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2012 年度 実績報告書

被嚢動物オタマボヤを用いたセルロース結晶多形が生じるしくみの解析

研究課題

研究課題/領域番号 23780191
研究機関沖縄科学技術大学院大学

研究代表者

中島 啓介  沖縄科学技術大学院大学, その他の研究科, 研究員 (10422924)

キーワードセルロース / セルロース合成酵素 / 結晶多形 / アロモルフ / 単位胞 / オタマボヤ
研究概要

セルロース生合成における結晶形成過程を理解するべく、海洋性動物プランクトンであるワカレオタマボヤのセルロース合成酵素の解析を行った。ワカレオタマボヤは、幼生期と成体期において、それぞれ単位胞の異なるセルロースを合成し、その際、別個のセルロース合成酵素遺伝子(Od-CesA1とOd-CesA2)を用いる。Od-CesA1とOd-CesA2はアミノ酸配列上約7割が共通しており、残りの3割がそれぞれに特有の立体構造ひいては結晶形成過程における働きに効いているという仮説のもと、これらOd-CesAに変異を人為的に導入し、セルロース結晶特性にどのような違いが生じるかを検証することを目的とした。当初の計画では、Od-CesAのmRNAをワカレオタマボヤ胚に顕微注入し、発生後の生体中のセルロースを評価する予定であったが、新たな所属先におけるワカレオタマボヤの飼育に問題が発生し、かつ、顕微注入後の胚の発生率が悪かったため、結果的に、効率が悪い作業でありながら意図した影響を評価することが難しいと結論づけられた。計画時に、このような事態への対策として、異種発現系によるセルロース合成酵素の機能評価を準備していたため、二年目は異種発現系を用いることにした。準備した異種発現系ホストは、大腸菌・酵母・昆虫細胞の3種類である。大腸菌はコールドショック誘導プラスミドを基本とした系が機能しているため、これを用いて発現を試みたがOd-CesAの発現を誘導することは困難であった。現在、ピキア酵母ならびに昆虫細胞Sf9を用いた発現を調整しているところである。ピキア酵母に関しては、発現していることを示すデータが得られているため、押し進めて当初の目的を果たしたい。

  • 研究成果

    (2件)

すべて 2012 その他

すべて 学会発表 (2件)

  • [学会発表] The crystalline phase of cellulose changes under developmental control in a marine chordate2012

    • 著者名/発表者名
      Keisuke Nakashima
    • 学会等名
      3rd International Cellulose Conference
    • 発表場所
      札幌
    • 年月日
      20121010-20121012
  • [学会発表] 動物がつくるセルロースの特徴

    • 著者名/発表者名
      中島啓介
    • 学会等名
      細胞壁研究者ネットワーク
    • 発表場所
      那覇

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公開日: 2014-07-24  

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