サイトカインネットワークを利用した魚病診断法の確立

2012 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 23780199
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 基金
• 研究分野: 水産学一般
• 研究機関: 宮崎大学
• 研究代表者: 河野 智哉 宮崎大学, IR 推進機構, 助教 (60527547)
• 研究期間 (年度): 2011 – 2012
• キーワード: 魚病 / サイトカイン

研究概要

19 種類のサイトカイン遺伝子をターゲットとしたマルチプレックスシステムを構築し、病原体成分または病原細菌接種時のトラフグにおけるサイトカイン遺伝子の発現動態を解析した。その結果、全ての試験において炎症性サイトカインの発現増加が認められた。さらに、ウイルス疑似核酸物質による刺激においてのみ、I-IFN の顕著な増加が認められた。続いて、病原細菌または寄生虫感染時の腎臓における IL-10、IL-17/AF1、IFN-y、IL-4/13の発現動態を解析した。細菌感染時は全てのサイトカインについて産生の増加が認められた。また、寄生虫感染時も同様の傾向を示したが、特に IL-4/13 の産生が顕著に増加することが確認された。続いて細胞内サイトカインの検出を試み、IFN-y産生細胞の検出技術の構築に成功した。当該技術によって、末梢血白血球中の IFN-y産生 Th 細胞は病原体構成成分での刺激によって増加することが確認された。

研究成果

• [雑誌論文] Characterization and expression analysis of Th-POK from the Japanese pufferfish, Takifugu rubripes. (2013)
  • 著者名/発表者名: Kono T., Hamasuna S., Korenaga H., Iizasa T., Nagamine R., Ida T., Sakai M
  • 雑誌名: Comparative Biochemistry and Physiology: Part B: Biochemistry and Molecular Biology 巻: 164 ページ: 124-132
  • 査読あり
• [雑誌論文] Establishment of a multiplex RT-PCR assay for rapid detection of fish cytokines. (2013)
  • 著者名/発表者名: Kono T., Takayama, H., Nagamine R., Korenaga H., Sakai M.
  • 雑誌名: Veterinary Immunology and Immunopathology 巻: 151 ページ: 90-101
  • 査読あり
• [雑誌論文] The role of neuromedin U during inflammatory response in the common carp (2013)
  • 著者名/発表者名: Kono T., Hamasuna S., Korenaga H., Iizasa T., Nagamine R.,, Ida T., Sakai M
  • 巻: 32
  • ページ: 151-160
  • 査読あり
• [雑誌論文] Identification of IL-34 in teleost fish: differential expression of rainbow trout IL-34, MCSF1 and MCSF2, ligands of the MCSF receptor (2012)
  • 著者名/発表者名: Wang T., Kono T., Montea M.M., Kuse H., Costa M.M., Korenaga H., Maehra T., Husaina M., Sakai M., SecombesC.J
  • 雑誌名: Molecular Immunology 巻: 53 ページ: 398-409
  • 査読あり
• [学会発表] A multiplex RT-PCR assay for rapid and sensitive detection of cytokines in fish (2012)
  • 著者名/発表者名: Kono T., Takayama H, Nagamine R., Korenaga H., Sakai M
  • 学会等名: Cytokine 2012, 10th Joint Annual Meeting
  • 発表場所: Geneve, Switzerland
  • 年月日: 2012-09-13
• [学会発表] Characterization and expression analysis of the Japanese pufferfish Takifugu rubripeshomologue of the mammalian Th-POK (2012)
  • 著者名/発表者名: Nagamine R., KorenagaH., Secombes C.J., Kono T
  • 学会等名: International Society of Developmental and Comparative Immunology (The 12th Congress of ISDCI)
  • 発表場所: Fukuoka Japan
  • 年月日: 2012-07-10
• [学会発表] Identification, characterization and expression analysis of IL-17 receptors, Act1 and TRAF6 genes in Japanese pufferfish (Takifugu rubripes) (2012)
  • 著者名/発表者名: Korenaga H., Kono T., Sakai M.
  • 学会等名: International Society of Developmental and Comparative Immunology (The 12th Congress of ISDCI)
  • 発表場所: Fukuoka Japan
  • 年月日: 2012-07-10
• [学会発表] 魚類IL-34遺伝子の分離同定とその機能について (2012)
  • 著者名/発表者名: 久世悠、是永大樹、長峯隆介、河野智哉
  • 学会等名: 平成24年度日本水産学会春季大会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2012-03-29
• [学会発表] Is carp neurimedin U involved in the immune regulation ? (2011)
  • 著者名/発表者名: Hamasuna S., Korenaga H., Iizasa T., Ida T., Sakai M., Kono T
  • 学会等名: 15^th
  • 発表場所: Split Croatia
  • 年月日: 2011-09-13
• [学会発表] The expression analysis of fugucytokine genes by multiplex RT-PCR assay 15^th EAFP (2011)
  • 著者名/発表者名: Takayama, H., Kuse H., Korenaga H., Sakai M.,Kono T.
  • 発表場所: Split Croatia
  • 年月日: 2011-09-13
• [産業財産権] サイトカイン遺伝子を利用したマルチプレックス RT-PCR による魚類健康診断法 (2011)
  • 発明者名: 河野智哉、高山博章
  • 権利者名: 宮崎大学
  • 産業財産権番号: 2011-191778
  • 出願年月日: 2011-09-02