究室ホームページ

    • URL

      http://home.hiroshima-u.ac.jp/genechem/index.html

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公開日: 2014-09-25  

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