Ｒａｄｉｘｉｎのリン酸化変化に伴う胆汁排泄輸送体の局在変化が及ぼす生体への影響

2013 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 23790172
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 基金
• 研究分野: 医療系薬学
• 研究機関: 千葉大学
• 研究代表者: 関根 秀一 千葉大学, 薬学研究科(研究院), 助教 (70401007)
• 研究期間 (年度): 2011 – 2013
• キーワード: 胆汁うっ滞 / トランスポーター / 胆汁酸

研究概要

本研究では、慢性肝炎モデルにて、胆汁うっ滞の改善に伴う肝病態に対する影響を評価すると共に、胆汁排泄輸送体の局在変化に関わる因子としてRadixinなどのアンカー蛋白質のリン酸赤状態の変化の生体への影響について検討を行った。その結果、胆汁輸送体の局在制御を担う可能性のある複数の蛋白質（Anexin A2）を同定し、MRP2の膜局在の制御因子であることを明らかとした。さらにMRP2と同様に胆汁流の生成に関わるBSEPの機能低下時において、培地中の胆汁酸に依存した毒性感受性の亢進することをヒト、ラット及びヒト肝細胞を用いたSandwich cultured hepatocyteにおいて見出した。

研究成果

• [雑誌論文] Ezrin regulates the expression of Mrp2/Abcc2 and Mdr1/Abcb1 along the rat small intestinal tract (2013)
  • 著者名/発表者名: Nakano T, Sekine S, Ito K, Horie T.
  • 雑誌名: Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol 巻: 305(11) ページ: 807-17
  • DOI: 10.1152/ajpgi.00187.2013.
• [雑誌論文] The role of cyclophilin D in interspecies differences in susceptibility to hepatotoxic drug-induced mitochondrial injury (2013)
  • 著者名/発表者名: Sekine S, Kimura T, Motoyama M, Shitara Y, Wakazono H, Oida H, Horie T
  • 雑誌名: Biochem Pharmacol 巻: 15;86(10) ページ: 1507-14
  • DOI: 10.1016/j.bcp.2013.08.027.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Disruption of ZO-1/claudin-4 interaction in relation to inflammatory responses in methotrexate-induced intestinal mucositis (2013)
  • 著者名/発表者名: Hamada K, Kakigawa N, Sekine S, Shitara Y, Horie T
  • 雑誌名: Cancer Chemother Pharmacol 巻: 72(4) ページ: 757-65
  • DOI: 10.1007/s00280-013-2238-2.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Ex vivo and in vivo investigations of the effects of extracts of Vernonia amygdalina, Carica papaya and Tapinanthus sessilifolius on digoxin transport and pharmacokinetics : Assessing the significance on rat intestinal P-glycoprotein efflux (2013)
  • 著者名/発表者名: Oga EF, Sekine S, Horie T
  • 雑誌名: Drug Metab Pharmacokinet 巻: 28(4) ページ: 314-20
  • 査読あり
• [雑誌論文] P-glycoprotein mediated efflux in Caco-2 cell monolayers : the influence of herbals on digoxin transport (2012)
  • 著者名/発表者名: Oga EF, Sekine S, Shitara Y, Horie T
  • 雑誌名: J Ethnopharmacol 巻: 144(3) ページ: 612-7
  • 査読あり
• [雑誌論文] Mechanistic differences in permeation behavior of supersaturated and solubilized solutions of carbamazepine revealed by nuclear magnetic resonance measurements (2012)
  • 著者名/発表者名: Ueda K, Higashi K, Limwikrant W, Sekine S, Horie T, Yamamoto K, Moribe K
  • 雑誌名: Mol Pharm 巻: 9(11) ページ: 3023-33
  • DOI: 10.1021/mp300083e.
• [雑誌論文] Potential P-glycoprotein-mediated drug-drug interactions of antimalarial agents in Caco-2 cells (2012)
  • 著者名/発表者名: Oga EF, Sekine S, Shitara Y, Horie T
  • 雑誌名: Am J Trop Med Hyg 巻: 87(1) ページ: 64-9
  • DOI: 10.4269/ajtmh.2012.11-0817.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Sustained intrahepatic glutathione depletion causes proteasomal degradation of multidrug resistance-associated protein 2 in rat liver (2012)
  • 著者名/発表者名: Sekine S, Mitsuki K, Ito K, Kugioka S, Horie T
  • 雑誌名: Biochim Biophys Acta 巻: 1822(6) ページ: 980-7
  • DOI: 10.1016/j.bbadis.2012.01.015.
