マウス胚性幹細胞の分化指向性における脂質シグナリングの役割の解明

2012 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 23790116
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 基金
• 研究分野: 生物系薬学
• 研究機関: 国立医薬品食品衛生研究所
• 研究代表者: 安田 智 国立医薬品食品衛生研究所, 遺伝子細胞医薬部, 室長 (20381262)
• 研究期間 (年度): 2011 – 2012
• キーワード: 発生生物学

研究概要

細胞治療薬開発を目的とした心筋細胞の効率良い発生・増殖のためには、多能性幹細胞からの心筋分化メカニズムを理解することが必要である。心筋分化における特性が異なるP19CL6 細胞サブラインを単離し、トランスクリプトーム解析により心筋分化に関連する24 遺伝子(CMR 遺伝子)を抽出した。マウス胚性癌細胞(EC 細胞)においてRNAi によりCMR 遺伝子をノックダウンし、心筋細胞に分化させたところ、18 のCMR 遺伝子で自 発的拍動もしくは心筋特異的マーカー遺伝子発現量に影響が見られた。マウス胚性幹細胞(ES 細胞)においても検討したところ、AW551984、prostamide/prostaglandin F synthase、Cd302 のノックダウンによって、EC 細胞とES 細胞に共通して心筋分化の程度に変化が観察された。 AW551984 のノックダウンは、多能性および中胚葉への分化に影響を及ぼすことなく、心筋特 異的転写因子であるNkx2.5 の発現を抑制した。さらに、Wnt/β-catenin シグナルは胚葉体形成時 におけるAW551984 とNkx2.5 の発現を増強した。これらのことから、AW551984 はWnt/β-catenin シグナルによるNkx2.5 発現を調節することにより、心筋分化を制御することが示唆された。

研究成果

• [雑誌論文] Tumorigenicity studies for human pluripotent stem cell?derived products (2013)
  • 著者名/発表者名: Kuroda T, Yasuda S, Sato Y
  • 雑誌名: Biol. Pharm. Bull 巻: 36(2) ページ: 189-92
• [雑誌論文] 再生医療における細胞・組織加工製品の品質・安全性の評価 (2012)
  • 著者名/発表者名: 安田智
  • 雑誌名: PHARMSTAGE 巻: 12(7) ページ: 1-2
• [雑誌論文] Highly sensitive in vitro methods for detection of residual undifferentiated cells in retinal pigment epithelial cells derived from human iPS cells (2012)
  • 著者名/発表者名: Kuroda T, Yasuda S, Kusakawa S, Hirata N, Kanda Y, Suzuki K, Takahashi M, Nishikawa S, Kawamata S, Sato Y.
  • 雑誌名: PLoS One 巻: 7(5)
  • DOI: doi:10.1371/journal.pone.0037342.
• [雑誌論文] AW551984: a novel regulator of cardiomyogenesis in pluripotent embryonic cells (2011)
  • 著者名/発表者名: Yasuda S, Hasegawa T, Hosono T, Satoh M, Watanabe K, Ono K, Shimizu S, Hayakawa T, Yamaguchi T, Suzuki K, Sato Y
  • 雑誌名: Biochem. J. 巻: 437 (2) ページ: 345-355
• [学会発表] 細胞・組織加工製品の製造工 程管理法としてのNOGマウス造腫瘍性 試験系のバリデーション (2013)
  • 著者名/発表者名: 草川森士、町田一彦、安田智、黒田拓也、澤田留美、伊藤守、堤秀樹、川真田真、佐藤陽治
  • 学会等名: 第12回日本再生医療学会総会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 20130300
• [学会発表] ヒト脂肪由来間葉系幹細胞における虚血応答性制御因子の特性解析 (2013)
  • 著者名/発表者名: 佐藤光利、中島みどり、倉持智美、安田 智、佐藤陽治
  • 学会等名: 第86回日本薬理学会年会
  • 発表場所: 福岡
  • 年月日: 20130300
• [学会発表] レポーター蛋白を利用した多能性幹細胞の神経分化の評価 (2012)
  • 著者名/発表者名: 草川森士、舩田正彦、安田智、黒田拓也、山内淳司、佐藤陽治
  • 学会等名: 第35回日本神経科学大会
  • 発表場所: 名古屋
  • 年月日: 20120900
• [学会発表] Validation of in vitro methods for detection of residual undifferentiated cells in retinal pigment epithelial cells derived from human induced pluripotent stem cells (2012)
  • 著者名/発表者名: Kuroda T, Yasuda S, Kusakawa S, Suzuki K, Kawamata S, Sato Y.
  • 学会等名: International Society for Stem Cell Research 10 th Annual Meeting
  • 発表場所: Yokohama
  • 年月日: 20120600
• [学会発表] ヒトiPS 細胞由来 網膜色素上皮細胞中に残存する未分化 細胞のin vitro 高感度検出法の開発と評価 (2012)
  • 著者名/発表者名: 黒田拓也、安田智、草川森士、鈴木和博、川真田伸、佐藤陽治
  • 学会等名: 第11回日本再生医療学会総会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 20120600
• [学会発表] Identification of genes that regulate cardiomyogenesis in mouse pluripotent embryonic cells (2011)
  • 著者名/発表者名: Yasuda S, Hasegawa T, Hosono T, Satoh M, Yamaguchi T, Suzuki K, Sato Y.
  • 学会等名: International Society for Stem Cell Research 9 th Annual Meeting
  • 発表場所: Toronto, Canada
  • 年月日: 20110600
• [図書] 安全性評価の総論、造腫瘍性試験の現状と展望「幹細胞医療 の実用化技術と産業展望」 (2013)
  • 著者名/発表者名: 安田智、佐藤陽治
  • 総ページ数: 247-255
  • 出版者: シーエムシー出版
• [図書] 日本規格協会 (2012)
  • 著者名/発表者名: 安田智、佐藤陽治
  • 総ページ数: 206-214
  • 出版者: 再生医療に対する規 制・制度等について:欧米の動向「幹細 胞技術の標準化-再生医療への期待」
• [備考]
  • URL: http://www.nihs.go.jp/cgtp/cgtp/sec2/sispsc/html/index.html