細胞サイズリポソームへの最少要素シグナル伝達経路の構成と作用因子解析

2012 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 23770222
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 基金
• 研究分野: 細胞生物学
• 研究機関: 三重大学
• 研究代表者: 湊元 幹太 三重大学, 大学院・工学研究科, 講師 (80362359)
• 研究期間 (年度): 2011 – 2012
• キーワード: 人工細胞モデル / 巨大リポソーム / シグナル伝達 / 膜タンパク質再構成 / バキュロウイルス / GUV(Giant Unilamellar Vesicle) / 少数要素による構成実験 / 細胞情報

研究概要

膜タンパク質要素を巨大リポソーム(GUV)に組換えバキュロウイルス粒子(BV)との膜融合により組み込んだ。最少要素からなるシグナル伝達古典経路の再構成を、GPCR・Gタンパク質・アデニル酸シクラーゼ(ADCY)の要素組込みによって試みた。生化学アッセイには課題が残ったものの、単一GUVへの要素取込は共焦点レーザー蛍光顕微鏡による可視化で確認した。これと並行し、GUVベースの人工細胞系実験に資する技術を開発した。

研究成果

• [雑誌論文] Monitoring of membrane collapse and enzymatic reaction with single giant liposomes embedded in agarose gel (2011)
  • 著者名/発表者名: Kanta Tsumoto, Masahiro Oohashi, Masahiro Tomita
  • 雑誌名: Colloid and Polymer Science 巻: Vol.289 ページ: 1337-1346
  • DOI: DOI:10.1007/s00396-011-2463-3
  • 査読あり
• [雑誌論文] Cadherin-integrated liposomes with potential application in a drug delivery system (2011)
  • 著者名/発表者名: Koki Kamiya, Kanta Tsumoto, TetsuroYoshimura, Kazunari Akiyoshi
  • 雑誌名: Biomaterials 巻: Vol.32 ページ: 9899-9907
  • DOI: DOI:10.1016/j.biomaterials.2011.09.008
  • 査読あり
• [学会発表] 界面通過法を用いた膜貫通型タンパク質提示巨大プロテオリポソーム (2012)
  • 著者名/発表者名: 西上美佐子、他
  • 学会等名: 第85回日本生化学会大会
  • 発表場所: 福岡国際会議場・マリンメッセ福岡(福岡市)
  • 年月日: 20121214-16
• [学会発表] Application of the Baculovirus-Liposome Membrane Fusion to Reconstitution of Membrane ProteinSystems toward Functional Artificial Cells (2012)
  • 著者名/発表者名: K. Tsumoto、他
  • 学会等名: 6th International Symposium on Nanomedicine (ISNM2012)
  • 発表場所: Shimane Prefecture Convention Center Kunibiki Messe(松江市)
  • 年月日: 20121129-1201
• [学会発表] Reconstituion of an integrated membrane protein system on giant liposomes using thebaculovirusliposome fusion technique (2012)
  • 著者名/発表者名: Takaaki Mori、他
  • 学会等名: The 2nd International Symposium for Sustainability by Engineering at MIU
  • 発表場所: 三重大学(津市)
  • 年月日: 20121101-02
• [学会発表] Confocal microscopic observation on baculovirus budded birus envelopels and liposome membranes using cell-sized artificial artificial lipid veisles prepared with a droplet-transfer method (2012)
  • 著者名/発表者名: Misako Nishigami、他
  • 学会等名: The 2nd International Symposium for Sustainability by Engineering at MIU
  • 発表場所: 三重大学(津市)
  • 年月日: 20121101-02
• [学会発表] Size, morphology and lamellarity of giant liposomes generated from solute-containing lipid films (2012)
  • 著者名/発表者名: Kanta Tsumoto、他
  • 学会等名: 日本生物物理学会第50回年会
  • 発表場所: 名古屋大学(名古屋市)
  • 年月日: 20120922-24
• [学会発表] バキュロウイルスを用いる人工細胞構築:少数要素による細胞的機能の発現をめざして (2012)
  • 著者名/発表者名: 湊元幹太
  • 学会等名: 日本化学会生体機能関連化学部会若手の会第24回サマースクール
  • 発表場所: 休暇村志賀島(福岡市)
  • 年月日: 20120709-10
• [学会発表] Giant Liposomes as Microcapsules with Large Trapping Volumes: Downsizing through VariousMembrane Filters and Analysis with a Calcein Quenching Method (2012)
  • 著者名/発表者名: Kanta Tsumoto、他
  • 学会等名: IEEE International Symposium on Micro-NanoMechatronics and Human Science (MHS2011)
  • 発表場所: 名古屋大学(名古屋市)
  • 年月日: 2012-11-08
• [学会発表] 界面通過法GUVを用いたバキュロウイルス‐リポソーム間の膜融合の可視化解析 (2012)
  • 著者名/発表者名: 森貴昭、他
  • 学会等名: 第76回日本生化学会中部支部例会・シンポジウム
  • 発表場所: 自然科学研究機構岡崎コンファレンスセンター(岡崎市)
  • 年月日: 2012-05-26
• [学会発表] Attempts to Utilize Giant Liposomes as Artificial Cell Models with Membrane Proteins (2012)
  • 著者名/発表者名: K. Tsumoto、他
  • 学会等名: 5th International Symposium on Nanomedicine (ISNM2011)
  • 発表場所: 名古屋大学(名古屋市)
  • 年月日: 2012-03-16
• [学会発表] Enhancement of encapsulation within giant vesicles by changing the pH or osmotic pressure (2011)
  • 著者名/発表者名: Kanta Tsumoto、他
  • 学会等名: 「 細胞を創る」研究会4.0
  • 発表場所: 千里ライフサイエンスセンター(吹田市)
  • 年月日: 2011-10-27
• [学会発表] 組換えバキュロウイルス-膜融合により巨大リポソーム膜へ構成したシグナル伝達経路タンパク質とその局在 (2011)
  • 著者名/発表者名: 大田亜由、他
  • 学会等名: 第84回日本生化学会大会
  • 発表場所: 京都国際会館(京都市)
  • 年月日: 2011-09-24
• [学会発表] アガロース埋込巨大リポソームを用いた動的形態変化と酵素反応のモニタリング:顕微鏡観察のための簡便な人工細胞膜モデル (2011)
  • 著者名/発表者名: 湊元幹太、他
  • 学会等名: 第84回日本生化学会大会
  • 発表場所: 京都国際会館(京都市)
  • 年月日: 2011-09-24
• [学会発表] 人工細胞モデルへの応用をめざしたpH転換による巨大リポソームへのタンパク質高封入 (2011)
  • 著者名/発表者名: 清水貴博、他
  • 学会等名: 第75回日本生化学会中部支部例会・シンポジウム
  • 発表場所: 静岡県立大学(静岡市)
  • 年月日: 2011-05-28
• [図書] 次世代ハイブリドーマテクノロジー (次世代医薬開発に向けた抗体工学の最前線(熊谷泉 監修)) (2012)
  • 著者名/発表者名: 湊元幹太、冨田昌弘
  • 総ページ数: 197-202
  • 出版者: シーエムシー出版
• [備考] ホームページ等研究代表者業績リスト
  • URL: http://scholar.google.com/citations?user=HesLhbwAAAAJ&hl=en