• [雑誌論文] Bile salt export pump inhibitors are associated with bile acid-dependent drug-induced toxicity in sandwich-cultured hepatocytes (2011)
  • 著者名/発表者名: Ogimura E, Sekine S, Horie T
  • 雑誌名: Biochem Biophys Res Commun 巻: 416(3-4) ページ: 313-7
  • DOI: 10.1016/j.bbrc.2011.11.032.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Interaction of Mrp2 with radixin causes reversible canalicular Mrp2 localization induced by intracellular redox status (2011)
  • 著者名/発表者名: Sekine S, Ito K, Saeki J, Horie T
  • 雑誌名: Biochim Biophys Acta 巻: 1812(11) ページ: 1427-34
  • DOI: 10.1016/j.bbadis.2011.07.015.
• [雑誌論文] LPS-induced dissociation of multidrug resistance-associated protein 2 (Mrp2) and radixin is associated with Mrp2 selective internalization in rats (2011)
  • 著者名/発表者名: Saeki J, Sekine S, Horie T
  • 雑誌名: Biochem Pharmacol. 巻: 81(1) ページ: 178-84
  • DOI: 10.1016/j.bcp.2010.09.016.
  • 査読あり
• [学会発表] サンドイッチ培養肝細胞における薬剤毒性評価と薬剤性胆汁うっ滞リスクの相関性の検討 (2014)
  • 著者名/発表者名: 野崎麻友香、関根秀一、伊藤晃成
  • 学会等名: 日本薬学会第134年会
  • 発表場所: 熊本
  • 年月日: 2014-03-27
• [学会発表] 反応性代謝物を考慮した薬剤性肝障害発症におけるミトコンドリア毒性の関与 (2014)
  • 著者名/発表者名: 田中彩香、関根秀一、白川真帆、堀江利治、伊藤晃成
  • 学会等名: 日本薬学会第134年会
  • 発表場所: 熊本
  • 年月日: 2014-03-27
• [学会発表] LPS併用薬剤性肝障害モデルラットにおけるミトコンドリア機能評価 (2014)
  • 著者名/発表者名: 荒川公一、関根秀一、田中彩香、劉聡、伊藤晃成
  • 学会等名: 日本薬学会第134年会
  • 発表場所: 熊本
  • 年月日: 2014-03-27
• [学会発表] 胆汁酸排泄輸送体阻害に伴う肝細胞毒性に寄与する胆汁酸分子種の解析 (2014)
  • 著者名/発表者名: 4深貝明子、関根秀一、大泉久美子、伊藤晃成
  • 学会等名: 日本薬学会第134年会
  • 発表場所: 熊本
  • 年月日: 2014-03-27
• [学会発表] 血管側胆汁酸排泄輸送体MRPs阻害薬物による胆汁酸依存性肝細胞障害に関する検討 (2014)
  • 著者名/発表者名: 薄田健史、関根秀一、青木重樹、伊藤晃成
  • 学会等名: 日本薬学会第134年会
  • 発表場所: 熊本
  • 年月日: 2014-03-27
• [学会発表] サンドイッチ培養肝細胞を用いた胆汁うっ滞性肝障害誘発薬物の毒性評価系の構築 (2013)
  • 著者名/発表者名: 関根秀一、薄田健史、堀江利治、伊藤晃成
  • 学会等名: 第35回生体膜と薬物の相互作用シンポジウム
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2013-11-22
• [学会発表] Establishment of in vitro screening system for the reactive metabolite induced mitochondrial toxicity (2013)
  • 著者名/発表者名: 田中彩香、関根秀一、白川真帆、堀江利治、伊藤晃成
  • 学会等名: 第28回日本薬物動態学会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2013-10-09
• [学会発表] The involvement of basal efflux of bile acids on drug induced bile acids-dependent hepatotoxicity in rat sandwich cultured hepatocytes (2013)
  • 著者名/発表者名: 薄田健史、関根秀一、伊藤晃成
  • 学会等名: 第28回日本薬物動態学会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2013-10-09
• [学会発表] HepaRG細胞を用いた薬物誘発性胆汁酸依存性毒性の評価系の確立 (2013)
  • 著者名/発表者名: 薄田健史、関根秀一、荻村栄一郎、橋本希美、伊藤晃成、堀江利治
  • 学会等名: 第40回日本毒性学会
  • 発表場所: 千葉
  • 年月日: 2013-06-17
• [学会発表] メトトレキサート誘発性消化管障害における好中球浸潤の関与 (2013)
  • 著者名/発表者名: 関根秀一、浅田千晶、前田友子、書川尚子、堀江利治
  • 学会等名: 第40回日本毒性学会
  • 発表場所: 千葉
  • 年月日: 2013-06-17
• [学会発表] ミトコンドリアの毒性感受性決定因子としてのミトコンドリア内GSH量の検討 (2013)
  • 著者名/発表者名: 白川真帆、関根秀一、伊藤晃成、堀江利治
  • 学会等名: 日本薬剤学会第28年会
  • 発表場所: 愛知
  • 年月日: 2013-05-23
• [学会発表] Evaluation of bile acid dependent drug-induced liver injury in sandwich cultured rat hepatocytes (2012)
  • 著者名/発表者名: Shuichi Sekine, Eiichiro Ogimura, Toshiharu Horie
  • 学会等名: MDO-ISSX
  • 発表場所: The Netherlands
  • 年月日: 20120617-21
• [学会発表] BSEP阻害剤による胆汁酸依存的毒性のサンドイッチ培養肝細胞での評価法の確立 (2012)
  • 著者名/発表者名: 関根秀一、薄田健史、荻村栄一郎、堀江利治
  • 学会等名: 第27年会日本薬剤学会
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 20120524-26
• [学会発表] C型肝炎ウイルスコア蛋白質と鉄により誘発される細胞障害増悪に対するミトコンドリア鉄取り込み機構の関与 (2012)
  • 著者名/発表者名: 伊藤好美,関根秀一,堀江利治,小池和彦,森屋恭爾,新谷良澄,藤江肇,堤武也,三好秀征,藤永秀剛,新澤靖子,藤江肇,堤武也,三好秀征,藤永秀剛,新澤靖子
  • 学会等名: 第132年会日本薬学会
  • 発表場所: 札幌
  • 年月日: 20120328-31
• [学会発表] 薬物誘発性肝障害発生機序における肝ミトコンドリア内グルタチオン量の関与 (2012)
  • 著者名/発表者名: 小澤口尚子,関根秀一,堀江利治
  • 学会等名: 第132年会日本薬学会
  • 発表場所: 札幌
  • 年月日: 20120328-31
• [学会発表] Toshiharu Horie Sandwich-cultured hepatocytes enable a predictive evaluation of BSEP/Bsep dysfunction-mediated (2012)
  • 著者名/発表者名: Shuichi Sekine, Eiichiro Ogimura
  • 学会等名: drug-induced hepatotoxicity SOT
  • 発表場所: San Francisco, USA
  • 年月日: 20120311-15
• [学会発表] 生体成分共存下におけるカテキンの安定性とROSの生成 (2012)
  • 著者名/発表者名: 大久保江美、関根秀一、若林賢一、笠松俊夫、西山直宏、堀江利治
  • 学会等名: 第20回年会日本過酸化脂質・抗酸化物質学会
  • 発表場所: 仙台
  • 年月日: 2012-08-25
• [学会発表] 酸化ストレス誘発性胆汁っ滞時における胆汁排泄輸送体の局在制御機構の解明 (2012)
  • 著者名/発表者名: 関根秀一、伊藤晃成、堀江利治
  • 学会等名: 肝病態生理研究会
  • 発表場所: 金沢
  • 年月日: 2012-06-06
• [学会発表] C型肝炎の病態悪化に対するミトコンドリア鉄蓄積と鉄取り込み機構の関与 (2012)
  • 著者名/発表者名: 伊藤好美,関根秀一,堀江利治,小池和彦,森屋恭爾,新谷良澄,藤江肇,堤武也,三好秀征,藤永秀剛,新澤靖子,藤江肇,堤武也,三好秀征,藤永秀剛,新澤靖子
  • 学会等名: 肝病態生理研究会
  • 発表場所: 金沢
  • 年月日: 2012-06-06
• [学会発表] 酸化ストレス誘発性胆汁鬱滞におけるMRP2の局在制御機構の解明 (2011)
  • 著者名/発表者名: 堀江利治、関根秀一、伊藤晃成
  • 学会等名: 第33回生体膜と薬物の相互作用シンポジウム
  • 発表場所: 岡山
  • 年月日: 20111124-25
• [学会発表] POTENTIAL P-GLYCOPROTEIN MEDIATED DRUG-DRUG INTERACTIONS OF SOME ANTI-MALARIALS (2011)
  • 著者名/発表者名: Enoche F.Oga、関根秀一、設楽悦久、堀江利治
  • 学会等名: 第26回日本薬物動態学会
  • 発表場所: 広島
  • 年月日: 20111116-18
• [学会発表] Sandwich culutured rat hepatocytesを用いた胆汁酸依存性薬剤肝障害の定量的評価法 (2011)
  • 著者名/発表者名: 荻村栄一朗,関根秀一,堀江利治
  • 学会等名: 第26回日本薬物動態学会
  • 発表場所: 広島
  • 年月日: 20111116-18
• [学会発表] 薬物誘発性ミトコンドリア感受性の動物間種差におけるCyclophilin Dの関与 (2011)
  • 著者名/発表者名: 関根秀一、木村友映、本山碧、堀江利治
  • 学会等名: 第38回日本トキシコロジー学会学術年会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 20110711-13
• [学会発表] Sandwich cultured rat hepatocytesを用いた胆汁酸依存性薬剤性肝障害の定量的評価 (2011)
  • 著者名/発表者名: 荻村栄一朗,関根秀一,堀江利治
  • 学会等名: 第38回日本トキシコロジー学会学術年会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 20110711-13
• [学会発表] 酸化ストレス時におけるMrp2タンパク分解に対するユビキチン様修飾因子の関与 (2011)
  • 著者名/発表者名: 釘岡里恵,関根秀一,三ツ木香織、伊藤晃成、堀江利治
  • 学会等名: 第26年会日本薬剤学会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 20110529-31
• [学会発表] メトトレキサート誘発性消化管バリア機能障害における好中球浸潤の関与 (2011)
  • 著者名/発表者名: 書川尚子,関根秀一,浅田千晶、前田智子、堀江利治
  • 学会等名: 第26年会日本薬剤学会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 20110529-31
• [学会発表] 癌細胞の多剤耐性におけるPDZタンパク質の関与 (2011)
  • 著者名/発表者名: 長里美希,関根秀一、日比野翔、堀江利治
  • 学会等名: 第26年会日本薬剤学会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 20110529-31
• [学会発表] 細胞内レドックス状態の変化によるMrp2-radixin複合体の局在制御機構の解明 (2011)
  • 著者名/発表者名: 堀江利治、関根秀一、伊藤晃成
  • 学会等名: 第26年会日本薬剤学会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 20110529-31
• [学会発表] C型肝炎ウイルスコア蛋白質により誘発されるミトコンドリア障害に対する鉄蓄積の関与 (2011)
  • 著者名/発表者名: 伊藤好美,関根秀一,堀江利治,小池和彦,森屋恭爾,新谷良澄,藤江肇,堤武也,三好秀征,藤永秀剛,新澤靖子,藤江肇,堤武也,三好秀征,藤永秀剛,新澤靖子
  • 学会等名: 第131年会日本薬学会
  • 発表場所: 静岡
  • 年月日: 20110328-31
• [学会発表] 肝炎症時の胆汁排泄輸送体Mrp2の内在化機構解明 (2011)
  • 著者名/発表者名: 佐伯淳二郎,関根秀一,堀江利治
  • 学会等名: 第131年会日本薬学会
  • 発表場所: 静岡
  • 年月日: 20110328-31
• [学会発表] 肝障害誘発性薬物による肝毒性に対する肝ミトコンドリア中のグルタチオン量の関与 (2011)
  • 著者名/発表者名: 小澤口尚子,関根秀一,堀江利治
  • 学会等名: 第19年会日本過酸化脂質・抗酸化物質学会
  • 発表場所: 仙台
  • 年月日: 2011-12-17
• [図書] 分担DDS製剤の開発・評価の実用化手法2013年 (2013)
  • 著者名/発表者名: 芦澤一英, 他
  • 総ページ数: 680
  • 出版者: 技術情報協会
• [備考]
  • URL: http://www.p.chiba-u.ac.jp/lab/yakuzai/
• [産業財産権] 被験化合物の肝毒性を評価する方法および肝毒性を有する化合物のスクリーニング方法 (2011)
  • 発明者名: 関根秀一
  • 権利者名: 千葉大学
  • 産業財産権種類: 発明
  • 産業財産権番号: 2011-152087号
  • 出願年月日: 2011-07-23